用 EcoRI和 HindⅢ分别切割同一来源的染色体 DNA,并进行克隆,在前者的克隆中筛选到 A基因,但在后者的克隆中

题目
问答题
用 EcoRI和 HindⅢ分别切割同一来源的染色体 DNA,并进行克隆,在前者的克隆中筛选到 A基因,但在后者的克隆中未筛选到 A基因,请说明原因。
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第1题:

应用于DNA克隆中的核酸限制性内切酶是

A.I型
B.Ⅱ型
C.Ⅲ型
D.以上都可以

答案:B
解析:

第2题:

Klenow片段的主要用途有()。

  • A、补齐双链DNA的3ˊ末端。
  • B、通过补齐3ˊ端,标记3ˊ末端。
  • C、在cDNA克隆中,第二股链的合成。
  • D、DNA序列分析
  • E、平端连接

正确答案:A,B,C,D

第3题:

在分子克隆中,目的DNA可来自

A.原核细胞基因组DNA

B.真核细胞基因组DNA

C.PCR合成的DNA

D.真核细胞mRNA反转录获得的cDNA


正确答案:ABCD
解析:应用重组DNA技术有时是为了分离、获得某一感兴趣的基因或目的DNA序列,或是为了获得感兴趣的表达产物蛋白质。这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的DNA。目的DNA的获取有以下几种途径:①化学合成法:如已知某种基因的核苷酸序列,可利用DNA合成仪通过化学合成原理合成目的DNA。②基因组DNA:包括原核生物基因组DNA和真核生物基因组DNA。③应用PCR合成DNA。④cDNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA(cDNA)。

第4题:

在基因克隆中碱性磷酸单酯酶的主要用途有:在用P标记DNA5′端之前,();在DNA重组技术中,去除DNA片段的(),可防止酶切后的载体的()与()。


正确答案:去除5′端的磷;5′磷酸集团;自身连接;环化

第5题:

下列关于有丝分裂和减数分裂的比较,正确的是()。

  • A、前者与后者不同.前者各时期细胞中均不含同源染色体
  • B、后者分裂过程中有联会现象和四分体.而前者没有
  • C、前者仅有等位基因的分离,后者还有基因的自由组合
  • D、分裂时前者DNA平均分配.而后者DNA为随机分配

正确答案:B

第6题:

在分子克隆中,目的DNA可来自
A.原核细胞基因组B.真核细胞基因组DNA
C. PCR合成的DNA D.真核细胞mRNA反转录获得的cDNA


答案:A,B,C,D
解析:
应用重组技术有时是为了分离、获得某一感兴趣的基因或目的DNA序列,或是为了获得 感兴趣的表达产物蛋白质.这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的DNA。目的的获取有以下几 种途径:①化学合成法:如已知某种基因的核苷酸序列,可利用合成仪通过化学合成原理合成目的 DNA。②基因组DNA:包括原核生物基因组DNA和真核生物基因组DNA。③应用PCR合成DNA。④ cDNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA.互补的DNA(cDNA)。

第7题:

碱性磷酸酶在基因克隆中的作用。


正确答案:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase)能去除DNA或RNA5ˊ端的磷酸根。制备载体时,用碱性磷酸酶处理后,可防止载体自身环化,提高重组效率。

第8题:

下列可在基因克隆中生成的物质是

A、小鼠基因组CNE
B、酵母基因组CNE
C、质粒CNE
D、组织活细胞中直接提取
E、人类基因组CNE

答案:C
解析:
克隆是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆是指由一个祖先分子复制生成的和祖先分子完全相同的分子群,发生在基因水平上的分子克隆称基因克隆(CNE克隆)。其基本原理是:将编码某一多肽或蛋白质的基因(外源基因)组装到细菌质粒(质粒是细菌染色体外的双链环状CNE分子)中,再将这种质粒(重组质粒)转入大肠杆菌体内,这样重组质粒就随大肠杆菌的增殖而复制,从而表达出外源基因编码的相应多肽或蛋白质。由于质粒具有不相容性,即同一类群的不同质粒常不能在同一菌株内稳定共存,当细胞分裂时就会分别进入到不同的子代细胞中,所以来源于一个菌株的质粒是一个分子克隆,而随质粒复制出的外源基因也就是一个分子克隆。

第9题:

在基因克隆中常用的载体有质粒、柯斯质粒等4种,按载体所能克隆的外源DNA片段的大小,其从大到小的顺序是()、()、()、()。


正确答案:YAC载体;柯斯质粒;噬菌体载体;质粒

第10题:

基因克隆中常用的限制性内切酶是()。

  • A、I型
  • B、II型
  • C、III型
  • D、I型和II型
  • E、I型和III型

正确答案:B

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