问答题革兰氏染色法包括哪几个基本步骤？你认为影响革兰氏染色结果正确性的关键环节是什么？

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革兰氏染色法包括哪几个基本步骤？你认为影响革兰氏染色结果正确性的关键环节是什么？

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第1题：

试以枯草芽孢杆菌为例，简述采用革兰氏染色法染色的结果、原理及其主要操作步骤。

正确答案: 结果：G+，菌体呈蓝紫色。
原理：G+细菌细胞壁中肽聚糖含量高，而脂类物质含量低，且肽聚糖层网状结构紧密、牢固、多层。当用乙醇处理时，脂类物质溶解而使得肽聚糖层网状结构中的孔径变小，细胞壁通透性降低，结晶紫-碘的复合物保留于细胞中而不易脱色，故菌体仍呈结晶紫-碘复合物的颜色（蓝紫色）。
主要操作步骤：涂片：将培养一定时间的菌种均匀涂布于载玻片上，干燥、固定。染色：结晶紫碘液95％乙醇沙黄。（初染）（媒染）（脱色）（复染）油镜观察。

第2题：

下列哪种染色方法能够将细菌区别为革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌（）

A、革兰氏染色法
B、瑞氏染色法
C、抗酸染色法
D、姬姆萨染色法
E、柯兹洛夫斯基染色

正确答案:A

第3题：

石炭酸复红加温染色是革兰氏染色法的初染步骤。

正确答案:错误

第4题：

如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么？

正确答案: 具体操作步骤为
（1）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。
（2）干燥、固定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过3-4次，温度不宜过高。
（3）染色，用结晶紫进行初染1min，然后水洗。用碘液进行媒染，用碘液覆盖染色部位1min，水洗。在涂有细菌的部位连续滴加95%乙醇，约30s，水洗脱色。用番红溶液复染1min，水洗。
（4）干燥，自然干燥或用吸水纸吸干，也可以用电吹风吹干。
（5）镜检。
关键环节是酒精脱色。

第5题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）

正确答案:结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色、稀释复红或沙黄复染

第6题：

何谓革兰氏染色法？影响革兰氏染色法着色稳定性的因素有哪些？请以枯草芽孢杆菌为例予以说明。

正确答案:此法由丹麦医生C.Gram于1884年创立的一种重要的细菌鉴别染色法而得名。其主要步骤：结晶紫初染，碘液媒染，乙醇脱色和沙黄复染。菌体最后呈蓝紫色者为G+菌，呈红色者为G-菌。研究表明，枯草芽孢杆菌是G+菌。但是，如果培养时间过长或者已死亡，部分菌体自溶，涂片厚薄，尤其脱色时间过长等，都会影响其着色稳定性，使G+菌误染为G-菌。

第7题：

革兰氏染色法的关键步骤是什么？为什么？

正确答案: 95%酒精脱色是关键步骤，酒精具有脱色、溶脂、蛋白凝固的功能，革兰氏阳性菌胞壁主要是粘肽（蛋白）遇浓酒精凝固变性成厚壳，而阻止酒精内渗，故不能脱出前步的染色，故呈紫色；革兰氏阴性菌胞壁主要是脂类及多糖，遇浓酒精溶脂，胞壁遭破坏，酒精内渗，完全脱出前步的染色，复染后呈红色.

第8题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）、（）、（）和（）。

正确答案:结晶紫初染；碘液媒染；95%乙醇脱色；稀释复红或沙黄复染

第9题：

试以大肠杆菌为例，简述采用革兰氏染色法染色的结果、原理及主要操作步骤。

正确答案: 结果：G-，菌体呈复染液颜色（红色）原理：G-菌细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高。当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增加，致使结晶紫-碘的复合物被抽出，最后被染上了复染液（沙黄或番红）的颜色（红色）。主要操作步骤：涂片：培养一定时间的菌种均匀涂布于载玻片上，干燥、固定；染色：结晶紫初染碘液媒染95％乙醇脱色沙黄或番红复染；油镜观察。

第10题：

什么是革兰氏染色法？它的主要步骤是什么？哪一步是关键？

正确答案: 革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。
主要步骤：涂片固定、结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色、番红复染。
关键：95%乙醇脱色

革兰氏染色法包括哪几个基本步骤？你认为影响革兰氏染色结果正确性的关键环节是什么？

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