常用沉淀蛋白质的方法有（），（），（）和（）等。

题目

参考答案和解析

正确答案:盐析、有机溶剂、某些有机酸、金属盐

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相似问题和答案

第1题：

常用沉淀蛋白质的方法有（）、（）、（）、（）和（）。

正确答案:盐析沉淀；有机溶剂沉淀；加热沉淀；重金属盐沉淀；生物碱试剂沉淀

第2题：

常用的蛋白质沉淀方法有哪些？

正确答案: ⑴盐析法
⑵有机溶剂沉淀法
⑶等电点沉淀法
⑷选择性变性沉淀法
⑸有机聚合物沉淀法

第3题：

常用的脱氧方法有（）、（）和沉淀脱氧。

正确答案:扩散脱氧；真空脱氧

第4题：

简述蛋白质溶液的稳定因素，和实验室沉淀蛋白质的常用方法。

正确答案:维持蛋白质溶液稳定的因素有两个：
（1）水化膜：蛋白质颗粒表面大多为亲水基团，可吸引水分子，使颗粒表面形成一层水化膜，从而阻断蛋白质颗粒的相互聚集，防止溶液中蛋白质的沉淀析出。
（2）同种电荷：在pH≠pI的溶液中，蛋白质带有同种电荷。若pH＞pI，蛋白质带负电荷；若pH沉淀蛋白质的方法，常用的有：
（1）盐析法，在蛋白质溶液加入大量的硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐，去除蛋白质的水化膜，中和蛋白质表面的电荷，使蛋白质颗粒相互聚集，发生沉淀。用不同浓度的盐可以沉淀不同的蛋白质，称分段盐析。盐析是对蛋白质进行粗分离的常用方法。
（2）有机溶剂沉淀法：使用丙酮沉淀时，必须在0～4℃低温下进行，丙酮用量一般10倍于蛋白质溶液的体积，蛋白质被丙酮沉淀时，应立即分离，否则蛋白质会变性。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。此外，还可用加重金属盐，加某些有机酸，加热等方法将样品中的蛋白质变性沉淀。

第5题：

常用的蛋白质沉淀方法有哪些？有机溶剂沉淀蛋白质的机理什么？用乙醇沉淀蛋白质时应注意哪些事项？

正确答案: ①常用的蛋白质沉淀方法有：
蛋白质盐析沉淀、蛋白质等电点沉淀、有机溶剂沉淀法及运用沉淀动力学沉淀法等。
②有机溶剂沉淀蛋白质的机理是：
向蛋白质溶液中加入有机溶剂，水的活度降低。随着有机溶剂溶度的增大，水对蛋白质分子表面荷电基团的水化程度降低，液体的介电常数下降，蛋白质分子间的静电引力增大，从而凝聚和沉淀。
③用乙醇沉淀蛋白质时应注意的事项：
1、低温条件下操作可以提高收率和减少蛋白质失活变性（加入有机溶剂为放热反应）；
2、采用的有机溶剂必须与水互溶，与蛋白质不发生作用；
3、蛋白质分子量越大，需要加入的溶剂量越少；
4、一种蛋白质的溶解度常会因为另一种蛋白质存在而降低；
5、沉淀的蛋白如果不能再被溶解，可能已经变性；
6、很多酶和蛋白质在20-50%（V/V）就能产生沉淀；当溶剂量达到50%时，通常只有分子量≤1500的蛋白留在溶液中；
7、PH=PI时，需要加入的溶剂量减少；
8、盐析法沉淀的蛋白质采用有机溶剂精制时必须与先进行透析。

第6题：

简述常用的蛋白质沉淀方法

正确答案: 盐析法；
有机溶剂沉淀法；
等电点沉淀法；
选择性变性沉淀法；
有机聚合物沉淀法。

第7题：

为获得不变性的蛋白质，常用的方法有（）

A、用三氯醋酸沉淀
B、用苦味酸沉淀
C、用重金属盐沉淀
D、低温盐析

正确答案:D

第8题：

蛋白质沉淀法常用的方法包括：（）、（）、（）和（）。

正确答案:中性盐沉淀法；有机溶剂沉淀法；等电点沉淀法；有机聚合物沉淀法

第9题：

什么是蛋白质的沉淀作用？有哪些沉淀蛋白质的方法？各方法沉淀的机理是什么？

正确答案: 蛋白质在水溶液中可形成亲水的胶体，蛋白质从胶体溶液析出的现象称为蛋白质沉淀作用。
沉淀蛋白质的方法有：
盐析法：在蛋白质溶液中加入高浓度的强电解质溶液如硫酸铵、硫酸钠等，蛋白质
从溶液中产生沉淀。
机理：破坏了蛋白质分子表面的水化膜和双电层（净电荷），蛋白质溶液失去
稳定性而产生沉淀。
有机溶剂沉淀法：乙醇、丙酮等有机溶剂可使蛋白质产生沉淀。
机理：降低溶液的介电常数，也破坏了蛋白质的水化膜，蛋白质产生沉淀，
但必须低温操作，以防止蛋白质的变性。
等电点沉淀法：用稀酸或稀碱调节蛋白质的溶液于某蛋白质等电点处，该蛋白质沉淀析出。
机理：中和蛋白质表面水化膜。
重金属沉淀法：蛋白质在等电点以上的pH下，易于重金属产生沉淀。
机理：重金属与带负电的蛋白质羧基结合产生不可逆沉淀。

第10题：

分离纯化蛋白质常用的分级沉淀法有（）分级沉淀法、（）分级沉淀法和（）分级沉淀法三种。

正确答案:有机溶剂；无机盐；pH

常用沉淀蛋白质的方法有（），（），（）和（）等。

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