酶的主要提取方法和分离方法有哪些?

题目

酶的主要提取方法和分离方法有哪些?

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相似问题和答案

第1题:

挥发油的提取、分离方法各有哪些?


正确答案:挥发油的提取方法有水蒸气蒸馏法、溶剂提取法、吸收法、压榨法和二氧化碳超临界流体萃取法。
挥发油的分离方法有冷冻法、分馏法、化学法和色谱法。

第2题:

挥发油的提取方法有哪些?分离方法有哪些?


正确答案: 挥发油的提取方法有水蒸气蒸馏法、溶剂提取法、吸收法、压榨法和二氧化碳超临界流体提取法。分离方法有冷冻析晶法、分馏法、化学分离法和色谱分离法。

第3题:

蛋白质药物按分子大小分离提取方法有哪些?


参考答案:凝胶过滤法、膜分离、离心。

第4题:

酶提取和分离纯化的方法有哪些?


正确答案: (一)根据酶分子溶解度不同的方法
(1)盐析沉淀法
(2)等电点沉淀法
(3)有机溶剂沉淀法
(二)根据酶分子大小和形状不同的方法
(1)离心分离法
(2)体积排阻法
(3)超滤
(三)根据酶分子电荷性质的方法
(1)离子交换层析
(2)等电聚焦电泳
(四)根据酶分子专一性结合的分离方法
(1)亲和层析

第5题:

酶的提取方法有哪些?影响酶提取的主要因素有哪些?


正确答案:根据酶提取时所采用的溶剂或溶液的不同,酶的提取方法主要有盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取和有机溶剂提取等。
①盐溶液提取法:蛋白质在低浓度盐溶液中,其溶解度会随着盐溶液浓度的升高而增加,这种现象称为盐溶这是因为蛋白质分子吸附某种盐类离子后,带电表层使蛋白质分子彼此排斥,而蛋白质分子与水分子间的相互作用却加强,因而溶解度提高。
②酸溶液提取法:有些酶在酸性溶液中的溶解度比较大,且比较稳定,这类酶宜采用酸溶液提取,PH一般控制在2—6,针对酶的性质选择合适的PH,避免PH过低引起酶失活。
③碱溶液提取法:有些酶在碱性溶液中的溶解度比较大,且比较稳定,这类酶宜采用碱溶液提取,PH一般控制在8—12,针对酶的性质选择合适的PH,避免PH过高引起酶失活。
④有机溶剂提取法:一些和脂类结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的酶蛋白难溶于水、稀盐、稀酸或稀碱中,则常用能够与水混溶的有机溶剂提取,如乙醇、丙酮、丁醇等。酶主要是蛋白质,影响蛋白质提纯的因素同样会影响酶的提纯,而在酶提取过程中最重要的就是要防止酶的变性失活。影响酶提取的最主要因素是酶在所用溶剂中的溶解度及酶向溶剂中扩散的难易。此外,在提取过程中还要注意一下因素的影响:
(1)温度:为防止酶的变性失活,提取时温度不宜过高。特别是采用有机溶剂提取时,整个提取操作应尽可能在低温下进行。
(2)PH:酶提取液的PH首先应保证蛋白质稳定,为了增加酶的溶解度,提取时溶液的PH应远离酶的等电点。(3)搅拌:搅拌能促进酶在提取液中的溶解,一般采用温和搅拌为宜,速度太快易产生大量气泡,增大了与空气的接触面,会引起酶蛋白的变性失活。
(4)污染:酶液是微生物生长的良好培养基,在提纯过程中应尽可能防止微生物对酶的破坏。
(5)提取液的体积:提取液的用量增加可提高提取率。但过量的提取液,使酶浓度降低,对进一步分离纯化不利。所以提取液的用量一般为含酶原料体积的3—5倍,少量多次,以得到较好的提取效果。

第6题:

香豆素的提取分离方法有哪些?


正确答案: ①系统溶剂法:常用石油醚、苯、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇顺次提取。各萃取液浓缩后试获得结晶,或结合其他方法再进行分离。
②碱溶酸沉法:因香豆素具有内酯结构或酚羟基,可溶于热碱液中,加酸又可析出,故可采用碱溶酸沉方法提取,但应注意碱的浓度且不可长时间加热,以免破坏结构。
③水蒸气蒸馏法:小分子香豆素有挥发性,可采用此法使之与不挥发的成分分离。
④色谱分离法:结构相似的香豆素可用此法分离。常采用硅胶或中性氧化铝的吸附柱层析法,用己烷和乙醚,己烷和乙酸乙酯等混合溶剂进行洗脱分离。

第7题:

苦参生物碱的结构类型是什么?其理化性质和提取分离方法有哪些?   


正确答案:(1)结构类型
苦参所含生物碱主要是苦参碱和氧化苦参碱。此外还含有羟基苦参碱、N-甲基金雀花碱、安那吉碱、巴普叶碱和去氢苦参碱(苦参烯碱)等。这些生物碱都属于喹喏里西啶类衍生物。分子中均有2个氮原子,一个是叔胺氮,一个是酰胺氮。
(2)理化性质
碱性:苦参中所含生物碱均有两个氮原子。一个为叔胺氮(N-1),呈碱性;另一个为酰胺氮(N-16),几乎不显碱性,所以它们只相当于一元碱。苦参碱和氧化苦参碱的碱性比较强。
溶解性:苦参碱的溶解性比较特殊,不同于一般的叔胺碱,它既可溶于水,又能溶于氯仿、乙醚等亲脂性溶剂。氧化苦参碱是苦参碱的氮氧化物,具半极性配位键,其亲水性比苦参碱更强,易溶于水,难溶于乙醚,但可溶于氯仿。
极性:苦参生物碱的极性大小顺序是:氧化苦参碱>羟基苦参碱>苦参碱。
(3)提取分离
苦参以稀酸水渗漉,酸水提取液通过强酸性阳离子交换树脂提取总生物碱。苦参碱和氧化苦参碱的分离,利用二者在乙醚中的溶解度不同进行。

第8题:

蛋白质类药物分离提取方法有哪些?


参考答案:(1)沉淀法(盐析、有机溶剂、等电点);
(2)按分子大小分离(超滤、透析、层析、离心);
(3)电荷(离子交换、层析、电泳、等电聚焦);
(4)亲和层析法(酶与底物、抗原与抗体、激素与受体)。

第9题:

香豆素的提取分离方法有哪些?提取依据是什么?


正确答案:溶剂提取法(溶解性),碱提酸沉淀法(内酯环),水蒸气蒸馏法(挥发性),色谱法。

第10题:

分离纯化酶有哪些常用方法,根据是什么?


正确答案: 酶的分离纯化工作主要是,将酶从杂蛋白中分离出来或者将杂蛋白从酶溶液中除去。现有的酶分离纯化方法都是依据酶和杂蛋白在性质上的差异而建立的。
1、根据分子大小而设计的方法,如离心分离法、筛膜分离法、凝胶过滤法等。
2、根据溶解度的大小分离的方法,如盐析法,有机溶剂沉淀法,共沉淀法,选择性沉淀法,等电点沉淀法。
3、按分子所带正负电荷的多少分离的方法,如离子交换分离法,电泳分离法,聚焦层析法等。
4、按稳定性差异建立的分离方法,如选择性热变性法,选择性酸碱变性法,选择性表面变性法等。
5、按亲和作用的差异建立的分离方法,如亲和层析法,亲和电泳法。
5.酶分子修饰的方法及意义
通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
酶分子的修饰方法分为化学法、生物法和物理法。化学法又可分为金属离子置换法、肽链有限水解法、蛋白质侧链基团的小分子修饰法等。生物法是通过基因工程的手段改变蛋白质,即基于核酸水平对蛋白质进行改造,利用基因操作技术对DNA或mRNA进行改造和修饰,以期获得化学结构更为合理的蛋白质。物理法的特点是不改变酶的组成和基团,酶分子的共价键不发生变化。