膜片钳实验的基本操作步骤包括哪些？

题目

膜片钳实验的基本操作步骤包括哪些？

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相似问题和答案

第1题：

什么是膜片钳技术？它的基本工作原理是什么？

正确答案:膜片钳技术是一种能够记录膜结构中单一的离子通道蛋白质的开放和关闭的技术，即是测量单通道离子电流和电导的技术。基本工作原理：膜片钳技术是用玻璃微电极接触细胞，形成吉欧姆(GΩ)阻抗，使得与电极尖端开口处相接的细胞膜的膜片与周围在电学上绝缘，在此基础上固定电位，对此膜片上的离子通道的离子电流(pA级)进行监测记录的方法。

第2题：

膜片钳实验的主要影响因素是什么？

正确答案:减少噪音，避免电极前端的污染，封接的成功与否，选取正确的记录模式，如何选择电极内、外液，如何选择激动剂、阻断剂，正确的进行数据采集

第3题：

沉淀硬化操作包括以下三个基本步骤:()。

【参考答案】固溶处理、淬火、时效

第4题：

询问的基本步骤包括哪些？

正确答案: 一是表明身份，出示证件。
二是了解被询问人的基本情况。
三是告知被询问人的权利和义务。
四是向被询问人提出问题。

第5题：

离心泵的运行操作主要包括哪些步骤？

正确答案: ⑴岗位操作人员穿戴好劳保用品，准备好工具、用具，试运行前对泵全面检查；
⑵按照润滑管理制度，加润滑油至液位计的1/3~2/3处；
⑶打开压力表阀，打开泵冷却水阀，观察是否正常；
⑷关闭泵的出口阀、排放阀，确认入口阀全开，灌泵；
⑸打开泵出口倒淋，放尽进口管路及泵体的气体后，关闭倒淋；
⑹拆掉联轴节罩，按泵的运转方向，手动盘车三圈，检查泵轴转动是否灵活；新泵或大修后的泵要检查两联轴节的同心度和平行度是否在规定范围；
⑺旋转电机开关按钮，点动确认运转方向正确，装上联轴节罩；
⑻启动离心泵，待达到额定转速、压力稳定后，慢慢打开泵出口阀，调节阀门开度，使压力、电流值在工艺指标范围内。
⑼检查前后轴承的振动情况；
⑽检查填料压紧程度；
⑾检查泵体、电机是否有杂音；
⑿检查泵轴承温度、电机轴承温度；
⒀检查冷却水、润滑油系统，要求无泄露；
⒁检查各连接部位的螺栓有无松动，非转动部位震动是否过大，温度是否过高；
⒂无气蚀现象
⒃泵运行期间，定时检查压力、流量、电流值及上述11-18项，发现异常，立即停车，查找原因后排除。

第6题：

膜片钳技术的应用范围有哪些？

正确答案: 1）分辨单通道电流，直接观察通道的开闭过程。
2）区分离子通道的离子选择性及其门控性（如区分电压或化学门控性通道），发现新的离子通道及亚型。
3）在记录单个通道电流（i）和全细胞电流（I）的基础上，可分别计算出细胞膜上的通道数（n）和开放概率（p），依公式I=nip。
4）用以检测某些递质能否打开通道，或是否接受第二信使的调控（膜内面向外式）
5）研究细胞膜上的信使物质对离子通道型受体的调节机制（应用全细胞记录式）
6）研究不同离子对通道特性的影响及细胞内信使物质如对离子通道型受体的调节机制（内面向外膜片）
7）研究药物对电压或化学门控性通道的影响。

第7题：

建立膜片钳记录系统大致需要哪些基本设备？

正确答案:膜片钳实验仪器设备主要有放大器、微型操纵器（微超）、倒置显微镜、防震台、屏蔽笼、灌流槽和数据采集和处理设（计算机）。其中膜片钳放大器（amplifier）、微型操纵器（微操micromanipulator）、倒置显微镜(inverted microscope)是膜片钳实验区别于一般电生理实验所需要的仪器。

第8题：

下列与演示实验基本要求无关的叙述是（　　）。

A．讲清演示实验的步骤和方法
B．引导学生分析实验现象
C．指导学生正确操作
D．方法要科学、操作要规范

答案：C

解析：

本题考查的是演示实验的要求，演示实验的主要操作者是教师，不需要指导学生正确操作。

第9题：

典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤？

正确答案: a、提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子。
b、将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。
c、对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。
d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。

第10题：

圆筒混料机的操作具体包括哪些步骤？

正确答案: （1）开机前，除按混合机通用开停机规程要求进行设备的传动、润滑、电气、水管与阀门检查外，要对下列位置和部件进行认真检查：检查并清除圆筒内衬板上滞留的一切钢铁件；检查刮刀、刮刀杆与刮刀梁相对位置是否正常，刮刀杆、刮刀与梁的连接是否开焊与松动；检查衬板有无螺栓松动、衬板翘起、压条开焊脱落等，并对出现的问题及时处理。检查刮刀梁与进出口支架及支架与基础的焊接有无开焊与缺焊处；检查水管、阀门、喷头是否齐全、严密不漏水、管道内是否已送水，各闸阀是否处于关闭状态。
（2）检查均无问题时，合上事故开关，通知烧结集中控制室启动。
（3）在非联锁或事故情况下，按机旁操作箱上的停止按钮或切断事故开关即可停机。
（4）不论联锁、非联锁，停车后，必须将事故开关切断，以免下次起动时联系失误，造成重大事故。带料操作时，接到下料通知后，逐渐调整圆盘转速开始下料，同时打开高压蒸汽，并根据料流适当加水，待小仓料存到1/3以上，通知开烧结机。接到停料通知时，将圆盘给料机调速箱指针打到“零”位，停止供料。并随混合料的减少而逐渐关闭水门、关闭蒸汽门，当料仓的料少于1/3时，通知烧结停机。
（5）混料机加、停水操作：停机时水路系统各闸阀处于关闭状态；加水时先开总阀，再开支阀，待混合机进料后需加水时再开加水蝶阀；进料后视混合料水分大小决定是否加水，加减水效果待加减水后观察两分钟；停机时要立即停水（先关蝶阀，再关闸阀）；利用停机停水机会及时排放水过滤器内的过滤杂物。

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