PCR原理是什么？其基本步骤如何？解释各步骤的目的。

题目

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第1题：

简述医院战略制定的步骤及各步骤的目的。

正确答案: （1）资源状况分析：掌握医院现存资源状况，明确实现未来战略意图和目标的优势资源和劣势资源，为资源的利用、开发和创造提供方向和行动基础。
（2）经营能力分析：充分了解医院能力的形成、变化过程，自身的优、劣势，以及自身所处的竞争地位。
（3）内部条件和外部环境的综合分析：通过分析找出医院自身的战略定位，选择或建立医院的核心能力，制定战略发展框架。

第2题：

简述PCR的步骤。PCR是如何使得特异性DNA片段以几何级数倍增的？

正确答案: PCR分三步：
①双链模板DNA变性。双链解开成单链。
②退火。
即引物与单链DNA两端互补序列配对，形成DNA聚合反应中的模板与引物的关系。没有引物的帮助，所有的DNA聚合酶都无能力从头合成一条新链。
③链的延伸。
DNA聚合酶从引物3’-OH端开始进行聚合酶反应，直至完全产生两条互补的新链。
三个反应阶段结束后，又可以开始下一次的循环，引物链的延伸产物与原来的模板DNA经加热变性后，也作为模板DNA和另一个引物互补，在DNA聚合酶作用下又发生引物链的延伸反应。这样反复循环数十次，可使特异性DNA片段以几何级数倍增。

第3题：

聚合酶链反应(PCR)由

A、变性-延伸-退火三个基本反应步骤构成

B、延伸-变性-退火三个基本反应步骤构成

C、变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成

D、延伸-退火-变性三个基本反应步骤构成

E、退火-变性-延伸三个基本反应步骤构成

参考答案：C

第4题：

PCR的基本原理是什么？

正确答案: PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理，以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质，人为地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成单链，单链DNA与人工合成的引物退火，然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成PCR反应的一个循环，此循环的反复进行，就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性：模板双链DNA单链DNA，94℃。退火：引物＋单链DNA杂交链，引物的Tm值。引物的延伸：温度至70℃左右，TaqDNA聚合酶以4种dNTP为原料，以目的DNA为模板，催化以引物３’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应，形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR，就是如此反复循环，使目的DNA得到高效快速扩增。

第5题：

简述PCR原理及其基本反应步骤。

正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板互补的DNA链。

第6题：

顺放步骤目的和步骤是什么？

正确答案:1、顺放时间可调，且应根据要求的CO₂气体纯度和回收率调整KV123A、 KV123B 和KV108的开关时间，开的时间过长，影响CO₂气体回收率；净化段顺放步骤的目的是利用顺放气对吸附塔进行吹扫，从而将吸附剂内吸附的气体吹扫出来，达到再生的目的。
2、提纯段顺放步骤的目的是利用产品CO₂气体将吸附塔内的非CO₂气体顶出，从而冲洗出来，顺放时间可调，且应根据吸附塔压降调整二次顺放的时间，尽量做到二次的压差均匀。
逆放步骤：
逆放过程实际上是很迅速的。逆放速度过快，不仅使系统产生噪声，而且会造成对吸附剂的磨损。使逆放压力在较匀速的条件下在规定的时间内缓慢放至低压，要求逆放终时压力愈低愈好，一般约0.01～0.02 MPa，逆放终时压力愈低，对吸附剂的解吸有利，吸附剂再生效果好，同时有效气体回收率提高。

第7题：

PCR反应一般分为几个步骤？各步骤有什么特点？

正确答案: A.变性：双链DNA变成单链DNA。变性温度的高低由G+C含量决定；变性时间由DNA链长度决定。常规PCR变性条件为94～95度45s。
B.退火，将温度下降至适宜温度，使引物与模板DNA退火结合；退火是使引物和模板DNA复性。复性过程采取的温度（Ta）至关重要。复性温度过高，引物不能与模板很好地复性，扩增效率很低；复性温度太低，引物将产生非特异性复性，导致非特异性的DNA片段的扩增。退火温度通常在比理论计算的引物和模板的熔解温度低3～5℃的条件下进行。
C.延伸：寡核苷酸引物的延长，一般在耐热DNA聚合酶的最适温度下进行。对于Taq酶，为72～78度。
D 循环数：PCR扩增所需的循环数取决于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的效率。
一般扩展条件：94℃60s 37℃60s 72℃120s，共25-30个循环。

第8题：

试述锅炉采用EDTA化学清洗的步骤和各步骤的目的。
（1）水冲洗。用除盐水冲洗除去可被冲洗掉的脏污物。
（2）碱洗。清除系统内的油垢、含硅杂质和疏松的锈蚀产物，以提高后续的EDTA化学清洗效果。
（3）EDTA清洗和钝化。彻底清洗污垢后镀膜保护，循环清洗至清洗系统的总铁离子、EDTA浓度和pH值达到平衡后，清洗结束。在EDTA清洗结束前，也可采用充氧钝化工艺，加强钝化效果。
（4）清洗后的备用保护和系统恢复。防清洗后二次腐蚀、结垢，恢复系统至正常状态，为冲管或启动做好准备。
略

第9题：

什么是PCR技术？PCR的基本原理是什么？

正确答案:PCR即聚合酶链式反应，是一种在体外快速扩增特定目的基因或DNA序列的技术，故又称基因的体外扩增技术。它可以在试管中建立反应，经过数小时之后，就能将极微量的目的基因或DNA片断扩增数十万乃至千百万倍，无需经过繁琐费时的基因克隆程序，便可获得足够数到两精确的DNA拷贝。
PCR的基本工作原理：以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5’末端和3’末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。

第10题：

沉淀法制备催化剂的基本原理和一般步骤是什么？

正确答案: 沉淀法的基本原理是在含金属盐类的水溶液中，加进沉淀剂，以便生成水合氧化物、碳酸盐的结晶或凝胶。将生成的沉淀物分离、洗涤、干燥、焙烧、成型后，即得催化剂。

PCR原理是什么？其基本步骤如何？解释各步骤的目的。

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