问答题基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？

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基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？

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第1题：

获得目的基因的方法有（）

A、从基因文库中获得目的基因
B、通过反转录获得cDNA
C、PCR获得
D、人工化学合成
E、改造旧基因

正确答案:A,B,C,D,E

第2题：

下列哪项不是分子克隆的主要步骤（）

A、目的基因的表达
B、基因文库的建立
C、目的基因的筛选
D、目的基因的分析

正确答案:A

第3题：

基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？

正确答案: （1）从基因组文库（genomic library）中获得；
（2）从cDNA文库中获得；
（3）PCR扩增特定基因；
（4）人工合成。

第4题：

分离目的基因的途径有哪些？

正确答案:（1）酶切法
（2）PCR法
（3）化学合成法
（4）基因组或cDNA文库法

第5题：

在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段？

正确答案: 从供体细胞（主要是原核微生物）提取染色体DNA构建基因库，再筛选出基因克隆，或通过PCR扩增出目的基因的DNA片断。从供体细胞（主要是真核生物）提取总RNA（或总mRNA.然后逆转录为cDNA，构建cDNA库，筛选出cDNA克隆或通过RT-PCR扩增出目的基因的cDNA。用化学合成法合成目的基因。

第6题：

获得动物目的基因的方法有哪些？

正确答案: ①cDNA方法；
②DNA的化学合成；
③利用PCR法获得基因，除了用到普通PCR法外，还要用到逆转录PCR、锚定PCR和反向PCR。

第7题：

链霉菌基因克隆的基本步骤有哪些？

正确答案: 链霉菌基因克隆的基本步骤：
（1）制备供体DNA片段；
（2）制备载体DNA；
（3）连接载体和供体DNA片段；
（4）将受体菌制成原生质体；
（5）将连接了供体DNA片段的载体对受体菌的原生质体进行转化；
（6）让原生质体再生细胞壁，随后对转化的细胞进行选择。

第8题：

关于基因操作中目的基因的描述，错误的是（）。

A、研究的目标基因
B、需要研究其功能的基因
C、需要克隆的基因
D、需要表达的基因
E、有重要功能的基因

正确答案:E

第9题：

获得目的基因的手段有哪些？并简述其工作原理.

正确答案: 目的基因的获取方法有：从基因文库中提取目的基因，使用PCR扩增技术获得目的基因，人工合成。
①从基因文库中获取：用限制性内切酶直接获取
②鸟枪法：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。
③mRNA逆转录成DNA，“RT-PCR法”
真核生物的基因含有不表达的内含子，而有时内含子序列很长，因此这种基因难以和载体DNA结合。这种方法是将含有目的基因的mRNA提取出来，然后以mRNA为模板用，用逆转录酶合成cDNA，利用特异性引物PCR钓取目的基因，最后测序验证。
④人工合成：根据已知氨基酸序列合成DNA
根据基因表达产物的氨基酸顺序，搞清楚基因的核苷酸序列，然后先合成一个个含少量核苷酸的DNA片段，再利用碱基对互补关系使它们形成双链DNA片段，再用连接酶把小的双链DNA片段逐个按顺序连接起来，使双链逐渐加长，最后得到一个完整基因。

第10题：

目的基因克隆的基本方法有哪些？

正确答案: （1）直接从染色体DNA中分离：
仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。
（2）人工合成：
根据已知多肽链的氨基酸顺序，利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。
（3）从mRNA合成cDNA：
采用一定的方法钓取特定基因的mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补DNA（cDNA），除去RNA链后，再用DNA聚合酶合成其互补DNA链，从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。
（4）利用PCR合成：
如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应（polymerase chainreaction，PCR）技术，在体外合成目的基因。
（5）从基因文库中筛选：
首先建立基因组或cDNA文库，利用探针从文库中筛选目的克隆。

基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？

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