请说明在进行SDSPAGE电泳之前,样品的处理方法,并解释其原因。

题目
问答题
请说明在进行SDSPAGE电泳之前,样品的处理方法,并解释其原因。
参考答案和解析
正确答案: 样品的处理方法:
1、尽可能的提高样品的溶解度,抽提最大量的样品,减少样品的损失;减少对样品的人为修饰;破坏样品与其他生物大分子的相互作用,并样品处于完全变性状态。杂质的存在会影响电泳的效果,其他大分子还有可能阻塞凝胶孔径。
2、选择合适的样品缓冲液,因为不同的样品有不同的最适缓冲液;
3、确定合适的样品浓度(1~2mg/L,考染),加样(溴酚蓝-用来染色)。
解析: 暂无解析
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相似问题和答案

第1题:

中国古代用金装饰漆器,称作金漆,请列举用金装饰漆器有哪些方法和工艺,并对每种方法进行解释说明。


正确答案: 1.平脱:古代著名髹漆工艺技法,将金、银等薄片镶嵌在漆器上,表面再髹漆数层经加工磨制,器物表面依旧平齐。
2.金扣:在漆器口沿底部边缘,用金作箍,以加强牢固度和装饰,名“金扣”。该类漆器又称“扣器”。
3.戗金:在推光器或罩漆完成的漆器表面,采用特制的针或细雕刀,刻出较纤细的纹饰来,在刻划的花纹中上漆,然后填以泥金或金箔,花纹露出金色的阳文谓之戗金。

第2题:

中级分析工在样品交接中应注意()。

  • A、对样品进行编号
  • B、获取样品来源的详细信息,并记录
  • C、尽快对样品进行处理、测定
  • D、确定测试时间及方法

正确答案:B

第3题:

解释氮气置换,并简要说明为什么要在培养消化污泥之前进行氮气置换。


正确答案:所谓氮气置换,就是用氮气把消化池气相和气柜以及沼气管路中的空气用氮气置换出来。当空气中甲烷含量在5—15%(体积百分比)范围内时,遇明火或700℃以上的热源即发生爆炸。在消化池气相及沼气柜中,随着消化污泥的培养,甲烷从无到有,从低含量到高含量,中间必然经过5—15%这一区域,此时如果存在明火或700℃以上的热源即发生爆炸,造成安全事故,因此在培养消化污泥之前应进行氮气置换。

第4题:

试比较常规聚丙稀酰胺凝胶电泳与SDSPAGE的分离原理


正确答案: 由于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE.是多孔介质,不仅能防止对流,把扩散减少到最低;而且其孔径大小与生物大分子具有相似的数量级,能主动参与生物分子的分离,具有分子筛效应。因此,在使用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质分离时,在电泳过程中不仅取决于蛋白质的电荷密度,还取决于蛋白质的尺寸和形状。
SDS是一种阴离子去污剂,作为变性剂和助溶性试剂,能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级、三级结构;而强还原剂,如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。
因此,在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后,蛋白质分子被解聚为组成它们的多肽链,解聚后的氨基酸侧链与SDS结合后,形成带负电的蛋白质-SDS胶束,所带电荷远远超过了蛋白质原有的电荷量,消除了不同分子间的电荷差异;同时,蛋白质-SDS聚合体的形状也基本相同,这就消除了在电泳过程中分子形状对迁移率的影响。

第5题:

请列举四种最主要的法律解释方法,并对它们作一简要说明。


正确答案: 1、文理解释,包括文字解释、语法解释、逻辑解释,所以它又称为语义解释或文义解释。它是指按照法律条文用语的字义、文义及语言的通常使用方式和逻辑规律所作的解释。
2、论理解释,指斟酌法律理由,依一定的标准进行推理论证来确定和阐明法律本义的解释方法。
3、体系解释,依据法律条文在法律整体中的地位进行解释,即根据法律的编、章、节、款、项之前后关联位置以及相关法律条文之关系,阐明法律规范的意义。
4、效力解释,在解释时依据法律效力位阶之高低,寻找法律内在意义的高级效力依据,换言之,依效力位阶较高的法律规范来解释效力位阶较低的法律规范。

第6题:

对水稻种子送验样品进行分样,请简要说明适宜的分样方法及其注意事项?


正确答案: (1)最适宜采用的方法应为徒手减半分取法;
(2)分样时必须符合检验规程中规定的对分递减或随机抽取的原则;将两堆种子分成两半,每半再对分一次,这样得到四个部分。然后把其中每一部分再减半共分成八部分,排成两行,每行四个部分,这贯彻了对分递减原则;合并和保留交错部分,如第1行的第1和第3部分与第2行的第2和第4部分合并,这贯彻了随机抽取原则.

第7题:

简述样品预处理系统在使用过程中易堵塞的原因及处理方法。


正确答案: ①系统设计不当,易造成堵塞;粉尘、机械杂质多的样品采用多级过滤,加强维护;
②系统过滤部件不能满足样品过滤质量的要求;更换过滤部件;
③过滤器芯孔径太小;更换过滤芯
④过滤器未设置自清扫回路;改进。
⑤系统的各种阀件和有节流孔的部件孔径太小,而样品中固体颗粒大造成堵塞。增设过滤器,或在允许情况下扩大节流孔径。

第8题:

什么是暗适应?其形成的主要原因是什么,请解释为什么从事暗室工作的人员在进入光亮环境之前要戴上红色眼镜?
在黑暗中视觉的感受性逐渐递增的过程称为暗适应。暗适应形成的主要原因是视觉的二重功能作用,是在黑暗中由中央视觉转化为边缘视觉的结果。在黑暗中,视网膜边缘的杆状细胞的感受性逐渐提高,视觉能力也逐渐提高,杆状细胞含有视紫红质,它受到光的刺激时会被漂白,视觉功能受抑制,进入黑暗环境时,视紫红质重新合成。红光只对锥状细胞起作用,对杆状细胞不起作用,杆状细胞所含有的视紫红质不为红光所漂白,因此从事暗室工作的人员,进入光亮环境戴上红色眼镜,再次回到暗室时,不需要重新进行暗适应的过程。

第9题:

某BSC在进行GPRS开通时,在后台告警管理中发现GPRSNSVC断链告警,请结合自己工作实际分析一下可能导致故障的原因,并写出故障处理方法。


正确答案: 可能导致此故障的原因:
1.传输系统故障。
2.GIPP,TIC各中继单板故障。
3.EFRP/FRP单板故障。
4.GIPP至PUC的HW线故障或AB端插反。
5.BSS和SGSN侧的配置参数不一致,如BRCH配置的辅时隙号(即E1线上的辅时隙号)、NSEI、NSVCI和DLCI等参数。
6.SGSN侧故障导致问题的发生。
故障处理方法
链路故障需要先判断是不能建链还是正常建链后发生断链。
(1)不能建链的情况处理方法:
A.检查Gb口两端数据配置是否一致。
B.检查TIC单板是否有“信号丢失”告警,判断Gb传输系统是否发生故障。
C.通过OMCR查询PUC、EFPR/FRP,GIPP、TIC单板的告警信息,了解单板发生异常或故障的原因。
D.检查PUC、EFPR/FRP,GIPP、TIC单板间的外部连线是否牢固,例如GIPP和PUC之间的HW线是否正确接牢。
E.选择多个环点进行自环测试,确定是否是传输问题导致问题的发生。
(2)断链的情况处理方法
A.检查TIC单板是否有“信号丢失”告警,判断Gb传输系统是否发生故障。
B.通过OMCR查询PUC、EFPR/FRP,GIPP、TIC单板的告警信息,了解单板发生异常或故障的原因。
C.检查PUC、EFPR/FRP,GIPP、TIC单板间的外部连线是否牢固,例如GIPP和PUC之间的HW线是否正确接牢。

第10题:

结合SDSPAGE电泳的分离原理说明未知蛋白质分子量的测定方法。


正确答案: 1.SDS-PAGE的原理:SDS是一种阴离子去污剂,作为变性剂和助溶性试剂,能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级、三级结构;而强还原剂,如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。因此,在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后,蛋白质分子被解聚为组成它们的多肽链,解聚后的氨基酸侧链与SDS结合后,形成带负电的蛋白质-SDS胶束,所带电荷远远超过了蛋白质原有的电荷量,消除了不同分子间的电荷差异;同时,蛋白质-SDS聚合体的形状也基本相同,这就消除了在电泳过程中分子形状对迁移率的影响。
2.未知蛋白质分子量的测定:基于上述SDS-PAGE的原理介绍,我们可以利用SDS-PAGE电泳进行未知蛋白质的分子量测定;以不同分子量的标准蛋白进行SDS-PAGE电泳得到不同标准蛋白的电泳迁移率,制作标准校正曲线,然后对未知蛋白在相同条件下进行SDS-PAGE电泳,测定迁移率,从标准曲线得到相应的分子量;