基因诊断的常用技术方法不包括（）。A、RFLP分析B、基因测序C、基因剔除D、核酸分子杂交E、PCR/SSCP

题目

基因诊断的常用技术方法不包括（）。

A、RFLP分析
B、基因测序
C、基因剔除
D、核酸分子杂交
E、PCR/SSCP

参考答案和解析

正确答案:C

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第1题：

临床上常用FQ-PCR、bDNA技术、基因芯片、杂交捕获系统和核酸杂交等技术进行感染性疾病的分子诊断，这些方法各有特点，实际应用中应根据需要灵活选择。常用的感染性疾病分子诊断的方法中，灵敏性最高的方法是A、杂交捕获系统

B、FQ-PCR

C、bDNA技术

D、基因芯片

E、核酸杂交

常用的感染性疾病分子诊断的方法中，可以进行高通量检测的方法是A、杂交捕获系统

B、FQ-PCR

C、bDNA技术

D、基因芯片

E、核酸杂交

参考答案：问题 1 答案：B

问题 2 答案：D

第2题：

以下哪种方法不作为基因诊断的常用技术( )

A、基因芯片

B、核酸分子杂交

C、PCR

D、基因测序

E、基因失活

参考答案：E

第3题：

目前基因诊断常用的分子杂交技术不包括哪一项()

A.Southern印迹

B.Western印迹

C.Northern印迹

D.DNA芯片技术

E.等位基因特异性寡核苷酸分子杂交

正确答案：B

第4题：

什么是基因诊断？基因诊断中常用的方法有哪些？试简述其中一种方法的原理。

正确答案: 基因诊断是指用分子生物学的技术对引起疾病的原因——遗传基因、致病微生物和寄生虫，以及某些恶性肿瘤在基因水平上进行病原学和细胞遗传基因的检测和分析。基因诊断中常用的方法有核酸分子杂交、PCR、DNA芯片技术、限制酶酶谱分析和DNA序列测定等。
核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是：互补的核酸单链能够在一定条件下结合成双链，即能够进行杂交。它不仅能在DNA和DNA之间进行，也能在DNA和RNA之间进行。因此，当用一段已知基因的核酸序列作探针，与变性后的单链基因组DNA接触时，如果两者的碱基完全配对，它们即互补地结合成双链，从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。

第5题：

基因诊断的常用技术方法有

A.细胞培养
B.基因测序
C. PCR
D.核酸分子杂交

答案：B,C,D

解析：

第6题：

诊断感染性疾病最常用的分子诊断方法是

A、PCR

B、RFLP

C、ASO

D、基因测序

E、基因芯片

参考答案：A

第7题：

下列选项中属基因诊断常用技术方法的是( )

A.核酸分子杂交技术
B.聚合酶链反应
C.基因测序
D.基因芯片

答案：A,B,C,D

解析：

基因诊断就是利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。基因诊断常用的技术包括：核酸分子杂交技术、聚合酶链反应(PCR)、基因测序、基因芯片等等。故本题应选ABCD.

第8题：

目前常用的黄头病病原学鉴定方法不包括( )。

A.分子原位杂交法

B.基因芯片技术

C.Western blot

D.ELISA

E.RT-PCR检测法

正确答案：B

第9题：

试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

正确答案: （一）显微注射法
（1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
（2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
（3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
（二）电穿孔转化法
（1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
（2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
（3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
（三）精子介导法
（1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
（2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
（3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
（四）基因枪转化法
（1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
（2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
（3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
（五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
（六）组织注射法
将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。

第10题：

列举常用5种不同基因诊断技术，简述其原理及优、缺点。

正确答案: 核酸分子杂交：错配时杂交信号减弱或消失，可用于基因结构和表达检测，须制备合适的探针。
PCR：变异引起扩增产物不同，灵敏度高，须选择合适引物，有假阴性或假阳性结果。
SSCP：突变引起核酸二级结构改变，可检测已知或未知突变，检测的灵敏度被片段长度稀释。
RFLP：基因变异改变酶切图谱，须选择合适的限制性核酸内切酶；当变异没有引起任何酶切结果的改变时，则无法使用。
DNA序列测定：直接检测核酸序列比较差异，最准确的一种诊断方法。
基因芯片：多元杂交分析杂交差异，一次杂交可检测一个样品的多个基因不同突变或表达变化。

基因诊断的常用技术方法不包括（）。

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