简述核酸杂交的原理及原位杂交的应用价值?

题目
问答题
简述核酸杂交的原理及原位杂交的应用价值?
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相似问题和答案

第1题:

将标记的核酸探针直接与细胞或组织中的核酸进行杂交的方法是(  )。

A.斑点杂交
B.原位杂交
C.Southern印记杂交
D.Northern印记杂交

答案:B
解析:
所谓原位杂交,是指将特定标记的已知顺序的核酸作为探针与细胞或组织切片中的核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行,可以在杂交后直接看出核酸分布,无需提取核酸,因此叫作原位杂交。

第2题:

核酸原位杂交是()

  • A、核酸分子杂交技术与组织细胞化学和免疫组织化学结合起来的一种杂交方法
  • B、基本原理及探针的标记方法与传统核酸分子杂交技术相同
  • C、不能确定与探针互补的核酸序列在细胞内的空间位置
  • D、不需要将核酸从细胞中提取出来

正确答案:A,B,D

第3题:

根据反应介质的不同,核酸分子杂交分为()

A.反向点杂交

B.液相杂交

C.原位杂交

D.固相杂交


正确答案:BCD

第4题:

何谓原位杂交?原位杂交技术可应用于哪些方面?


正确答案:原位杂交(ISH)是核酸分子杂交的一部分,是将组织化学与分子生物学技术相结合起来检测和定位核酸的技术。
原位杂交可应用于:
1.细胞特异性mRNA转录的定位可用于基因图谱、基因表达和基因组进化的研究。
2.感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测。
3.癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。
4.基因在染色体上的定位。
5.检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。
6.分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些肿瘤的诊断和生物学剂量测定等。

第5题:

核酸探针技术是最早运用到临床实践中的分子生物学技术,其原理是选择某一组病原体特异的基因序列,进行克隆、合成,然后用作探针,探针与临床标本中的靶DNA或靶RNA杂交,核酸探针与靶核酸互补序列的结合有高度特异性,可在种或高于或低于种的水平鉴定病原体。常用核酸探针杂交方式中反应速度最快的是()

  • A、固相-液相杂交
  • B、原位杂交
  • C、液相-液相杂交
  • D、液相-固相杂交
  • E、荧光原位杂交

正确答案:C

第6题:

荧光原位杂交的特点及应用包括哪些?


正确答案: (1)其探针比放射性探针更稳定,不需要特殊的安全防护和污物处理措施;
(2)与原位杂交一样,不需要提取和纯化核酸;
(3)多色FISH可以在同一核中显示不同的颜色,从而同时检测两种或多种序列;
(4)应用不同的探针可以显示某一物种的全部基因或某一染色体、染色体片段及单拷贝序列。

第7题:

简述原位杂交在临床中的应用。


正确答案:原位杂交技术可以通过标记的探针与分裂中期染色体DNA杂交来精确定位特定核苷酸序列在染色体上的位置;与细胞RNA杂交可观察组织细胞中特定基因的表达水平;还可用特异性的细菌或病毒的核酸序列作为探针与组织、细胞杂交,以确定有无病原体的感染等。原位杂交能在成分复杂的组织中对单一细胞进行研究,不受同一组织中其它成分的影响,因此对于那些细胞数量少且散在于其它组织中的细胞内DNA或RNA的研究更为方便。此外,原位杂交不需要从组织中提取核酸,有利于检测组织中含量极低的靶序列,并可完整地保持组织和细胞的形态,更能准确地反应出组织细胞的相互关系及功能状态。举例:原位杂交检测上皮细胞中人乳头状瘤病毒(HPV)DNA。

第8题:

特定标记的核酸探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,并对其实行检测的方法称为( )。

A、原位杂交

B、狭槽杂交

C、斑点杂交

D、Southern杂交

E、Northern杂交


正确答案:A

第9题:

比较免疫细胞化学术和原位杂交术的基本原理和应用意义。


正确答案: (1)免疫细胞化学术是应用抗原和抗体结合的免疫学原理,检测细胞内的多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布;
(2)原位杂交是应用核酸分子互补原理,即两条单链核酸分子的碱基序列是互补的,用已知碱基序列并具有标记物的RNA和DNA片段,即核酸探针(probE.,与组织切片中的细胞内待测核酸(RNA或DNA片段)进行杂交,通过标记物的显示,可观察到细胞内被检测的mRNA和DNA的存在和分布。

第10题:

简述核酸杂交的原理及原位杂交的应用价值?


正确答案:核酸杂交技术是分子生物学研究的重要方法之一,是根据核酸碱基互补的原则,用特定已知顺序的核苷酸片段,作为探针,经特殊的标记后,与提纯或组织细胞中的靶核酸进行杂交,对其进行检测。目前病理学中常用的几种方法为Southernblot(转印)杂交,Northerblot杂交及斑点杂交(Dotblot)和原位杂交(instiu-hybridization)。原位杂交的特异性及敏感性很高,因此得到广泛的应用,其中包括检测肿瘤组织中癌基因,抗癌基因的表达,以判断其预后;检测胚胎组织中特异的病原微生物核酸片段,以确定病原及其在某些疾病中的作用机制等。