简述激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）的主要功能有哪些？

题目

参考答案和解析

正确答案:L.SCM的主要功能有：
1.细胞，组织光学切片该功能也被形象地称为“细胞CT”或“显微CT”。
2.三维图像重建。
3.对活细胞的长时间观察。
4.细胞内酸碱度及细胞离子的定量测定。
5.荧光漂白恢复技术（FRAP）它利用高强度脉冲式激光照射细胞的某一区域，造成该区域荧光分子的漂白，而该区域周围的非漂白荧光分子将以一定速率向受照区扩散，LSCM可直接对其扩散速率进行监测。FRAP可用于细胞间通讯、细胞骨架的构成、生物膜结构和大分子组装等的研究。
6.细胞间通讯的研究。7.细胞膜流动性测定和光活化技术等功能。

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相似问题和答案

第1题：

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的应用不包括

A、细胞器研究

B、细胞间通讯研究

C、三维重建生物结构分析

D、细胞内离子测定

E、细胞大小测定

参考答案：E

第2题：

以下显微镜的光源为激光的是（）

A、微分干涉显微镜
B、激光扫描共聚焦荧光显微镜
C、扫描电子显微镜
D、透射电子显微镜

正确答案:B

第3题：

以下哪一项不是激光共聚焦显微镜(LSCM)的特点

A.可对细胞内部的光学断层扫描成像

B.对样品进行立体、动态观察

C.具备普通光学显微镜和荧光显微镜的功能

D.不能观察活细胞

E.没有光的散射

正确答案：E

第4题：

简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。

正确答案: 激光扫描共聚焦显微镜利用单色激光扫描束经过照明针孔形成点光源，对标本内焦平面上的每一点进行扫描，标本上的被照射点，在检测器的检测针孔处成像，由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐线接收，迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像，照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔，焦平面以外的点不会在检测针孔处成像，这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面，克服了普通荧光显微镜图像模糊的缺点。另外在显微镜的载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。

第5题：

简述激光扫描共聚焦显微镜的基本原理、特点及应用领域。

正确答案:基本原理：
激发光经过照明针孔形成光源，通过激发滤光片被分束器反射，由显微物镜聚焦到三维样品内，并在垂直于光轴的焦点平面上扫描。焦平面和焦平面上下被照射的区域所发出的荧光又被物镜收集，通过分束器和发射滤光片。在探测器前方有一共焦针孔，照明针孔和共焦针孔相对于物镜焦平面是共轭的，因此只有焦平面发出的荧光能聚焦于共焦针孔并通过针孔到达探测器PMT或CCD。焦平面以上或以下的点不能在探测针孔处成像，所以焦平面以为发出的光被针孔挡住，对共焦图像的贡献很小。这样得到的共聚焦图像基本上仅来自于焦平面上的光信息，即被焦平面切割的断层。如果逐步调节样品纵轴的位置，可产生样品的多幅断层图像，细胞或组织各个横截面的图像都能清楚的显示。这种成像方法称为共焦扫描显微镜层析成像方法。通过图像的三维重建技术，则能得到样品的三维立体图像。
特点：
1.散射背景小，图像对比度好，探测灵敏度高，成像质量好；
2.可进行三维扫描成像；
3.采用激光光源；
4.配备了功能强大的图像处理软件。
应用领域：
由于激光扫描共聚焦显微镜结合先见的数据采集、记录与处理技术，使使其在生命科学的研究中成为最先进的分子细胞生物学的分析仪器，用于观察或细胞结构及特定分子、离子的生物学变化，定量分析，以及实时定量测定等，并衍生出黏附细胞的分选、激光细胞显微外科技术、荧光漂白后恢复技术、细胞通讯技术、细胞黏膜流动性测定以及光活化技术等多个新技术和新方法。现在激光扫描共聚焦显微镜已经被广泛的用于生物学、生物化学、生理学、药理学、病理学、遗传学和组胚学以及免疫学、环境学和营养学等领域。

第6题：

激光共聚焦显微镜（LSCM）的特点不包括

A、可对细胞内部的光学断层扫描成像

B、对样品进行立体、动态观察

C、具备普通光学显微镜和荧光显微镜的功能

D、分析亚细胞结构

E、观察DNA分子

参考答案：E

第7题：

共聚焦激光扫描显微镜通过把焦点集中在两束激光汇聚的地方，使我们看到的图像更清晰。

正确答案:正确

第8题：

激光扫描共聚焦显微镜不包括

A、激光器

B、扫描头

C、光学显微镜

D、计算机及输出

E、细胞分选系统

参考答案：E

第9题：

激光扫描共聚焦显微镜

正确答案: 以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点，使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像，而焦面以外的漫射光不参加成像，改变焦平面，可获得细胞或原标本不同层次的图像，从而得到样品的三维结构图像。

第10题：

简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。

正确答案: 激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。另外在其载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。激光扫描共聚焦显微镜具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。

简述激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）的主要功能有哪些？

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