问答题在原核细胞中高效表达真核细胞的基因要注意哪些问题？

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在原核细胞中高效表达真核细胞的基因要注意哪些问题？

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第1题：

在分子克隆中，目的DNA可来自
A.原核细胞基因组B.真核细胞基因组DNA
C. PCR合成的DNA D.真核细胞mRNA反转录获得的cDNA

答案：A,B,C,D

解析：

应用重组技术有时是为了分离、获得某一感兴趣的基因或目的DNA序列，或是为了获得感兴趣的表达产物蛋白质.这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的DNA。目的的获取有以下几种途径：①化学合成法：如已知某种基因的核苷酸序列,可利用合成仪通过化学合成原理合成目的 DNA。②基因组DNA：包括原核生物基因组DNA和真核生物基因组DNA。③应用PCR合成DNA。④ cDNA：以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA.互补的DNA(cDNA)。

第2题：

真核细胞基因组中的基因常有内含子存在，能否在原核细胞中表达？为什么？

正确答案: 不能，因为原核细胞缺乏对真核基因中内含子的剪接功能和转录后加工系统。原核生物必须有相应的原核RNA聚合酶可识别原核细胞的启动子催化RNA的合成。
基因表达是以操纵子为单位，操纵子由数个相关的结构基因和调控功能的部位组成的。因此在构建原核表达载体时必须有1个强的原核启动子及其两侧的调控序列。

第3题：

真核细胞参与基因表达调节的调控区比原核细胞复杂是因为()

A、真核细胞的细胞核具有双层膜

B、原核细胞的基因总是以操纵子的形式存在的

C、原核细胞调节基因表达主要是在翻译水平

D、真核细胞基因组含有太多的重复序列

E、真核细胞需要控制细胞特异性的基因表达

参考答案：E

第4题：

原核细胞与真核细胞相比较，原核细胞具有（）

A、基因中的内含子
B、DNA复制的明显周期性
C、以操纵子方式进行基因表达的调控
D、转录后与翻译后大分子的加工与修饰

正确答案:C

第5题：

原核细胞与真核细胞的不同，表现在（）。

A、原核细胞基因组的大小仅有真核生物基因组大小的一半
B、原核细胞具有单链的DNA分子
C、原核细胞中与DNA结合的蛋白质较少，而且没有核膜包裹
D、原核细胞具有RNA而不是DNA

正确答案:C

第6题：

基因文库中的所有基因

A.都可以在大肠杆菌中正确表达
B.不能用真核细胞表达
C.只有cDNA文库中的基因可用大肠杆菌表达
D.只有基因组文库中的基因可用大肠杆菌表达

答案：C

解析：

第7题：

在大肠杆菌表达系统中表达真核细胞基因，目的基因必须是基因组DNA。

正确答案:错误

第8题：

在分子克隆中，目的DNA可来自

A．原核细胞基因组DNA

B．真核细胞基因组DNA

C．PCR合成的DNA

D．真核细胞mRNA反转录获得的cDNA

正确答案：ABCD
解析：应用重组DNA技术有时是为了分离、获得某一感兴趣的基因或目的DNA序列，或是为了获得感兴趣的表达产物蛋白质。这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的DNA。目的DNA的获取有以下几种途径：①化学合成法：如已知某种基因的核苷酸序列，可利用DNA合成仪通过化学合成原理合成目的DNA。②基因组DNA：包括原核生物基因组DNA和真核生物基因组DNA。③应用PCR合成DNA。④cDNA：以mRNA为模板，利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA(cDNA)。

第9题：

简述真核细胞与原核细胞基因的不同结构特征，阐明由此造成的不同转录后加工过程。

正确答案:真核生物的基因结构由单顺反子构成，具有内含子和较多的重复序列。转录和翻译分别在细胞质和细胞核中进行。原核生物的基因结构是由多顺反子组成，无内含子，重复序列较少。因此真核生物进行转录后的加工需要在mRNA5′端加帽子和3′端加poly（A）尾巴，以保持mRNA的稳定性。同时，还要进行RNA的剪接和修饰以切除内含子。而原核生物的多顺反子多形成一个操纵子，完成各项功能。其转录和翻译是紧密连接的，不需要进行加尾和加冒的过程，由于没有内含子，也无需剪接步骤。

第10题：

真核细胞的表达与原核细胞相比复杂的多，能在（）、（）、（）、（）和（）等多种层次上进行调控。

正确答案:转录前水平；转录水平；转录后水平；翻译水平；翻译后水平

在原核细胞中高效表达真核细胞的基因要注意哪些问题？

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