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大肠杆菌中高效表达蛋白药物着重设计哪几个方面？ 

题目
问答题
大肠杆菌中高效表达蛋白药物着重设计哪几个方面？
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相似问题和答案

第1题：

在男西服的设计中，其设计要点主要表现在哪几个方面？


正确答案: （1）主体线条：西服的造型结构大致是基本定型、自然型、梯型、V型、长方型；
（2）型：自然肩、平肩；
（3）领子：驳头门襟；
（4）袖型；
（5）袋型；
（6）后背；
（7）背心；
（8）缉明线、钮扣；
（9）面料选用。

第2题：

应着重从哪几个方面加强体育课的管理？


正确答案: 第一，抓好体育课的教学工作计划：学校领导要认真贯彻执行国家颁发的课程计划和课程标准，要结合学校的实际情况，制定各年级学生和学期的体育课的教学工作计划。
第二，建立体育课教学的课堂常规：建立体育教学的课堂常规，不仅能保证体育课的良好秩序，使教学正常进行，而且有助于培养学生的组织纪律性和讲文明、懂礼貌等道德品质。
第三，突出体育课的教学质量管理。
第四，加强心理教育健康管理：心理健康教育是学校体育工作的重要内容之一，对此要加强管理。
第五，做好对体育课的考核和总结：对学生体育成绩应根据课程标准的要求，结合学校实际建立严格的考勤和考核制度。学年结束后，体育教师和教研组都要写出工作总结，以便肯定成绩，提出问题，探索体育教学规律。

第3题：

影响外源基因在大肠杆菌中高效表达的因素有哪些?


答案：
解析：
(1)启动子的强弱(2分);(2)基因的剂量(2分);(3)影响RNA转录和翻译效率的因素:SD序列mRNA(2分);(4)外源基因密码子的选择(2分);(5)表达产物的大小和稳定性(2分,以上五点均需进-步展开)。

第4题：

小麦返青期在管理上应着重哪几个方面？


正确答案: 一是搂麦松土，提高地温；二是根据苗情，适当追肥浇水，增穗长大穗；三是防治病虫害。

第5题：

如何实现真核生物一蛋白基因在大肠杆菌细胞中受控、稳定、分泌和高效表达。


正确答案: 大肠杆菌是高效表达异源蛋白最常用的原核表达系统。由于每种基因都有其独特的结构、mRNA的稳定性和翻译效率、蛋白质折叠的难易程度，修主细胞蛋白酶对蛋白质的降解等等原因，因此并非每一种基因都能在大肠杆菌中有效表达。下面浅谈一下实现真核生物一蛋白基因在大肠杆菌细胞中受控、稳定、分泌和高效表达的策略。
首先，要构建有效的表达载体，一种高效的原核表达载体需要包括一个强大并且可以严紧调节的启动子；一位于翻译起始密码子5’端大约9bp的SD序列；位于目的基因3’末端的一个高效转录终止子。除此之外，载体还需要一个复制起点，筛选标记和利于对启动子活性进行严紧调节的基因。这种调节元件可以插入载体自身，也可以插入宿主的染色体。其他的元件包括转录和翻译增强子等。这些元件的作用往往具有基因特异性，因此要根据不同的情况加以取舍。构建表达载体，需要仔细考虑多种元件的组合，以保证最高水平的蛋白质合成。
a、提高转录水平调控的策略
（1）选择的启动子要具有适合高水平蛋白质合成的某些特性。首先启动子的作用要强；第二，它必须表现最低水平的基础转录活性。若要求高效的基因表达，最好选用高密度培养细胞和表现最低活性的可诱导和非抑制启动子。
（2）现在已鉴定了一些在E.coli中显著增强异源基因表达的序列，有可能利用增强子来达到超量表达蛋白质的目的。（3）虽然转录终止子在表达质粒的构建过程中常被忽略，但有效的转录终止子是表达载体必不可少的元件。
b、提高翻译水平调控的策略  
（1）mRNA5’末端的独特结构是mRNA翻译起始效率的最主要决定因素，因此找到通用的有效起始翻译的共同序列能高效起始外源蛋白的翻译。
（2）SD与起始密码子间的距离约为5-13bp，这一距离影响翻译起始的效率，因此在设计载体中要控制好这段距离。（3）在mRNA的翻译起始区的二级结构在决定基因表达效率方面具有重要作用，使用一些策略使mRNA形成二级结构的可能性最小。
（4）mRNA的快速降解势必影响蛋白质的产生，比如可以通过选用缺乏某些特定RNase如RNaseII或PNPase的宿主菌来提高基因的表达，这将在E.coli高效表达外源基因中有很大作用。
（5）在mRNA中存在终止信号是翻译终止过程必不可少的，在设计表达载体时，通常插入三个终止密码子以防止核糖体的跳跃，在E.coli中偏向于使用UAA密码子。
c、维护真核生物蛋白基因在大肠杆菌细胞稳定性和减少E.coli中重组蛋白裂解的策略
（1）将蛋白质靶向细胞周质或培养基
（2）在较低的温度下培养细菌
（3）选用蛋白酶缺陷的菌株
（4）构建N-末端或C-末端融合蛋白；融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白，为E.coli中高效表达和纯化重组蛋白提供了极大方便。
（5）将目的基因多拷贝串联
（6）与分子伴侣共表达
（7）替换特定的氨基酸残基以消除蛋白酶裂解位点
（8）改善蛋白质的亲水性
（9）优化培养条件，E.coli中的蛋白质产量可以通过高细胞密度培养系统而获得显著提高，
d、提高真核生物蛋白基因在大肠杆菌细胞分泌的策略 
（1）将蛋白质分泌到细胞外是人们最期望的一种策略。因为这样容易纯化目的蛋白质，减少细菌的蛋白酶对目的蛋白质的裂解。但是，E.coli在正常情况下只有很少量的蛋白质分泌到细胞外。在大肠杆菌表达系统中，金黄色葡萄球菌A蛋白的信号肽能引导带有E结构域的A蛋白片段或融合产物从细胞质外泌到培养基中，如果能利用可控的强启动子进行A蛋白信号肽引导的基因表达，则有望在蛋白质外泌方面有所突破。
（2）对培养基的特殊操作能明显提高蛋白质释放到培养基中。例如，在培养基中添加甘氨酸能增强外周质蛋白释放到培养基中，且不引起明显的细菌裂解。
质粒的构建，SD序列，信号肽，糖基化，启动子

第6题：

胡锦涛总书记强调在开展学习实践活动中要着重从哪几个方面做出不懈努力？


正确答案: 第一，进一步深刻理解贯彻落实科学发展观的重大意义；
第二，进一步抓好发展这个党执政兴国的第一要务；
第三，进一步实现好、维护好、发展好最广大人民的根本利益；
第四，进一步坚持解放思想、改革创新；
第五，进一步提高党员干部队伍素质。
第六，进一步动员广大人民群众投身科学发展的伟大实践。

第7题：

高效课堂教学系统元素包括哪几个方面。


正确答案:包括目标、理念、主张、原则、机制、组织、流程、模式、评价等九个方面。

第8题：

用大肠杆菌作宿主表达重组DNA药物，缺点是（）。

  • A、蛋白质表达量低
  • B、生长慢
  • C、产物无糖基修饰
  • D、难以获得工程菌

正确答案:C

第9题：

你认为福彩投注站的优质高效服务主要表现在哪几个方面？


正确答案: 一、热爱福彩事业，有奉献精神。
二、精通彩票业务才能做好彩票销售工作。
三、语言文明，以礼相待。
四、耐心细致，赢得彩民理解。
五、诚信赢得彩民心。

第10题：

在线调研表设计中容易出现以下哪几个方面的问题（）。

  • A、调研内容单一
  • B、语言表达不清晰
  • C、遗漏重要问题选项
  • D、收集被调研者的个人信息过于集中

正确答案:B,C

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