遗传工程小鼠是让已知的结构基因在动物个体中得到表达,并能够稳定遗

题目

遗传工程小鼠是让已知的结构基因在动物个体中得到表达,并能够稳定遗传给其后代的一类动物。

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相似问题和答案

第1题:

外援基因在动物细胞与大肠杆菌中表达的主要区别是什么?


参考答案:糖基化。

第2题:

先天性NK细胞功能缺陷动物是()。

  • A、KM小鼠
  • B、CBA/N小鼠
  • C、裸小鼠
  • D、Beige小鼠

正确答案:D

第3题:

下列方法不适用于衣原体的分离的是

A、培养基分离

B、细胞培养

C、鸡胚培养

D、动物接种

E、小鼠分离


参考答案:A

第4题:

如何实现真核生物一蛋白基因在大肠杆菌细胞中受控、稳定、分泌和高效表达。


正确答案: 大肠杆菌是高效表达异源蛋白最常用的原核表达系统。由于每种基因都有其独特的结构、mRNA的稳定性和翻译效率、蛋白质折叠的难易程度,修主细胞蛋白酶对蛋白质的降解等等原因,因此并非每一种基因都能在大肠杆菌中有效表达。下面浅谈一下实现真核生物一蛋白基因在大肠杆菌细胞中受控、稳定、分泌和高效表达的策略。
首先,要构建有效的表达载体,一种高效的原核表达载体需要包括一个强大并且可以严紧调节的启动子;一位于翻译起始密码子5’端大约9bp的SD序列;位于目的基因3’末端的一个高效转录终止子。除此之外,载体还需要一个复制起点,筛选标记和利于对启动子活性进行严紧调节的基因。这种调节元件可以插入载体自身,也可以插入宿主的染色体。其他的元件包括转录和翻译增强子等。这些元件的作用往往具有基因特异性,因此要根据不同的情况加以取舍。构建表达载体,需要仔细考虑多种元件的组合,以保证最高水平的蛋白质合成。
a、提高转录水平调控的策略
(1)选择的启动子要具有适合高水平蛋白质合成的某些特性。首先启动子的作用要强;第二,它必须表现最低水平的基础转录活性。若要求高效的基因表达,最好选用高密度培养细胞和表现最低活性的可诱导和非抑制启动子。
(2)现在已鉴定了一些在E.coli中显著增强异源基因表达的序列,有可能利用增强子来达到超量表达蛋白质的目的。(3)虽然转录终止子在表达质粒的构建过程中常被忽略,但有效的转录终止子是表达载体必不可少的元件。
b、提高翻译水平调控的策略  
(1)mRNA5’末端的独特结构是mRNA翻译起始效率的最主要决定因素,因此找到通用的有效起始翻译的共同序列能高效起始外源蛋白的翻译。
(2)SD与起始密码子间的距离约为5-13bp,这一距离影响翻译起始的效率,因此在设计载体中要控制好这段距离。(3)在mRNA的翻译起始区的二级结构在决定基因表达效率方面具有重要作用,使用一些策略使mRNA形成二级结构的可能性最小。
(4)mRNA的快速降解势必影响蛋白质的产生,比如可以通过选用缺乏某些特定RNase如RNaseII或PNPase的宿主菌来提高基因的表达,这将在E.coli高效表达外源基因中有很大作用。
(5)在mRNA中存在终止信号是翻译终止过程必不可少的,在设计表达载体时,通常插入三个终止密码子以防止核糖体的跳跃,在E.coli中偏向于使用UAA密码子。
c、维护真核生物蛋白基因在大肠杆菌细胞稳定性和减少E.coli中重组蛋白裂解的策略
(1)将蛋白质靶向细胞周质或培养基
(2)在较低的温度下培养细菌
(3)选用蛋白酶缺陷的菌株
(4)构建N-末端或C-末端融合蛋白;融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白,为E.coli中高效表达和纯化重组蛋白提供了极大方便。
(5)将目的基因多拷贝串联
(6)与分子伴侣共表达
(7)替换特定的氨基酸残基以消除蛋白酶裂解位点
(8)改善蛋白质的亲水性
(9)优化培养条件,E.coli中的蛋白质产量可以通过高细胞密度培养系统而获得显著提高,
d、提高真核生物蛋白基因在大肠杆菌细胞分泌的策略 
(1)将蛋白质分泌到细胞外是人们最期望的一种策略。因为这样容易纯化目的蛋白质,减少细菌的蛋白酶对目的蛋白质的裂解。但是,E.coli在正常情况下只有很少量的蛋白质分泌到细胞外。在大肠杆菌表达系统中,金黄色葡萄球菌A蛋白的信号肽能引导带有E结构域的A蛋白片段或融合产物从细胞质外泌到培养基中,如果能利用可控的强启动子进行A蛋白信号肽引导的基因表达,则有望在蛋白质外泌方面有所突破。
(2)对培养基的特殊操作能明显提高蛋白质释放到培养基中。例如,在培养基中添加甘氨酸能增强外周质蛋白释放到培养基中,且不引起明显的细菌裂解。
质粒的构建,SD序列,信号肽,糖基化,启动子

第5题:

对封闭群大小鼠而言,正确的是()。

  • A、就整体而言,遗传特性保持相对稳定性
  • B、群内个体具有一定杂合性
  • C、动物实验中接近自然种属的反应特点
  • D、一般不选做药物的LD50实验

正确答案:A,B,C

第6题:

下列动物中,适合制作去垂体模型的是

A小鼠

B犬

C豚小鼠

D兔

E大鼠


答案:E

第7题:

同种但不同品系的动物,因遗传基因的表达程度不同而影响营养的需求,如近交系小鼠与封闭群动物对蛋白质饲料需求,近交系小鼠要高些。灵长类动物或豚鼠,因缺乏L-谷氨酸氧化酶,必须人工添加维生素C。


正确答案:正确

第8题:

鼠细胞发生癌变。

(2)通过基因敲除,得到一只AABb小鼠。假设棕毛基因A、白毛基因a、褐齿基因B和黄齿基因b均位于常染色体上,现要得到白毛黄齿新类型小鼠,用来与AABb小鼠杂交的纯合亲本的基因型是____________ ,杂交子代的基因型是________________。让F1代中双杂合基因型的雌雄小鼠相互交配,子代中带有b基因个体的概率是_____________。不带B基因个体的概率是___________________。


正确答案:

aaBB;AaBB、AaBb;12/16(3/4);4/16(1/4)

 

解析:

 

第9题:

已知某一动物种群中仅有Aabb和AAbb两种类型个体,Aabb:AAbb=2:1,且该种群的每种基因型中雌雄个体比例为1:1,个体间可以自由交配,则该种群自由交配产生的子代中能稳定遗传的个体比例为()。

  • A、5/8
  • B、5/9
  • C、13/16
  • D、13/18

正确答案:B

第10题:

()的胸腔结构与其它动物不同。

  • A、大鼠
  • B、地鼠
  • C、兔
  • D、小鼠

正确答案:C

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