问答题谷氨酸发酵过程中染菌的原因分析

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谷氨酸发酵过程中染菌的原因分析

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第1题：

发酵车间大面积染菌时如何找染菌原因？

正确答案: 当发酵车间大面积染菌，且染菌型杂乱无章时，说明该车间在设备管理、工艺管理、人员管理等方面都处于混乱状态，此时单纯寻找染菌原因往往收效不大。必须先从人员思想整顿入手纠正消极盲目情绪，然后再从操作管理上下功夫，严格工艺纪律检查。与此同时，一个系统一个系统的设备逐步寻找漏洞及死角。只有这样，由表如里，循序渐进的深入工作，才可能在混乱的状态下寻找出染菌的各种原因。

第2题：

如何从发酵规模上来分析染菌的原因？

正确答案: 主要从以下三个方面来分析：
⑴大批发酵罐染菌
⑵部分发酵罐染菌
⑶个别发酵罐染菌

第3题：

简述发酵染菌的原因及防治措施。

正确答案: 造成发酵染菌的原因有很多，且常因工厂不同而有所不同，但设备渗漏、空气净化达不到要求、种子带菌、培养基灭菌不彻底和技术管理不善等是造成各厂污染杂菌的普遍原因。
一、种子带菌及其防治：
1、保藏斜面试管菌种染菌、培养基和器具灭菌不彻底、种子转移和接种过程染菌、种子培养所涉及的设备和装置染菌。
2、严格控制无菌室的污染，根据生产工艺的要求和特点，建立相应的无菌室，交替使用各种灭菌手段对无菌室进行处理；在制备种子时对砂土管、斜面、三角瓶及摇瓶均严格进行管理，防止杂菌的进入而受到污染。为了防止染菌，种子保存管的棉花塞应有一定的紧密度，且有一定的长度，保存温度尽量保持相对稳定，不宜有太大变化；对每一级种子的培养物均应进行严格的无菌检查，确保任何一级种子均未受杂菌污染后才能使用；对菌种培养基或器具进行严格的灭菌处理，保证在利用灭菌锅进行灭菌前，先完全排除锅内的空气，以免造成假压，使灭菌的温度达不到预定值，造成灭菌不彻底而使种子染菌。
二、空气带菌及其防治
要杜绝无菌空气带菌，就必须从空气的净化工艺和设备的设计、过滤介质的选用和装填、过滤介质的灭菌和管理等方面完善空气净化系统。
1、加强生产环境的卫生管理，减少生产环境中空气的含菌量，正确选择采气口，如提高采气口的位置或前置粗过滤器，加强空气压缩前的预处理，如提高空压机进口空气的洁净度。
2、设计合理的空气预处理工艺，尽可能减少生产环境中空气带油、水量，提高进入过滤器的空气温度，降低空气的相对湿度，保持过滤介质的干燥状态，防止空气冷却器漏水，防止冷却水进入空气系统等。
3、设计和安装合理的空气过滤器，防止过滤器失效。选用除菌效率高的过滤介质，在过滤器灭菌时要防止过滤介质被冲翻而造成短路，避免过滤介质烤焦或着火，防止过滤介质的装填不均而使空气走短路，保证一定的介质充填密度。当突然停止进空气时，要防止发酵液倒流入空气过滤器，在操作中要防止空气压力的剧变和流速的急增。
三、操作失误导致染菌及其防治
1、通常对于淀粉质培养基地灭菌采用实罐灭菌较好，一般在升温前先通过搅拌混合均匀，并加入一定量的淀粉酶进行液化；有大颗粒存在时应先经过筛除去，再行灭菌；对于麸皮、黄豆饼一类的固形物含量较多的培养基，采用罐外预先配料，再转至发酵罐内进行实罐灭菌较为有效。
2、在灭菌升温时，要打开排气阀门，使蒸汽能通过并驱除罐内冷空气，一般可避免“假压”造成染菌。3、要严防泡沫升顶，尽可能添加消泡剂防止泡沫的大量产生。
4、避免蒸汽压力的波动过大，应严格控制灭菌温度，过程最好采用自动控温。
5、发酵过程越来越多的采用自动控制，一些控制仪器逐渐被应用。一般常采用化学试剂浸泡等方法来灭菌。
四、设备渗漏或“死角”造成的染菌及其防治设备渗漏主要是指发酵罐、补糖罐、冷却盘管、管道阀门等，由于化学腐蚀（发酵代谢所产生的有机酸等发生腐蚀作用）、电化学腐蚀、磨蚀、加工制作不良等原因形成微小漏孔后发生渗漏染菌。

第4题：

染菌原因分析时发现大批发酵罐染菌可能是由于（）

A、空气系统出现问题
B、培养基灭菌不彻底
C、发酵罐渗漏
D、种子带菌

正确答案:A

第5题：

以糖质为碳源的谷氨酸生产菌几乎都是（）缺陷型，此物质在发酵过程中不能过量，否则谷氨酸发酵转为（）发酵，一般将生物素控制在（）的水平。

正确答案:生物素；乳酸；亚适量

第6题：

发酵过程中染菌的判断与检查。

正确答案: 以无菌试验中的酚红肉汤培养和双碟培养的反应为主，，以镜检为辅。每个无菌样品的无菌试验，至少用2只酚红肉汤或斜面同时取样培养。要定量或用接种环蘸取法取样，不宜从发酵罐直接取样。因取样量不同，影响颜色反应和浑浊程度的观察。如果连续3个时间的酚红肉汤无菌样发生颜色变化或产生浑浊，或斜面连续3个时间样品长出杂菌即判断为染菌。有时酚红肉汤反应不明显，要结合镜检确认连续3个时间样品染菌，即判为染菌。

第7题：

发酵过程中的染菌的原因有哪些？

正确答案: 发酵过程中的染菌的原因：
（1）从染菌的规模和时间分析：
①在发酵过程中，如果是种子罐和发酵罐同时大面积染菌，杂菌的主要来源可能是空气净化系统，如空过滤器失效或空气管道渗漏造成的，其次考虑种子制备工序，如果只是发酵罐大面积染菌，除考虑空气净化系统带菌外，还要重点考查接种管道，补料系统，发酵培养基采用连续灭菌工艺时，还要严格检查连消系统是否带及杂菌；
②如果是部分发酵罐早期染菌，可能是培养基灭菌不彻底，或种子罐带菌，或接种管道灭菌不彻底造成的。如果是发酵的中后期染菌，重点分析补料系统和加消沫剂系统；
③个别发酵罐连续染菌，就从单个罐体查找杂菌来源，如罐内是否有“死角”或冷却系统有渗漏。当然还要检查附件。个别罐批的散在性染菌，其原因很难追查，要具体情况具体分析；
（2）从染菌类型分析：发酵过程染菌，多种菌型出现的机率多，单菌型机率较少。染的是耐热芽孢杆菌时，这与培养基灭菌不彻底，或设备内部有“死角”关系极大，空气中也存在芽孢杆菌。污染菌是不耐热的球菌或杆菌时，可从空气净化系统和冷却系统进行追查。

第8题：

如何对发酵染菌进行原因分析？

正确答案: 导致发酵染菌的原因错综复杂，但不外乎菌种、物料污染所带入，设备泄露和死角造成，空气过滤失效及灭菌操作失误等因素。发酵染菌可以从以下三方面来分析寻找原因。
从染菌的范围来分析。但罐染菌应从单体设备的严密、清洁和灭菌操作上找原因。相同时间内同时出现几个发酵罐染菌应从空气系统。糖油物料、排气口等公用系统上找原因。单体罐连续或间断性染菌应从该罐的清洁、泄漏、死角或设备不合理方面找原因。
（1）从染菌的时间来分析。尚未补加糖料之前发生前期染菌，一般杂菌量大，应从物料灭菌不透。种子带菌、泡沫顶罐。轴封渗漏等方面找原因。发酵的中后期染菌应从设备严密、空气系统、糖油物料系统以及中间工艺控制上找原因。
（2）从染菌的菌型上分析。染酵母菌、霉菌。由于其不抗热，可从无菌室的清洁情况，倒瓶、并瓶时菌落数以及设备泄露上找原因。染球菌、杆菌等不抗热杂菌应从空气过滤介质的破损失效、设备渗漏、培养基倒流等方面找原因。染芽孢杆菌等抗热杂菌时应从设备的死角、罐内的清洁、不合理的设备装置以及灭菌操作上找原因。

第9题：

按照发酵的全过程来分，染菌分为（）.

A、种子期染菌
B、发酵前期染菌
C、发酵中期染菌
D、发酵后期染菌

正确答案:A,B,C,D

第10题：

发酵生产中引起染菌的原因有哪些？如何进行检查和判断分析？

正确答案:主要原因有种子带菌、空气系统染菌、设备渗漏、培养基或设备灭菌不彻底、管理和操作不当。检查是否染菌可采用显微镜检查法、平板划线培养检查法和肉汤培养法。同时还需从发酵过程的异常现象判断是否染菌，如溶解氧水平、排气中CO2含量、pH异常变化等，可初步判断污染了杂菌。

谷氨酸发酵过程中染菌的原因分析

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