当抑制剂能选择性地和不可逆地与酶的活性部位的残基结合,从而能帮助鉴别酶时,这类抑制剂就可以称为亲和标记试剂。已知TPCK

题目
问答题
当抑制剂能选择性地和不可逆地与酶的活性部位的残基结合,从而能帮助鉴别酶时,这类抑制剂就可以称为亲和标记试剂。已知TPCK是胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂,它通过使蛋白质His烷基化而使其失活。为胰蛋白酶设计一个类似TPCK的亲和标记试剂还可以用于什么蛋白质?
参考答案和解析
正确答案: 首先分析TPCK作为胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂具有什么特征结构。一般来说,亲和标记试剂有两个特点:
①亲和标记试剂与底物非常类似,但缺乏可以被酶作用的位点,因而能选择性地与酶的活性部位结合,却不被酶作用,TPCK的结构中这一部分是其对甲苯磺酰-苯丙氨甲基酮部分;
②亲和标记试剂有活泼的化学基团,可以与靶酶的活性部位中的某个残基反应,形成稳定的共价键。TPCK的反应基团是-CH2-Cl。
其次分析胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶有什么相似之处。已知胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶均催化肽键的裂解反应,其结构和作用机制很相似,它们的活性部位都位于酶分子表面凹陷的口袋中,都有由His、Asp和Ser形成的催化三联体,只是专一性明显不同。胰凝乳蛋白酶的口袋被疏水氨基酸环绕,大到足以容纳一个芳香残基,因此该酶选择裂解芳香氨基酸如Phe和Tyr的羧基侧肽键。而胰蛋白酶口袋的底部有一个带负电荷的Asp189,有利于结合带正电荷Arg和Lys残基。
根据上述分析可知:
(1)为胰蛋白酶设计一个类似TPCK的亲和标记试剂,可以将TPCK的反应基团—CH2—Cl和类似肽键结构—NH—CH—CO—保留,其余部分更换为带正电荷的Arg或Lys的R基团或其类似物;
(2)检验该抑制剂的专一性实际上就是分析其与酶的竞争结合能力,可以设计动力学实验,即分析在没有抑制剂时和有不同浓度抑制剂存在时反应速度随底物浓度的变化;
(3)由于弹性蛋白与上述两种酶空间结构和催化机理相似,推测该亲和标记试剂有可能使弹性蛋白酶失活。
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相似问题和答案

第1题:

关于酶的可逆性抑制哪项正确?( )

A、抑制剂对酶无专一性

B、抑制剂与酶结合后使酶变性

C、抑制剂不能用物理的方法去除

D、抑制剂与酶通常以共价键结合

E、磺胺药的抗菌作用是可逆性抑制


参考答案:E

第2题:

下列关于酶的抑制剂的叙述,正确的是

A.酶的抑制剂中一部分是酶的变性剂

B.酶的抑制剂只与活性部位上的基团结合

C.酶的抑制剂均能使酶促反应速度下降

D.酶的抑制剂一般是大分子物质

E.酶的抑制剂都能竞争性地使酶的活性降低


正确答案:A
酶的抑制作用主要是酶分子上的某些必需基团,特别是活性中心上的一些基团与抑制剂结合而引起酶活性的改变。所以答案为A。

第3题:

关于酶的不可逆性抑制哪项正确?( )

A、抑制剂只与酶的活性中心结合

B、抑制剂与酶的必需基团以共价键结合

C、抑制剂与酶结合后酶不会恢复活性

D、抑制剂的结构与底物相似

E、抑制剂常是机体的代谢物


参考答案:B

第4题:

可逆性抑制中,()抑制剂与酶的活性中心相结合,()抑制剂与酶的活性中心外必需基团相结合。


正确答案:竞争性;非竞争性

第5题:

不可逆向性抑制剂是


A.使酶变性失活的抑制剂
B.抑制剂与酶结合后用透析等方法不能除去的抑制剂
C.特异地与酶活性中心结合的抑制剂
D.与酶分子以共价键结合的抑制剂

答案:B,D
解析:

第6题:

有关酶竞争性抑制剂特点的叙述,错误的是

A.抑制剂与底物结构相似

B.抑制剂与底物竞争酶分子中的底物结合

C.当抑制剂存在时,Km值变大

D.抑制剂恒定时,增加底物浓度,能达到最大反应速度

E.抑制剂与酶分子共价结合


正确答案:E

第7题:

关于竞争性抑制作用的叙述,错误的是

A.抑制剂与酶的底物结构相似

B.可与底物竞争结合酶的活性中心外必需基团

C.抑制剂与酶的结合是可逆的

D.抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力

E.抑制程度取决于抑制剂与底物浓度的相对比例


正确答案:B

第8题:

关于酶的可逆性抑制正确的是

A、抑制剂与酶结合后使酶变性

B、抑制剂与酶通常以共价键结合

C、抑制剂不能用物理的方法去除

D、抑制剂对酶无专一性

E、磺胺药的抗菌作用是可逆性抑制


参考答案:E

第9题:

关于酶的不可逆性抑制正确的是()

  • A、抑制剂与酶结合后使酶变性失活
  • B、抑制剂的结构与底物相似
  • C、抑制剂与酶通常以共价键结合
  • D、抑制剂与酶的活性中心结合
  • E、抑制剂常是机体的代谢物

正确答案:C

第10题:

有关酶竞争性抑制剂特点的叙述,错误的是()

  • A、抑制剂与底物结构相似
  • B、抑制剂与底物竞争酶分子中的底物结合
  • C、当抑制剂存在时,Km值变大
  • D、抑制剂恒定时,增加底物浓度,能达到最大反应速度
  • E、抑制剂与酶分子共价结合

正确答案:E

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