问答题试述抗生素发酵工业上染菌的危害以及分析在发酵过程中染菌的主要原因有哪些？

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问答题

试述抗生素发酵工业上染菌的危害以及分析在发酵过程中染菌的主要原因有哪些？

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第1题：

发酵过程中染菌的判断与检查。

正确答案: 以无菌试验中的酚红肉汤培养和双碟培养的反应为主，，以镜检为辅。每个无菌样品的无菌试验，至少用2只酚红肉汤或斜面同时取样培养。要定量或用接种环蘸取法取样，不宜从发酵罐直接取样。因取样量不同，影响颜色反应和浑浊程度的观察。如果连续3个时间的酚红肉汤无菌样发生颜色变化或产生浑浊，或斜面连续3个时间样品长出杂菌即判断为染菌。有时酚红肉汤反应不明显，要结合镜检确认连续3个时间样品染菌，即判为染菌。

第2题：

发酵工业制服染菌的要点有哪些？

正确答案: 发酵工业制服染菌的要点：
⑴对空气净化系统的要求：防止空气净化系统带菌的主要措施有提高空气进口的空气洁净度；除尽压缩空气中夹带的油和水，保持过滤介质的除菌效率。另外，在过滤器灭菌时要防止过滤介质被冲翻或烧灼，还要防止发酵液倒流入空气过滤器内；
⑵对蒸汽的要求：首先要重视蒸汽质量，一般采用饱和蒸汽，严格控制蒸汽中的含水量，按照不同灭菌工艺要求提供稳定的蒸汽压力，灭菌过程中蒸汽压力不可以大幅度的波动，以保证灭菌质量；
⑶对设备的要求：发酵罐及其附属设备应做到无“渗漏”，无“死角”。凡与物料、空气、下水道连接的管件阀门应保证严密不漏，蛇管和夹层应定期试漏。连续灭菌设备要定时拆卸清洗。无菌操作室和菌种培养间定期消毒，以保持无菌状态；
⑷对工艺操作的要求：
①发酵罐放罐之后，对罐体和附属设备进行全面清洗和检查，清除罐内的残渣，除尺罐壁上的污垢，清除罐附件处的堆积物；
②配制培养基时要防止物料结块或带入异物，配料罐和输送料液系统要定时清洗消毒；
③在实罐灭菌、空罐灭菌、培养基连续灭菌、各种管道的灭菌等的操作过程中，要严格执行工艺规程要求。灭菌中要保证蒸汽畅通，保证蒸汽压力与温度的对应关系；
④菌种组的工作人员要严格按工艺规程制备生产种子。对进入无菌室的全部物料、器械实行灭菌。坚持无菌间和无菌操作人员的菌落检测制度；
⑤发酵过程的无菌检查工作，要严密取样操作。力求减少取样和平皿划线时的操作误差。严格镜检岗位的操作要求，降低无菌检察中的错判与误判。发酵染菌罐批，及时查明杂菌来源，并采取相应措施予以处理。

第3题：

如何对发酵染菌进行原因分析？

正确答案: 导致发酵染菌的原因错综复杂，但不外乎菌种、物料污染所带入，设备泄露和死角造成，空气过滤失效及灭菌操作失误等因素。发酵染菌可以从以下三方面来分析寻找原因。
从染菌的范围来分析。但罐染菌应从单体设备的严密、清洁和灭菌操作上找原因。相同时间内同时出现几个发酵罐染菌应从空气系统。糖油物料、排气口等公用系统上找原因。单体罐连续或间断性染菌应从该罐的清洁、泄漏、死角或设备不合理方面找原因。
（1）从染菌的时间来分析。尚未补加糖料之前发生前期染菌，一般杂菌量大，应从物料灭菌不透。种子带菌、泡沫顶罐。轴封渗漏等方面找原因。发酵的中后期染菌应从设备严密、空气系统、糖油物料系统以及中间工艺控制上找原因。
（2）从染菌的菌型上分析。染酵母菌、霉菌。由于其不抗热，可从无菌室的清洁情况，倒瓶、并瓶时菌落数以及设备泄露上找原因。染球菌、杆菌等不抗热杂菌应从空气过滤介质的破损失效、设备渗漏、培养基倒流等方面找原因。染芽孢杆菌等抗热杂菌时应从设备的死角、罐内的清洁、不合理的设备装置以及灭菌操作上找原因。

第4题：

发酵生产中引起染菌的原因有哪些？如何进行检查和判断分析？

正确答案:主要原因有种子带菌、空气系统染菌、设备渗漏、培养基或设备灭菌不彻底、管理和操作不当。检查是否染菌可采用显微镜检查法、平板划线培养检查法和肉汤培养法。同时还需从发酵过程的异常现象判断是否染菌，如溶解氧水平、排气中CO2含量、pH异常变化等，可初步判断污染了杂菌。

第5题：

染菌可以分为（）.

A、种子期染菌
B、发酵前期染菌
C、中期染菌
D、末期染菌

正确答案:A,B,C

第6题：

造成发酵染菌的因素有哪些？

正确答案: 造成发酵染菌的因素很多，主要因素有设备检修质量不好，设备泄漏使运转过程和补料过程污染杂菌，操作质量差也是发酵染菌的重要因素，例如消毒工没有严格按照工艺规程操作，培养基和罐体、管道灭菌不彻底，看罐工缺乏高度的责任心，泡沫控制不好造成泡沫顶罐或逃液都容易导致染菌。此外，蒸汽质量不好，蒸汽压力低也会导致灭菌不彻底而染菌。

第7题：

发酵过程中的染菌的原因有哪些？

正确答案: 发酵过程中的染菌的原因：
（1）从染菌的规模和时间分析：
①在发酵过程中，如果是种子罐和发酵罐同时大面积染菌，杂菌的主要来源可能是空气净化系统，如空过滤器失效或空气管道渗漏造成的，其次考虑种子制备工序，如果只是发酵罐大面积染菌，除考虑空气净化系统带菌外，还要重点考查接种管道，补料系统，发酵培养基采用连续灭菌工艺时，还要严格检查连消系统是否带及杂菌；
②如果是部分发酵罐早期染菌，可能是培养基灭菌不彻底，或种子罐带菌，或接种管道灭菌不彻底造成的。如果是发酵的中后期染菌，重点分析补料系统和加消沫剂系统；
③个别发酵罐连续染菌，就从单个罐体查找杂菌来源，如罐内是否有“死角”或冷却系统有渗漏。当然还要检查附件。个别罐批的散在性染菌，其原因很难追查，要具体情况具体分析；
（2）从染菌类型分析：发酵过程染菌，多种菌型出现的机率多，单菌型机率较少。染的是耐热芽孢杆菌时，这与培养基灭菌不彻底，或设备内部有“死角”关系极大，空气中也存在芽孢杆菌。污染菌是不耐热的球菌或杆菌时，可从空气净化系统和冷却系统进行追查。

第8题：

发酵染菌是否影响抗生素产量？

正确答案: 发酵染菌都影响抗生素的产量，但影响程度会有不同，污染某些杂菌会阻滞抗生素的合成，而污染有一些杂菌则对抗生素的合成没有影响，即使染菌不影响抗生素的合成，然也会与正常产生菌争夺养料，使菌种生长不良，杂菌的生长又会改变发酵液的PH值，产生有毒代谢物，产生降解抗生素的酶类，以及使发酵液粘度增加，导致难以过滤，使抗生素产量降低。

第9题：

按照发酵的全过程来分，染菌分为（）.

A、种子期染菌
B、发酵前期染菌
C、发酵中期染菌
D、发酵后期染菌

正确答案:A,B,C,D

第10题：

试述发酵过程染菌的防治措施？

正确答案: ①杜绝种子带菌。
②加强空气净化，防止空气带菌。
③消灭设备和管道的死角。
④防止设备渗漏。严格操作规范，减少操作失误。

试述抗生素发酵工业上染菌的危害以及分析在发酵过程中染菌的主要原因有哪些？

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