简述蛋白质类药物的分离纯化方法?

题目
问答题
简述蛋白质类药物的分离纯化方法?
参考答案和解析
正确答案: ①沉淀法
②按分子大小分离的方法
③按分子所带电荷进行分离的方法
④亲和层析法
解析: 暂无解析
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相似问题和答案

第1题:

简述生物活性物质分离纯化方法的主要原理。


正确答案:一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中,如盐析,有机溶剂提取,层析和结晶等;二是将混合物置于单一物相中,通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的,如电泳,超速离心,超滤等。

第2题:

盐析法适用于蛋白质类药物的分离纯化。


正确答案:正确

第3题:

蛋白质类药物分离提取方法有哪些?


参考答案:(1)沉淀法(盐析、有机溶剂、等电点);
(2)按分子大小分离(超滤、透析、层析、离心);
(3)电荷(离子交换、层析、电泳、等电聚焦);
(4)亲和层析法(酶与底物、抗原与抗体、激素与受体)。

第4题:

常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种?各自的原理是什么?


正确答案: 1、沉淀:向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液,可使蛋白质的溶解度降低,而从溶液中析出。
2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
4、层析:A.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定pH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。B.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出。
5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质,也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质因其密度与形态各不相同而分开。

第5题:

以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质,在选择分离纯化方法时应注意哪些问题?


正确答案:(1)根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质;
(2)根据蛋白质分子形状和大小的不同来纯化蛋白质;
(3)根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋白质;
(4)根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质;
(5)根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质;
(6)根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来纯化蛋白质;
(7)根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白质;
(8)根据蛋白质选择性吸附性质来纯化蛋白质;
(9)根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化。

第6题:

简述蛋白质分离纯化的一般程序。


正确答案:首先根据所需蛋白质的性质选取生物体组织细胞作为材料,对所选材料进行细胞破碎、离心等前期处理,获得粗提蛋白质溶液。其次利用蛋白质溶解度的差异对蛋白质进行盐析,使其与杂蛋白分离开来,称为蛋白质的粗分离,再次根据蛋白质的分子大小及形状、电离性质、生物学功能的差异选用凝胶过滤层析、离子交换层析、电泳法、亲和层析等方法进行细分离,可得到较纯的蛋白质,此为蛋白质分离纯化的一般程序。

第7题:

比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。


正确答案:凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术,但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开,具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱,小分子的蛋白质进入凝胶孔内,大分子的蛋白质留在外面,然后用洗脱液洗脱,蛋白质依分子大小被洗脱,然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质,具体操作是将样品装入透析袋,然后利用高压或离心力,迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜,蛋白质留在透析袋内。

第8题:

主要用于蛋白质分离纯化的方法是( )


正确答案:A

第9题:

试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。


正确答案: 串联亲和纯化(TAP),用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用,通过嵌入一段蛋白质标记,在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记,这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上,使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当,避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化,在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来,这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
方法及步骤:
(1)蛋白质标记:由蛋白A的IgG结合区(ProtA)和钙调蛋白结合区(CBP)构成,中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开;
(2)构建表达标记蛋白的细胞或组织:将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位;
(3)细胞抽提物的准备;
(4)串联亲和纯化;
(5)蛋白质复合体的鉴定。

第10题:

简述蛋白质类药物的分离纯化方法?


正确答案: ①沉淀法
②按分子大小分离的方法
③按分子所带电荷进行分离的方法
④亲和层析法