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影响酶催化活性的因素有哪些？

题目

影响酶催化活性的因素有哪些？

参考答案和解析
正确答案:影响因素：pH、温度、抑制剂、激活剂。
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第1题：

酶的提取方法有哪些？影响酶提取的主要因素有哪些？


正确答案:根据酶提取时所采用的溶剂或溶液的不同，酶的提取方法主要有盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取和有机溶剂提取等。
①盐溶液提取法：蛋白质在低浓度盐溶液中，其溶解度会随着盐溶液浓度的升高而增加，这种现象称为盐溶这是因为蛋白质分子吸附某种盐类离子后，带电表层使蛋白质分子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子间的相互作用却加强，因而溶解度提高。
②酸溶液提取法：有些酶在酸性溶液中的溶解度比较大，且比较稳定，这类酶宜采用酸溶液提取，PH一般控制在2—6，针对酶的性质选择合适的PH，避免PH过低引起酶失活。
③碱溶液提取法：有些酶在碱性溶液中的溶解度比较大，且比较稳定，这类酶宜采用碱溶液提取，PH一般控制在8—12，针对酶的性质选择合适的PH，避免PH过高引起酶失活。
④有机溶剂提取法：一些和脂类结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的酶蛋白难溶于水、稀盐、稀酸或稀碱中，则常用能够与水混溶的有机溶剂提取，如乙醇、丙酮、丁醇等。酶主要是蛋白质，影响蛋白质提纯的因素同样会影响酶的提纯，而在酶提取过程中最重要的就是要防止酶的变性失活。影响酶提取的最主要因素是酶在所用溶剂中的溶解度及酶向溶剂中扩散的难易。此外，在提取过程中还要注意一下因素的影响：
（1）温度：为防止酶的变性失活，提取时温度不宜过高。特别是采用有机溶剂提取时，整个提取操作应尽可能在低温下进行。
（2）PH：酶提取液的PH首先应保证蛋白质稳定，为了增加酶的溶解度，提取时溶液的PH应远离酶的等电点。（3）搅拌：搅拌能促进酶在提取液中的溶解，一般采用温和搅拌为宜，速度太快易产生大量气泡，增大了与空气的接触面，会引起酶蛋白的变性失活。
（4）污染：酶液是微生物生长的良好培养基，在提纯过程中应尽可能防止微生物对酶的破坏。
（5）提取液的体积：提取液的用量增加可提高提取率。但过量的提取液，使酶浓度降低，对进一步分离纯化不利。所以提取液的用量一般为含酶原料体积的3—5倍，少量多次，以得到较好的提取效果。

第2题：

分析影响限制性内切酶酶切的因素有哪些？


正确答案: （1）温度：大部分限制性内切酶最适反应温度为37℃，少数酶高于或低于这个温度。
（2）时间：合适，大多为1h，可过夜反应。
（3）溶液体系：要求有稳定的pH环境。标准的缓冲溶液中含有氯化钙、氯化镁或氯化钾、Tris-HCl、β-巯基乙醇或二硫苏糖醇（DTT）以及牛血清蛋白质（BSA）和Mg2+，具有一定的酸碱值即pH值。
（4）盐离子浓度：不同的限制性内切酶对盐离子强度（Na+）有不同的要求，一般按离子强度不同分为低（0mmol/L）、中（50mmol/L）、高盐（100mmol/L）三类。Mg2+也是限制性内切酶酶切反应所需。
（5）反应体积和甘油浓度：在进行酶切反应时，加酶的体积一般不超过总反应的10%，若加酶体积太大，甘油浓度过高，则会影响酶切反应。
（6）DNA的纯度和结构：DNA样品中所含的蛋白质、有机溶剂及RNA等杂质均会影响酶切反应速度和酶切的完全度，酶切的底物一般是双链DNA，DNA的甲基化位置会影响酶切反应。

第3题：

影响酶活性的因素有哪些?


参考答案：凡能影响蛋白质的理化因素都能影响酶的活性。因此温度、酸碱度、重金属离子都能影响酶的活性。高温、强酸、强碱等因素均可引起酶丧失催化能力。

第4题：

影响酶的有机相催化因素有哪些？


正确答案:酶的种类和浓度：不仅要看酶催化反应速度、还要注意酶的稳定性、底物专一性、对映体选择性、区域选择性、键选择性等。同一种酶，由于来源不同和处理方法（如纯度、冻干条件、固定化载体、固定化方法、修饰方法和修饰剂等）的不同，其特性也会有差别。
底物的种类和浓度：底物最适浓度和在有机相-必需水相间的分配问题。
有机溶剂的种类：2≤lgP≤5
水含量：最适水含量与溶剂的极性有关，溶剂极性越大，最适水含量也越大；而达到最大反应速度的水活度一般在0.5-0.6之间。
温度：在微水有机介质中，酶的热稳定性增强，其最适温度高于水溶液中的催化最适温度；但温度升高，立体选择性将降低。
。pH和离子强度：在有机介质中催化最适pH与水溶液中的接近。在冷冻干燥过程中，缓冲液对会严重影响pH和酶活力，应选择合适的缓冲液对，并添加蔗糖、甘露醇和冠醚等保护剂；有机相缓冲液。

第5题：

酶的二级结构主要有哪些构像？与酶的催化活性有什么关系？


正确答案:酶的二级结构：α-螺旋、β-折叠 、β-转角 、无规卷曲。
二级结构与酶的催化活性的关系：二级结构的主要稳定因素是氢键，当氢键断裂，酶活性丧失。

第6题：

决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是（）


正确答案:反应条件

第7题：

影响酶催化作用的因素有哪些？


正确答案:◇1.度：酶促反应在一定温度范围内反应速度随温度的升高而加快；但当温度升高到一定限度时，酶促反应速度不仅不再加快反而随着温度的升高而下降。在一定条件下，每一种酶在某一定温度时活力最大，这个温度称为这种酶的最适温度。
◇2.碱度：每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活性，超过这个范围酶就会失去活性。
◇3.浓度：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。
◇4.物浓度：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎：成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著；当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。
◇5.制剂：能特异性的抑制酶活性，从而抑制酶促反应的物质称为抑制剂。
◇6.活剂：能使酶从无活性到有活性或使酶活性提高的物质称为酶的激活剂。

第8题：

影响酶促反应的因素有哪些？


正确答案: 影响酶促反应的因素有：酶浓度、底物的种类和浓度、缓冲液的种类和离子强度及温度、激活剂和抑制剂以及某些其他因素。

第9题：

何谓酶促反应动力学，影响酶促反应速率的因素有哪些


正确答案:酶促反应动力学是研究酶促反应速率及影响酶促反应速率各因素的科学，影响酶促反应速率的因素有酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂及激活剂等①在在其他因素不变的情况下，底物浓度的变化对反应速率影响的作图时呈矩形双曲线的②底物足够时，酶浓度对反应速率的影响呈直线关系③温度对反应速率的影响具有双重性④pH通过改变酶和底物分子解离状态影响反应速率⑤抑制剂可逆或不可逆的降低酶促反应速率⑥激活剂可加快酶促反应速率

第10题：

决定酶催化活性的因素有两个方面，一是（），二是（）。


正确答案:酶分子结构；反应条件

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