大肠杆菌表达系统的缺点是不能进行(),因而像EPO等基因的表达需

题目

大肠杆菌表达系统的缺点是不能进行(),因而像EPO等基因的表达需使用()表达系统。

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第1题:

以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么?


参考答案:胞内、周质、胞外。

第2题:

下列有关基因表达的叙述中,正确的是( )。

A.哺乳动物红细胞中的基因不能表达
B.大肠杆菌质粒基因表达与核糖体无关
C.菠菜根尖细胞基因表达场所包括线粒、叶绿体
D.人甲状腺细胞生长激素基因处于关闭状态

答案:D
解析:
A项,哺乳动物未成熟的红细胞中的基因可以表达一些蛋白质,如血红蛋白,因为有细胞核和核糖体等,而哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核,无细胞器,则基因不能表达,故错误; B项,因为翻译发生的场所是在核糖体,所以大肠杆菌质粒基因表达与核糖体有关,故错误;
C项,菠菜根尖细胞中无叶绿体,故错误;
D项,人的生长激素基因只在垂体细胞内表达,而甲状腺细胞内的生长激素基因不能表达,即处于关闭状态,故正确。

第3题:

举例说明比较分析基因工程制药中三大表达系统的优缺点。


参考答案:大肠杆菌表达体系
酵母表达体系
哺乳动物细胞表达体系
优点:遗传背景清晰、成本低廉、可选载体及宿主多
细胞生长快、易于培养、遗传操作简单、使用穿梭质粒载体、能对蛋白质进行正确加工、修饰、合理的空间折叠
产物最接近于天然蛋白、易纯化、扩增和表达能力高、耐较高的剪切力和渗透压力、内源蛋白分泌少
缺点:缺乏翻译后修饰加工,信号肽不能切掉,不能分泌表达、不能糖基化
产物蛋白质不均一、信号肽加工不完全、内部降解、易形成多聚体
技术要求高、生产成本高、生产规模小

第4题:

影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素有哪些?


正确答案: 1、启动子的强弱;
2、基因的剂量;
3、影响RNA转录和翻译效率的因素:SD序列、mRNA;
4、外源基因密码子的选择;
5、表达产物的大小;
6、表达产物的稳定性。

第5题:

简述大肠杆菌表达系统与酵母表达系统的异同。


正确答案: 相同点:易操作,繁殖快、成本低、易于工业化生产。
不同点:
1、大肠杆菌表达系统转录信号与酵母系统不同,与核糖体的结合位点不同
2、大肠杆菌中表达不存在翻译后修饰作用,故对蛋白质产物不能糖基化;酵母菌具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统。
3、大肠杆菌表达系统由于分泌能力不足,真核蛋白质常形成不溶性的包涵体,表达产物必须在下游处理过程中经过变性和复性处理才能恢复其生物活性;酵母菌具有真核生物表达系统基因表达调控和蛋白质修饰功能,避免了产物活性低、包涵体变性复性等问题。

第6题:

基因文库中的所有基因

A.都可以在大肠杆菌中正确表达
B.不能用真核细胞表达
C.只有cDNA文库中的基因可用大肠杆菌表达
D.只有基因组文库中的基因可用大肠杆菌表达

答案:C
解析:

第7题:

1976年人类首次获得转基因生物,即将人的生长激素抑制因子的基因转入大肠杆菌,并获得表达。这里的表达是指该基因在大肠杆菌内()

  • A、能进行DNA复制
  • B、能进行转录和复制
  • C、能合成人的生长激素
  • D、能合成抑制生长激素释放因子

正确答案:D

第8题:

大肠杆菌中的基因表达系统是什么?


参考答案:外源基因表达系统pBV220/pET。

第9题:

在大肠杆菌表达系统中表达真核细胞基因,目的基因必须是基因组DNA。


正确答案:错误

第10题:

大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件有哪些?


正确答案: 1、要求外源基因的编码区不能含有内含子;
2、表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游,并形成正确的阅读框架;
3、转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16SrRNA3末端相匹配的SD序列,才能被有效的翻译成蛋白质。
4、蛋白产物必须稳定,不易被细胞内蛋白酶快速降解,且对宿主无害。

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