名词解释题有机溶剂沉淀

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有机溶剂沉淀

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第1题：

常用的蛋白质沉淀法不包括（）

A、盐析法
B、有机溶剂沉淀
C、某些酸类沉淀
D、重金属盐沉淀
E、某些碱类沉淀

正确答案:E

第2题：

对于溶解度较大的沉淀，采用（）洗涤，可降低其溶解度。

A、蒸馏水
B、有机溶剂加缓冲溶液
C、沉淀剂加有机溶剂
D、热的电解质溶液

正确答案:C

第3题：

对溶解度较大的沉淀，采用沉淀剂加有机溶剂洗，可降低其溶解度。（）

正确答案:正确

第4题：

影响有机溶剂沉淀的因素有（）、（）、（）、（）和（）。

正确答案:温度；pH；样品浓度；中性盐浓度；金属离子

第5题：

有机溶剂沉淀

正确答案:在溶液中加入极性有机溶剂，使溶质从溶液中沉淀析出，这种方法称为有机溶剂沉淀。

第6题：

有机溶剂沉淀法中使用的有机溶剂多为甲醛或丙酮。（　）

正确答案:错误

第7题：

有机溶剂分级沉淀

正确答案:有机溶剂分级沉淀：利用生物大分子在不同浓度的有机溶剂中的溶解度差异而分离的方法，称为有机溶剂分级沉淀法。

第8题：

常用的有机溶剂蛋白沉淀剂有（）、（）。

正确答案:甲醇；乙腈

第9题：

简述有机溶剂沉淀法中有机溶剂的选择要求。

正确答案: 1.溶剂的选择要求：
（1）介电常数小。
（2）对生物分子变性小。
（3）毒性小、挥发性适中。
（4）能与水无限混溶。
2.常用的溶剂：
乙醇：具有上述的特点；
丙酮：沉淀作用大于乙醇，时可减少1／4～1／3，但是沸点比乙醇低，对肝脏有一定的毒害作用。着火点低；
甲醇：沉淀作用与乙醇相当，但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮小，由于口服毒性大，限制其使用；
其他：二甲基亚砜、乙睛、二甲基甲酰胺。

第10题：

常用的蛋白质沉淀方法有哪些？有机溶剂沉淀蛋白质的机理什么？用乙醇沉淀蛋白质时应注意哪些事项？

正确答案: ①常用的蛋白质沉淀方法有：
蛋白质盐析沉淀、蛋白质等电点沉淀、有机溶剂沉淀法及运用沉淀动力学沉淀法等。
②有机溶剂沉淀蛋白质的机理是：
向蛋白质溶液中加入有机溶剂，水的活度降低。随着有机溶剂溶度的增大，水对蛋白质分子表面荷电基团的水化程度降低，液体的介电常数下降，蛋白质分子间的静电引力增大，从而凝聚和沉淀。
③用乙醇沉淀蛋白质时应注意的事项：
1、低温条件下操作可以提高收率和减少蛋白质失活变性（加入有机溶剂为放热反应）；
2、采用的有机溶剂必须与水互溶，与蛋白质不发生作用；
3、蛋白质分子量越大，需要加入的溶剂量越少；
4、一种蛋白质的溶解度常会因为另一种蛋白质存在而降低；
5、沉淀的蛋白如果不能再被溶解，可能已经变性；
6、很多酶和蛋白质在20-50%（V/V）就能产生沉淀；当溶剂量达到50%时，通常只有分子量≤1500的蛋白留在溶液中；
7、PH=PI时，需要加入的溶剂量减少；
8、盐析法沉淀的蛋白质采用有机溶剂精制时必须与先进行透析。

有机溶剂沉淀

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