试述生物样品分析中免疫分析法的分类及内容。

题目

试述生物样品分析中免疫分析法的分类及内容。

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相似问题和答案

第1题:

目前TDM中多推荐使用的方法为

A、时间分辨荧光免疫分析

B、高效液相层析法

C、酶免疫分析法

D、生物传感技术

E、免疫比浊分析


参考答案:B

第2题:

体内样品分析中常用的检测方法不包括

A.色谱分析法
B.质谱分析法
C.放射免疫分析法
D.酶免疫分析法
E.生物学方法

答案:B
解析:
体内样品分析中常用的检测方法包括色谱分析法,免疫分析法,生物学方法。

第3题:

自动生物化学分析仪的分析方法不包括

A、终点分析法

B、比浊测定法

C、连续监测法

D、均相酶免疫分析法

E、非均相酶免疫分析法


参考答案:E

第4题:

试述生物样品分析中免疫分析法的分类及内容。


正确答案: 免疫分析中按标记物的不同,可分为放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、荧光免疫分析等。根据抗原-抗体的反应达平衡后是否需将结合物(B)与游离标记物(F)分离,免疫分析可分为均相免疫分析和非均相免疫分析两大类。
各种免疫分析的基本原理是一样的,即竞争抑制原理。人工抗原的制备和特异抗体的制备也相同,只是标记抗原(标记药物)的标记物不同,由此产生的测定方法也不同。
放射免疫分析是20世纪50年代末开始发展起来的一种超微量分析技术,它是利用放射性同位素的测量方法与免疫反应基本原理相结合的一种同位素体外检测法。本法最早应用于血浆中微量胰岛素的分析,这一方法不仅用于测定大分子量、有抗原性的蛋白质、酶等生物活性物质,而且也广泛用于测定许多小分子量、本身无抗原性的药物和代谢物等,许多RIA药盒已商品化。
酶免疫分析是20世纪70年代在RIA基础上发展起来的一种新的免疫分析方法。将抗原抗体特异反应与酶的高效专一催化特性相结合,用酶代替放射性同位素来标记药物,具有无放射性危害,标记物衰退期长和仪器设备简单等优点,随着研究进展,EIA的灵敏度已达到甚至超过RIA,凡RIA能测试的项目几乎均可用EIA来替代。     标记酶的作用也是提供可测信号,但酶本身并不能直接发出信号,必须要有其他物质如酶底物、辅酶等的参与才能完成酶反应,引起吸收光谱等方面的变化以供检测。
按照测定过程中,抗原-抗体反应是在单一液相中进行还是在液固相中进行,可将EIA分为均相酶免疫分析法和非均相酶免疫分析法。
一些化学物质在氧化时会发出光量子,这种氧化反应称化学发光,具有这种性质的分子称化学发光分子,用它标记抗原或抗体,以达到测定抗体或抗原为目的的标记免疫技术,称化学发光免疫测定法。自1976年Schroeder等首先建立了生物素CLIA后,激素等众多物质的CLIA也相继建立,并在不断发展中。CLIA也有均相与非均相两种类型。
荧光免疫分析是以荧光物质或潜在荧光物质为标记物,当标记的药物与特异抗体相结合时,发生荧光强度的改变,或在相应的酶作用下发生荧光来检测待测样品中药物浓度的一种方法。也可分为均相与非均相两类,均相荧光免疫分析能自动化操作,是目前应用比较广泛的免疫分析法。按标记物产生荧光方式不同,可将荧光免疫分析分为底物标记荧光免疫分析、荧光偏振免疫分析、荧光淬灭和荧光增强免疫分析等。

第5题:

试述内容分析法的一般过程。
内容分析法的一般过程包括建立研究目标、确定研究总体和选择分析单位、设计分析维度体系、抽样和量化分析材料、进行评判记录和分析推论六部分。在教育科学研究中,内容分析法可用于多种研究目标的研究工作。主要的类型有:趋势分析、现状分析、比较分析、意向分析。研究总体的确定直接依赖于研究目标的建立,在适当的研究目标建立起来后,就可以分析、确定出它的研究总体。分析单位是指在内容分析法中描述或解释研究对象时,所使用的最小、最基本单位。
设计分析维度有两种基本方法:
一是采用现成的分析维度系统。
二是研究者根据研究目标自行设计。
抽样工作包括两个方面的内容:
一是界定总体。
二是从总体中抽取有代表性的样本。
内容分析法常用的三种抽样方式是:来源取样、日期抽样、分析单位取样。

第6题:

体内样品分析常用的方法有

A.免疫分析法

B.色谱分析法

C.化学滴定法

D.光谱法

E.质谱法


正确答案:AB
体内样品分析常用的测定常用方法有免疫分析法和色谱分析法。

第7题:

体内样品测定的常用方法有

A. 分光光度法
B. 滴定分析法
C. 重量分析法
D. 色谱分析法
E. 免疫分析法

答案:D,E
解析:
本题考查体内样品测定的常用方法。体内样品由于分析背景复杂,药物浓度低,故要求方法应有较高的灵敏度和专属性。体内样品测定的常用方法有免疫分析法、色谱分析法。免疫分析法如放射免疫法、荧光免疫法、发光免疫法、酶免疫法和电化学免疫法,色谱分析法如气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)和色谱-质谱联用法(GC-MS,HPLC-MS)。故本题答案应选DE。

第8题:

放射免疫分析法是用来测定样品中______的浓度 ( )

A、抗原

B、抗体

C、抗原或抗体

D、抗原和抗体

E、以上都不是


参考答案:A

第9题:

试述生物样品分析的常用测定方法有哪些。    


正确答案: (1)光谱法
采用具有选择性的显色剂和反应条件,才可以不经分离提取,直接用比色法测定生物样品中的药物含量。比色法灵敏度不高,通常只能测定出1μg/mL浓度以上的样品。但该法快速、简便,对仪器设备要求不高。
荧光法具有较高的灵敏度,专属性也较强,但药物必须具有一定的化学结构才能产生荧光。药物中具有天然荧光者不多,通常需采用适当处理,常用化学引导荧光法,如紫外辐射氧化、水解或强酸脱水等,或用适当的荧光试剂与药物起偶合或缩合反应,产生荧光发生团。
(2)色谱法
经典的薄层色谱定量法,操作比较繁琐,准确性较差。不适用于体液中药物成分浓度的测定。高效薄层色谱法灵敏度较高,常用于生物样品中成分的测定,与气相色谱法、高效液相色谱法相比,也有其独特的优点,
高效液相色谱法在生物样品内药物分析中的应用已大大超过了其他分析方法。具有适用范围广,可在室温下进行;样品预处理简单;分离效率高,流动相选择范围广;可不经萃取和衍生化处理直接测定极性大的水溶性药物;检测方法多是非破坏性的,流出组分可回收;专一性较高等优点。
气相色谱法只要选择适当的色谱条件,母体药物、代谢物及其可能同时服用的其他结构相类似的药物都能得到很好分离,常作为建立其他生物样品内药物分析方法的参比方法。
高效毛细管电泳法有高压电泳的高速、高分辨率及高效液相色谱法的高效率等优点,其选择性与高效液相色谱有很大的互补性。广泛应用于生物大分子,体内药物及代谢物,手性药物,中、西药物及其制剂等的分析。
(3)联用技术
联用技术已广泛应用于复杂组分的分离与分析,成为分析技术中最重要的检测手段,尤其适合于对热不稳定的、挥发性差的或极性大的成分分析,高分辨的液相色谱与高灵敏度的质谱联用分析,特别适用于复杂生物样品中药物及其代谢物的研究。
(4)免疫分析法
免疫分析中按标记物的不同,可分为放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、荧光免疫分析等。根据抗原-抗体的反应达平衡后是否需将结合物(B)与游离标记物(F)分离,免疫分析可分为均相免疫分析和非均相免疫分析两大类。 各种免疫分析的基本原理是一样的,即竞争抑制原理。人工抗原的制备和特异抗体的制备也相同,只是标记抗原(标记药物)的标记物不同,由此产生的测定方法也不同。

第10题:

生物样品分析方法的评价内容有哪些?   


正确答案: 评价一个生物样品内药物分析方法的优劣主要有以下几个指标:精密度、准确度、灵敏度、专属性或选择性、可测浓度范围、测定所需时间以及对生物样品的适应性等。
准确度  准确度是方法评价的最基本要点之一。将已知量的药物纯品加到空白样品(如血样)中经过一系列的处理、测定,所得药物量与加入量之比值的百分率即为回收率。根据回收率测定方法不同可分为绝对回收率和方法回收率。
(1)绝对回收率又称萃取回收率、提取回收率,它反映了一个方法的萃取效率,与生物样品内样品检测灵敏度有关,是评价生物样品内药物分析方法的重要指标之一。
(2)方法回收率是取一系列浓度的药物对照品加到空白体液中,按设定方法测定,根据对照品浓度及响应信号值绘制标准曲线,然后取高、中、低浓度的药物对照品添加到空白体液中,按标准曲线制备方法同法测定,求得测定值。最后与加入量比较,得方法回收率。
精密度  精密度是表示一组测量值彼此符合的程度。精密度测定通常采用高、中、低三种浓度进行测定。低浓度选择在定量限(LOQ)附近,高浓度在标准曲线的上限附近,中间选一个浓度,精密度可进一步分为日内或批内精密度和日间或批间精密度。前者表示一次测定的重复性,后者表示不同时间测定结果的重复性。
灵敏度  灵敏度是指一种方法可以检测出有关化合物的最小量。 检测限表示在生物介质中药物的最低可测度(或绝对量)。通常以被测信号和背景噪音比S/N为2~3倍时的被测物的绝对量来表示。
定量限是指生物介质中药物可定量测定的最低量,表示方式和测定方法与检测限相同,它与检测限的不同在于定量限规定的最低测得浓度应该符合一定精密度和准确度的要求。
最低检测浓度则多指可进行定量测定的某一药物的最低浓度,它与样品体积大小等因素有关,
方法的专属性  方法的专属性,也称选择性,是指样品中含有其他共存物质时,该法定量测定被测物的能力。即测定的信号应是属于被测物所特有的,否则就易受干扰。考察一个方法是否专属,应着重考虑代谢物、内源性物质和同时服用药物的干扰。
线性范围  线性范围通常是将药物对照品加入空白体液中,制成一系列不同浓度的标准液,按规定方法处理、测定。根据药物对照品浓度和响应信号值绘制标准曲线,或计算回归方程,求出r值和浓度范围。
稳定性  药物的稳定性是贮存条件、药物的化学性质、空白生物样品和容器系统的函数。在特定的容器和生物样品中待测物的稳定性不能外推至其他系统。在生物样品中待测物的稳定性包括长期贮存、短期贮存和冷冻-解冻循环过程的稳定性,也包括标准贮备液中待测物的稳定性。