根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有：热变性法、酸碱变性法、（）

题目

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第1题：

适用于蛋白质的分离纯化，且不至于使其变性的方法为

A.醇提水沉法

B.盐析法

C.酸碱法

D.水提醇沉法

E.离心分离法

参考答案：B

第2题：

分子筛层析纯化酶是根据（）进行纯化。

A、根据酶分子电荷性质的纯化方法
B、调节酶溶解度的方法
C、根据酶分子大小、形状不同的纯化方法
D、根据酶分子专一性结合的纯化方法

正确答案:C

第3题：

高温损害植物的原因主要是蛋白质变性。但高温对植物的直接伤害是由于酶的纯化,蛋白质只分解而不再合成,导致蛋白质损耗;而间接伤害是由于膜蛋白凝聚而引起膜伤害。()

此题为判断题(对，错)。

参考答案：错误

第4题：

分离纯化酶有哪些常用方法，根据是什么？

正确答案: 酶的分离纯化工作主要是，将酶从杂蛋白中分离出来或者将杂蛋白从酶溶液中除去。现有的酶分离纯化方法都是依据酶和杂蛋白在性质上的差异而建立的。
1、根据分子大小而设计的方法，如离心分离法、筛膜分离法、凝胶过滤法等。
2、根据溶解度的大小分离的方法，如盐析法，有机溶剂沉淀法，共沉淀法，选择性沉淀法，等电点沉淀法。
3、按分子所带正负电荷的多少分离的方法，如离子交换分离法，电泳分离法，聚焦层析法等。
4、按稳定性差异建立的分离方法，如选择性热变性法，选择性酸碱变性法，选择性表面变性法等。
5、按亲和作用的差异建立的分离方法，如亲和层析法，亲和电泳法。
5.酶分子修饰的方法及意义
通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
酶分子的修饰方法分为化学法、生物法和物理法。化学法又可分为金属离子置换法、肽链有限水解法、蛋白质侧链基团的小分子修饰法等。生物法是通过基因工程的手段改变蛋白质，即基于核酸水平对蛋白质进行改造，利用基因操作技术对DNA或mRNA进行改造和修饰，以期获得化学结构更为合理的蛋白质。物理法的特点是不改变酶的组成和基团，酶分子的共价键不发生变化。

第5题：

根据溶解度不同，蛋白质有几种分离纯化方法。

正确答案: 利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
1）等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。
2）盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐（NaCl）比二价离子的中性盐[（NH₄）₂SO₄]对蛋白质溶解度的影响要小。
3）低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。

第6题：

盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离纯化。

正确答案:正确

第7题：

盐析法纯化酶类是根据（）进行纯化。

A、根据酶分子电荷性质的纯化方法
B、调节酶溶解度的方法
C、根据酶分子大小、形状不同的纯化方法
D、根据酶分子专一性结合的纯化方法

正确答案:B

第8题：

最常见的变性作用是蛋白质的加热凝固现象，被称为()。

A、热变性

B、有机溶剂对蛋白质的变性作用

C、酸碱对蛋白质的变性作用

D、强大压力

本题答案：A

第9题：

酶提取和分离纯化的方法有哪些？

正确答案: （一）根据酶分子溶解度不同的方法
（1）盐析沉淀法
（2）等电点沉淀法
（3）有机溶剂沉淀法
（二）根据酶分子大小和形状不同的方法
（1）离心分离法
（2）体积排阻法
（3）超滤
（三）根据酶分子电荷性质的方法
（1）离子交换层析
（2）等电聚焦电泳
（四）根据酶分子专一性结合的分离方法
（1）亲和层析

第10题：

分离纯化蛋白质的方法有：（）法，（）法，（）法，（）法及（）法等。

正确答案:分级沉淀；透析；层析；凝胶过滤；电泳

根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有：热变性法、酸碱

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