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简述不连续凝胶电泳的原理

题目

简述不连续凝胶电泳的原理

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第1题：

简述连续注射器作用原理?


正确答案：单向导流阀在进、出药口分别设有自动阀门，当活塞推进时，出口阀打开而进口阀关闭，药液由出口阀射出，当活塞后退时，出口阀关闭而进口阀打开，药液由进口吸入玻璃管。

第2题：

试述蛋白质双向凝胶电泳原理。


正确答案: 双向凝胶电泳技术是临床蛋白质组学研究中的重要工具之一，是目前唯一可在一块凝胶上同时分离成千上万个蛋白质组分的方法。其基本原理是根据蛋白质不同分子间等电点及相对分子质量不同，通过一相的SDS-PAGE和二相的等电聚焦电泳来分离复杂的蛋白质混合物。其优点在于可以同时分离大量蛋白质，应用大面积胶条，一次可鉴定近10000个蛋白质点；可通过蛋白质点染色的强度对其进行定量分析；也可提供蛋白质翻译后修饰信息，对具有不同程度的糖基化或磷酸化修饰的蛋白质亚型能较容易地进行分离。目前，已有5000多种蛋白质成分采用2-DE技术得到很好分离。在血清中，应用2-DE可分辨出100多种血清蛋白，其高度分辨率是各种类型单向PAGE及其他电泳所无法比拟的，因此广泛用于生物大分子的分离和精确分析。

第3题：

与聚丙烯酰胺凝胶电泳的浓缩效应无关的因素是

A.凝胶层的不连续性

B.缓冲液离子成分的不连续性

C.电位梯度的不连续性

D.pH的不连续性

E.蛋白质分子大小


正确答案：E

第4题：

蛋白质在不连续PAGE中实现分离的基本原理是什么？为什么不连续系统或连续系统的聚丙烯酸胺凝胶电泳比琼脂电泳分辨率高？


正确答案:原理：由于分离胶的孔径较小，分子量大小或分子形状不同的蛋白质通过分离胶时，所受阻滞的程度不同，因而迁移率不同而被分离。样品通过一定孔径的凝胶时，受阻滞的程度不同，小分子走在前面，大分子走在后面，各种蛋白质按分子大小顺序排列成相应的区带。
原因：由于缓冲液离子成分、带电颗粒在电场作用下，靠电荷及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应，还具有浓缩效应。

第5题：

简述不连续电泳样品压缩成层的原理。


正确答案:电泳缓冲液主要存在三种阴离子，Cl-、甘氨酸阴离子以及蛋白质-SDS复合物，在浓缩胶的pH下，甘氨酸少量电离，其电泳迁移率最小，Cl-电泳迁移率最大。在电场作用下，Cl-最初的迁移速度最快，在Cl-后形成低电导区，从而产生较高的电场强度，甘氨酸阴离子和蛋白质-SDS加速移动。达到稳定状态后，Cl-和甘氨酸之间形成稳定移动的界面。

第6题：

简述SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理。


正确答案:原理：SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。

第7题：

简述液流连续性的原理是什么？


正确答案:液体经无分支管道时，每一横截面上通过的流量一定相等，并且内部压力在各个方向一致。

第8题：

与聚丙烯酰胺凝胶电泳的浓缩效应无关的因素是 ( )

A、蛋白质分子大小

B、缓冲液离子成分的不连续性

C、电位梯度的不连续性

D、pH的不连续性

E、凝胶层的不连续性


参考答案：A

第9题：

简述琼脂糖凝胶电泳的原理，优点及应用。


正确答案:原理：琼脂糖凝胶具有网络结构，直接参与带电颗粒的分离过程。在电泳中，物质分子通过空隙时会受到阻力，大分子受到的阻力比小分子大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅依赖于静电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小。
优点：分辨率高、重复性好，区带易染色、洗脱和定量以及干膜可以长期保存。
应用：核酸、蛋白质的分离鉴定。

第10题：

简述市场预测的连续性原理。


正确答案:单个消费者的需求可能因某些特殊因素的影响而发生剧烈的变化。但是，由于消费者的数量众多，每个消费者需求的变化并不可能对整个总需求产生明显的影响。同时，一部分消费者的正影响与另一部分消费者的负影响相抵消，从而使总需求量呈现出随时间的推移而连续变化的趋势。这就是市场预测的连续性原理。

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