简述单克隆抗体制备大步骤。

题目
问答题
简述单克隆抗体制备大步骤。
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相似问题和答案

第1题:

请简述色漆的制备步骤。


正确答案: 第一步在研磨设备中分散颜料;第二步调稀(或兑稀),即分散过程完成后,加入树脂溶液或溶剂来降低色浆的稠度,使它能从研磨设备中尽可能地放干净;第三步调漆,即将色漆配方中所有物料在调漆桶中凋匀。

第2题:

请简述果孢子液的制备的步骤和投放密度的含义。


正确答案: 阴干的种菜+海水→检查放散量→筛绢网或纱布过滤→果孢子液;
果孢子液的浓度:果孢子液取1mL,稀释到100mL,取50uL计数;
投放密度:指单位面积的贝壳上投放的果孢子数目。

第3题:

简述单克隆抗体的制备原理。


正确答案:B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力,又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力,将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。

第4题:

什么是单克隆抗体?简述制备步骤。


正确答案: 单克隆抗体是指由一纯系B淋巴细胞克隆,经分化、增殖后的浆细胞所产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白分子。步骤:
①选择亲本细胞株。骨髓瘤细胞必须选用HGPRT酶缺陷型,因为它们不能在HAT培养基上生长。B细胞是用绵羊红细胞免疫小白鼠,在脾脏内形成激活的B淋巴细胞后,再取脾,制成B细胞悬液。
②混合双亲细胞。将上述两种细胞以合适比例混合。
③促进细胞融合。可用PEG或仙台病毒促融。
④淘汰未融合细胞。处理后的细胞分装在塑料板微孔内,在HAT选择性培养液中培养,未融合的细胞因不能合成核酸死亡,存活者为融合细胞,经产物鉴定后,留下优良的单克隆抗体生产株。
⑤杂交瘤细胞的扩大培养。可通过注射入动物体内增殖,也可在组织培养瓶或细胞培养罐内做扩大培养。

第5题:

简述光谱试样的制备步骤。


正确答案:用切割机将试样从2/3处截取,冷却后,用60-80目砂轮片在磨样机上磨制,磨下量不得小于15mm,研磨面顺纹路呈一个平面并无气孔、裂纹、夹杂、空壳,加铝量不得大于0.3%,表面无油迹,不沾水,分析前不得用手触摸磨光面的合格试样,交光谱操作人员分析。

第6题:

固体催化剂制备包括哪三大步骤?


正确答案: 选择原料与配料、制备催化剂的母体、活化成型

第7题:

大量制备单克隆抗体的方法主要有______________、__________________。


正确答案:动物体内诱生方法;体外培养法

第8题:

什么是单克隆抗体?简述制备过程。


参考答案:经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体,是单克隆抗体。
单抗的制作过程大体分为抗原的制备,动物的免疫,b细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,筛选杂交瘤细胞,筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的克隆化,体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆,单抗的纯化及鉴定。

第9题:

运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是() ①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ⑥大量培养杂交瘤细胞 ⑦诱导细胞融合 ⑧单克隆抗体的大量制备

  • A、②④③⑦⑤①⑥⑧
  • B、②③④⑦①⑤⑥⑧
  • C、④③⑦②⑤①⑧⑥
  • D、③④⑦①⑤⑧⑥②

正确答案:B

第10题:

简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。


正确答案: 1.亲本细胞的准备(致敏B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备)
2.细胞融合形成杂交瘤细胞
3.杂交瘤细胞的筛选(采用HAT(含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤A.和胸腺嘧啶核苷(T))选择性培养基)
4.可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选:对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测,筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞。检测方法:放射免疫测定、酶联免疫技术测定等
5.杂交瘤细胞的克隆化培养:有限稀释法或软琼脂平板法66、最常用的杂交瘤细胞杂交瘤细胞克隆方法有那些?(有限稀释法或软琼脂平板法)