问答题简述核酸分子杂交的技术过程

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简述核酸分子杂交的技术过程

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第1题：

按照杂交环境的不同，核酸分子杂交可分为固相分子杂交和液相分子杂交两种类型。其中固相分子杂交技术的应用更为普遍。用来鉴定DNA的分子杂交技术是A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、RFLP

E、免疫荧光技术

用来鉴定RNA的分子杂交技术是A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、RFLP

E、免疫荧光技术

参考答案：问题 1 答案：A

问题 2 答案：B

第2题：

下列有关核酸分子杂交的叙述，错误的是

A.杂交可发生在碱基序列完全互补的核酸分子之间

B.杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间

C.具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交

D.不同来源的DNA分子之间可以杂交

E.不同来源的DNA与RNA之间可以杂交

正确答案：C
C
[考点] 核酸的变性、复性及杂交
[分析] 核酸分子杂交是指在DNA复性过程中，将不同的DNA单链分子放在同一溶液中，或将DNA和RNA分子放在一起，双链的再形成既可以发生在序列完全互补的核酸分子之间，也可以发生在那些碱基序列部分互补的DNA之间，或DNA与RNA之间。由上可见杂交是双螺旋结构的再形成过程，已具有双螺旋结构无法进行杂交，因此C是错误的。

第3题：

既可测病毒抗原又可测病毒抗体的方法有 ( )

A、免疫电镜检查法

B、免疫荧光技术

C、酶免疫技术

D、斑点分子杂交

E、核酸分子杂交

参考答案：BC

第4题：

简述核酸分子杂交的原理和基本过程。

正确答案:⑴核酸分子杂交的基本原理是具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基互补配对原则形成双链的过程。其基本原理是：具有互补序列的两条单链核酸分子在一定条件下（适当温度、离子强度等），按碱基互补配对原则，重新形成双链。这一过程中核酸分子经历了变性和复性的变化，以及复性过程中各分子间建的形成和断裂等。杂交的双方是已知序列和待定序列，其中已知序列为探针，探针通常用于核素或非核素的示踪标记。
⑵以Southern印迹杂交为例，包括以下步骤：
①待测核酸样品的制备包括待测DNA和DNA的限制酶消化
②待测DNA样品的电泳分离。
③凝胶中核酸的变性
④Southern转膜：常用的转膜方法有毛细管虹吸印迹法、电转印法和真空转移法
⑤探针的制备
⑥Southern杂交，必须先进行预杂交
⑦杂交结果的检测：包括放射性核素探针的检测即放射自显影和非放射性核素探针的检测：地高辛标记探针的检测、生物素标记探针的检测。

第5题：

基因芯片技术的本质是（）。

A.核酸分子杂交技术
B.蛋白质分子杂交技术
C.聚合酶链反应技术
D.基因重组技术
E.酶切技术

答案：A

解析：

基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，本质是核酸分子杂交技术。

第6题：

下列哪项不属于核酸分子杂交 ( )

A、液相杂交

B、菌落杂交

C、Southern印迹杂交

D、Northern印迹杂交

E、Western印迹技术

参考答案：E

第7题：

下列有关核酸分子杂交的叙述，

的是
A.杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间
B.具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交
C.不同来源的DNA分子之间可以杂交
D.不同来源的DNA与RNA之间可以杂交

答案：B

解析：

[考点]核酸的变性、复性及杂交 [分析]核酸分子杂交是指在DNA复性过程中，将不同的DNA单链分子放在同一溶液中，或将DNA和RNA分子放在一起，双链的再形成既可以发生在序列完全互补的核酸分子之间，也可以发生在那些碱基序列部分互补的DNA之间，或DNA与RNA 之间。由上可见杂交是双螺旋结构的再形成过程，已具有双螺旋结构无法进行杂交，因此B是错误的。

第8题：

临床上常用FQ-PCR、bDNA技术、基因芯片、杂交捕获系统和核酸杂交等技术进行感染性疾病的分子诊断，这些方法各有特点，实际应用中应根据需要灵活选择。常用的感染性疾病分子诊断的方法中，灵敏性最高的方法是A、杂交捕获系统

B、FQ-PCR

C、bDNA技术

D、基因芯片

E、核酸杂交

常用的感染性疾病分子诊断的方法中，可以进行高通量检测的方法是A、杂交捕获系统

B、FQ-PCR

C、bDNA技术

D、基因芯片

E、核酸杂交

参考答案：问题 1 答案：B

问题 2 答案：D

第9题：

下列有关核酸分子杂交的叙述，不正确的是( )

A.杂交可发生在碱基序列完全互补的核酸分子之间
B.杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间
C.具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交
D.RNA与DNA分子之间可以杂交

答案：C

解析：

核酸分子杂交是指在DNA复性过程中，将不同的DNA单链分子放在同一溶液中，或将DNA和RNA分子放在一起，双链的再形成既可以发生在序列完全互补的核酸分子之间，也可以发生在那些碱基序列部分互补的DNA之间，或DNA与RNA之间。杂交发生在单链核酸分子之间，已具有双螺旋结构的互补双链无法进行杂交。

第10题：

简述核酸分子杂交的技术过程。

正确答案:1.探针的制备：核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段，可用于检测待测样品中是否存在与探针相同或相近的DNA序列。核算探针有示踪物。
2.待测核酸的处理：在这个过程中，通过虹吸或电泳的作用将待测双股DNA转移、固定到固相基质如硝酸纤维素膜上，经一定温度或碱变性使DNA双股螺旋解开成两股单链DNA，这过程叫变性。
3.杂交与漂洗：将带有待测DNA单链的膜放入含核酸探针的溶液中，当探针与待测DNA单链具有互补序列时，讲发生杂交，所形成的的杂种分子很难再解链，因此，可以用漂洗法去掉游离的没有杂交上的探针分子。
4.结果分析：可通过放射自显影的方式或其他化学反应确定是否有杂交发生。

简述核酸分子杂交的技术过程

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