膜片钳技术

题目

膜片钳技术

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相似问题和答案

第1题：

领导的“三技”指的是（）

A观念技术、人文技术、操作技术

B观念技术、人文技术、协调技术

C观念技术、用人技术、操作技术

D管理技术、人文技术、操作技术

A
略

第2题：

什么是膜片钳技术？它的基本工作原理是什么？

正确答案:膜片钳技术是一种能够记录膜结构中单一的离子通道蛋白质的开放和关闭的技术，即是测量单通道离子电流和电导的技术。基本工作原理：膜片钳技术是用玻璃微电极接触细胞，形成吉欧姆(GΩ)阻抗，使得与电极尖端开口处相接的细胞膜的膜片与周围在电学上绝缘，在此基础上固定电位，对此膜片上的离子通道的离子电流(pA级)进行监测记录的方法。

第3题：

可再生能源科学的基本技术主要包括()。

A.传递技术转换技术分解技术用能技术

B.收集技术转换技术储能技术用能技术

C.传递技术转换技术储能技术用能技术

D.收集技术转换技术储能技术整合技术

答案：B

第4题：

膜片钳实验的基本操作步骤包括哪些？

正确答案: 1、液体配制：主要根据研究通道的不同，配制相应的液体，基本原则是保持两个平衡：渗透压平衡和酸碱平衡。所有液体在使用前必须过滤。
2.标本制备
3.记录
4、资料分析：
（1）一般电学性质：通过I-V关系计算单通道电导，观察通道有无整流。通过离子选择性、翻转电位或其它通道激活条件初步确定通道类型。
（2）动力学：开放时间、开放概率、关闭时间、通道的时间依赖性失活、开放与关闭类型（簇状猝发（Burst）样开放与闪动样短暂关闭（flickering）），化学门控性通道的开、关速率常数等。
（3）通过对全细胞激活曲线或失活曲线的分析，可得到半数激活或失活电压Vh及斜率因子K。
（4）药理学：阻断剂、激动剂或其它调制因素对通道活动的影响。
（5）综合分析得到最后结论。

第5题：

膜片钳技术的应用范围有哪些？

正确答案: 1）分辨单通道电流，直接观察通道的开闭过程。
2）区分离子通道的离子选择性及其门控性（如区分电压或化学门控性通道），发现新的离子通道及亚型。
3）在记录单个通道电流（i）和全细胞电流（I）的基础上，可分别计算出细胞膜上的通道数（n）和开放概率（p），依公式I=nip。
4）用以检测某些递质能否打开通道，或是否接受第二信使的调控（膜内面向外式）
5）研究细胞膜上的信使物质对离子通道型受体的调节机制（应用全细胞记录式）
6）研究不同离子对通道特性的影响及细胞内信使物质如对离子通道型受体的调节机制（内面向外膜片）
7）研究药物对电压或化学门控性通道的影响。

第6题：

使用打孔全细胞膜片钳记录（perforated whole-cell patch clamp recording）的优点是什么？

正确答案: 打孔全细胞记录的优点：
1）克服了细胞内微电极高阻抗，需刺破细胞膜进入细胞，造成胞浆流失，破坏细胞生理功能完整性的缺点，记录是在一个相对完整的神经结构上进行；
2）电极以一个低电阻进入细胞内，这样就可以较好的控制膜电位，另外由于电极与细胞膜形成的高阻封接，这就可较好地显示细胞固有的膜特性；
3）由于电极尖端比较大，很易改变电极内溶液，以便控制细胞内环境，很易注入一些蛋白或酶至细胞内。
4）用一般常规微电极很难在比较小，年幼的神经元上作记录，而全细胞记录适合研究各种神经制备，各种类型的神经元。

第7题：

什么是电压钳与膜片钳，有什么区别？

正确答案:电压钳技术是通过向细胞内注射一定的电流，抵消离子通道开放时所产生的离子流，从而将细胞膜电位固定在某一数值。由于注射电流的大小与离子流的大小相等、方向相反，因此它可以反映离子流的大小和方向。膜片钳技术钳制的是“膜片”，是指采用尖端经过处理的微电极与细胞膜发生紧密接触，使尖端下的这片细胞膜在电学上与其它细胞膜分离，这大大降低了背景噪声，使单通道微弱的电流得以分辨出来。采用电压钳技术将这片膜的电位钳制在某一数值，可记录到单通道电流。从这点上看，膜片钳技术是特殊的电压钳技术。随着膜片钳技术的发展，它已经不仅仅局限于“膜片”的概念，也不仅仅采用电压钳技术，还常采用电流钳技术。

第8题：

关于膜片钳实验的叙述，错误的是（）

A、测量单通道离子电流

B、计算通道的开放概率

C、计算单通道电导

D、计算膜电导

E、记录膜结构中单一离子通道蛋白质分子的开放和关闭

参考答案：D

第9题：

如何判断膜片钳记录过程中已经形成良好的细胞封接？

正确答案: 在电极入液之前，给它施加一个较大的正压，有助于迅速形成良好的封接。电极入液后，液接电阻可以不补偿，当封接形成之后自然会消失。
电极刚入水时测试脉冲所引起的电流呈方波，其幅度与电极电阻成反比。电极尖端轻微触压细胞膜，电阻略有增大，噪声略有降低。形成封接后，电流方波几乎消失，噪声也急剧下降，两个尖峰是快电容引起的电流。
为证实封接的形成，可以增加放大器的增益，从而可以观察到除脉冲电压的首尾两端出现电容性脉冲尖端电流之外，电流波形仍呈平坦状。

第10题：

建立膜片钳记录系统大致需要哪些基本设备？

正确答案:膜片钳实验仪器设备主要有放大器、微型操纵器（微超）、倒置显微镜、防震台、屏蔽笼、灌流槽和数据采集和处理设（计算机）。其中膜片钳放大器（amplifier）、微型操纵器（微操micromanipulator）、倒置显微镜(inverted microscope)是膜片钳实验区别于一般电生理实验所需要的仪器。

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