试述植物基因工程中转基因的主要方法,其优缺点是什么?

题目
问答题
试述植物基因工程中转基因的主要方法,其优缺点是什么?
如果没有搜索结果或未解决您的问题,请直接 联系老师 获取答案。
相似问题和答案

第1题:

基因工程体系指利用基因工程的遗传操作获得的有机体,包括基因工程动物、基因工程植物,但不包括基因工程微生物。


正确答案:错误

第2题:

试述园艺植物基因工程的主要应用领域:


正确答案:1)园艺植物抗虫基因工程育种
2)园艺植物抗病基因工程
3)园艺植物抗除草剂基因工程育种
4) 园艺植物抗逆基因工程育种
5)园艺植物品质、产量基因工程育种

第3题:

试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。


正确答案: (一)显微注射法
(1)利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
(2)优点:可准确导入外源基因,转化频率高,鱼体内可达20%,不需载体,直接获得纯系,实验时间短。
(3)缺点:仪器贵重,操作繁琐耗时,一次处理卵很少。
(二)电穿孔转化法
(1)利用高压电脉冲作用,使细胞膜上产生可逆的瞬间通道,从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
(2)优点:操作简单,同时处理大量受精卵。
(3)缺点:导入是随机的、无定向的,转移率低。
(三)精子介导法
(1)精子同外源DNA共浴后再给卵子受精,使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
(2)优点:简便,成本低,便于大量筛选,是近几年转基因动物研究的热点。
(3)缺点:处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
(四)基因枪转化法
(1)又称微弹轰击转化法,以高压气体为动力,利用高速运行的金属颗粒轰击细胞,将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
(2)优点:该法简单快速,接触面积大、转化率高,可同时处理多个个体。
(3)缺点:不稳定,表达方面存在问题。
(五)病毒(噬菌体)颗粒转导法
用病毒(噬菌体)DNA(或RT-DNA)构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体,在体外包装成病毒(噬菌体)颗粒后,感染受体细胞,使其携带的重组DNA进入受体细胞。
转基因病毒具严格的宿主特异性,且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后,此法对鱼类暂不适应。
(六)组织注射法
将外源基因直接向机体组织注射,周围组织能将外源基因纳入,并且注入的外源基因能被整合。

第4题:

什么是基因工程菌,工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么,所涉及基因工程原理是什么? 


正确答案: 将目的基因导入细菌体内使其表达,产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。
工程菌构建的基本过程如下:目标基因克隆(PCR、文库筛选、化学合成)→表达载体构建(酶切、链接)→遗传转化与筛选(外源基因导入与培养)→工程菌(获得新形状、功能、产生物质)
酶切:在特异位点上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性片段。(DNA+缓冲液+限制性内切酶;37℃,1小时;加热、加EDTA终止;电泳检查酶切完整性)
链接:DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键,使原来断开的DNA缺口重新连接起来。(载体片段和基因片段,缓冲液,连接酶;16-26℃,数小时;70℃加热10min终止反应)
转化:把外源基因导入宿主细胞的过程。(氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因)

第5题:

与其他作物相比,园林植物基因工程育种具有更为广阔的应用前景,目前常用的园林植物转基因方法主要有()、()、()等。


正确答案:农杆菌介导法;基因枪法;花粉管通道法

第6题:

简述植物基因工程的步骤。


正确答案: 1.目的基因的分离与克隆。
2.载体的构建。
3.DNA的重组。
4.重组体克隆的筛选与鉴定。

第7题:

何谓质粒?试述其特点及其在基因工程中的作用。


正确答案:质粒:游离于核染色体外,具有独立复制能力的环状DNA。特点:质粒是一个复制子;携带细菌某些非必需基因;某些质粒可在不同菌株间转移;质粒可以消除;某些质粒具有与核染色体整合和脱离功能;具有重组功能。在基因工程中的作用:可用为基因工程载体。将外源DNA插入到质粒中,构成重组质粒并导入细菌或酵母等受体细胞中。

第8题:

与其他作物相比,园林植物基因工程育种具有更为广阔的应用前景,目前常用的园林植物转基因方法主要有农杆菌介导法、()、花粉管通道法等。


正确答案:基因枪法

第9题:

大肠杆菌作为基因工程受体菌的优缺点是什么?


正确答案: 优点:大肠杆菌培养方便、操作简单、成本低廉,基础生物学、分子遗传学等方面的背景知识清楚,对其基因表达调控的分子机理也比较了解,而且历经二十年的基因工程实践,大肠杆菌已发展成为一种安全的基因工程实验体系,有多种适用的寄主菌株和载体系列,大肠杆菌易于进行工业化批量生产。
缺点:在通常情况下,细菌的RNA聚合酶不能识别真核的启动子;许多真核基因的蛋白质产物需要经过翻译后的加工修饰,如正确的折叠和组装,而细菌中通常并没有这样的修饰机制,从而可能导致真核基因在大肠杆菌中的翻译产物无法产生有活性的蛋白;外源真核基因所表达的蛋白质分子往往能够被细菌的蛋白酶识别,并被当做“异已分子”降解掉。

第10题:

请介绍3种植物目的基因的克隆方法,并说出其优缺点。


正确答案: 目前,用于植物基因克隆的常见方法有:(ps:下面随意挑三个方法就行啦)
1)图位克隆技术:建立在遗传分析和基囚足位的基础上,该技术对于基因组较大的作物,例如小麦基因的克隆难度较大;
2)转座子标签法:利用转座子插入突变使某一基因失活,进而用转座子特异基因片段做探针分离出突变的目的基因,该方法需要筛选并鉴定突变体,工作量较大:
3)差异显示技术:直接鉴定和克隆差异表达墓因,但存在假阳性率高和有些差异表达带不易扩增等问题;
4)酵母单杂交技术:在植物中应用较多的是转录因子基因的克隆,该方法针对性强,但假阳性较高;
5)cDNA文库筛选技术是一种经典的克隆基因的方法,但不易得到完整的基因全长,特别是基因的5’端。