噬菌体显示技术

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噬菌体显示技术

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第1题：

下列哪些是新近蛋白质相互作用的体外研究方法（）。

A、蛋白质工程中的定点诱变技术
B、免疫沉淀
C、酵母双杂交
D、噬菌体显示技术
E、生物传感芯片质谱

正确答案:A,C,D,E

第2题：

简述目前噬菌体表面显示技术的局限性。

正确答案: （1）受大肠杆菌转化效率的限制，高效转化大肠杆菌的转化效率为10⁷-10⁸，故一般肽库的容量只有10⁹，高于此限制的基因难以表达，受到库容量的限制；
（2）由于噬菌体显示技术依赖于宿主细胞内基因的表达，因此难以对毒性分子进行有效表达和展示；
（3）编码肽的基因带有一定的偏爱性，决定了肽库的多样性受到局限；
（4）氨基酸的修饰受宿主菌限制。

第3题：

噬菌体抗体库技术是利用入噬菌体载体表达

正确答案：B
噬菌体抗体库技术是利用入噬菌体载体表达能与抗原结合的蛋白片段，备选答案中只有Fab是能与抗原结合的抗体蛋白片段。

第4题：

基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有（）。

A、串联亲和纯化耦联质谱技术
B、噬菌体显示技术
C、亲和层析耦联质谱技术
D、生物传感器耦联质谱技术
E、免疫共沉淀耦联质谱技术

正确答案:A,C,D,E

第5题：

简述目前噬菌体表面显示技术在蛋白质研究中的应用。

正确答案: （1）展示功能蛋白结构域：噬菌体显示技术被广泛应用于研究蛋白质与其他配基的相互作用。完整的蛋白质或结构域与噬菌体蛋白形成融合噬菌体，为研究结构与功能的相互关系提供了一个非常有效的工具。
（2）研究蛋白质相互作用：用靶蛋白质（如受体、抗体等）对该随机文库进行筛选，就可以获得与之结合的短肽序列。对所得序列测定分析，并合成相应的短肽从而可以来研究两个蛋白质之间的相互作用。
（3）蛋白质定向设计和空间结构改造：可利用靶蛋白从蛋白质随机展示文库中筛选一个与其相互作用的蛋白质，并定点突变，以实现对其特定位点和功能域进行定向选择。因此定点突变结合噬菌体显示技术成了筛选蛋白功能域的一个有力工具。
（4）新受体和配体的发现：从多肽库中可分离到与天然激素相似的，与受体结合的高亲和力的多肽，利用完整细胞从多肽库中找到受体的高选择性配体，如利用噬菌体显示技术研究发现，人白细胞介素-4受体（IL-4）作为靶标是对药物筛选，及动脉粥样硬化分子成像的重要工具。
（5）噬菌体显示技术还可用于筛选酶抑制剂、研究细胞信号转导及抗原表位分析等。

第6题：

以下属于研究基因工程产品蛋白质间相互作用的技术的是（）。

A、二维凝胶电泳
B、图像分析技术
C、质谱技术
D、蛋白质芯片技术
E、噬菌体显示技术

正确答案:E

第7题：

噬菌体表面显示技术可用来研究（）。

A、蛋白质-蛋白质相互作用
B、蛋白质-核酸相互作用
C、核酸-核酸相互作用
D、噬菌体外壳蛋白性质
E、外源蛋白性质

正确答案:A

第8题：

噬菌体抗体库技术是利用λ噬菌体载体表达

A、Fc
B、Fab
C、胸腺嘧啶核苷
D、CD分子
E、V-D-J

答案：B

解析：

噬菌体抗体库技术是利用入噬菌体载体表达能与抗原结合的蛋白片段，备选答案中只有Fab是能与抗原结合的抗体蛋白片段。

第9题：

什么是噬菌体表面显示技术？

正确答案:噬菌体表面显示技术是将基因表达产物与亲和选择相结合的技术，其基本原理是将编码“诱饵”蛋白的DNA片段插入噬菌体基因组，并使之与噬菌体外壳蛋白编码基因相融合。该重组噬菌体浸染宿主细菌后，复制形成大量带有杂合外壳蛋白的噬菌体颗粒，直接用于捕获靶蛋白库中与“诱饵”相互作用的蛋白质。基于生物分子与药物靶分子（抗体、受体、抗原、酶的底物等）的亲和力，应用噬菌体表面显示技术可以从多肽库中进行快速筛选，从而成为药物开发的强有力工具。

第10题：

噬菌体抗体库技术的特点？

正确答案:模拟天然全套抗体库
（1）抗体文库可以达到1011库容，能包含B细胞全部克隆。
（2）建库的外源基因来自人外周血、骨髓或脾脏的淋巴细胞提取的mRNA反转录形成
的cDNA扩增，这是人体多克隆细胞的总mRNA。
（3）使用的通用引物采自多个人体，具有人的种属普遍性。
（4）VH和VL随机重组增加抗体的多样性。

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