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简述细菌革兰氏染色的方法和步骤。

题目

简述细菌革兰氏染色的方法和步骤。

参考答案和解析
正确答案: ①结晶紫②革兰氏碘夜③95%酒精④沙黄复染液.
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第1题：

叙述细菌革兰氏染色原理、方法？


正确答案:革兰氏染色结果的差异主要基于细菌细胞壁的构造和化学组分不同。通过初染和媒染，在细菌细胞膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。G+细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和交联紧密，故用乙醇洗脱时，肽聚糖层网孔会因脱水而明显收缩，再加上的G+细菌细胞壁基本上不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此，结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内，使其呈现蓝紫色。G-细菌因其细胞壁薄、肽聚糖含量低和交联松散，故遇乙醇后，肽聚糖层网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇将类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝，这样结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁。因此，通过乙醇脱色，细胞又呈现无色。这时，再经番红等红色染料复染，就使G-细菌获得了新的颜色—红色，而G+细菌则仍呈蓝紫色（实为紫中带红）。

第2题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）、（）、（）和（）。


正确答案:结晶紫初染；碘液媒染；95%乙醇脱色；稀释复红或沙黄复染

第3题：

试述细菌革兰氏染色的步骤、原理和结果?


参考答案：(1)步骤：①先用结晶紫染色，菌体呈紫色;②再加碘液媒染，菌体呈紫色;③然后用乙醇脱色;革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌无色;④最后用沙黄或番红复染，革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。(2)原理：革兰氏染色结果与细胞壁组成有关，因为革兰氏阳性细菌细胞壁较厚，肽聚糖含量较高，网络结构紧密，含脂量又低，当它被酒精脱色时，引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小，从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出，故菌体呈紫色;可是革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量低，而脂类含量高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增大，结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来，故革兰氏阴性细菌呈复合液的红色。(3)结果：革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。

第4题：

细菌细胞壁上决定革兰氏染色的关键成分是（），而染色的关键步骤则是（）


正确答案:肽聚糖和类脂；脱色

第5题：

简述细菌革兰氏染色反应的原理和程序？


正确答案: 原理：革兰氏阴性细菌的细胞壁由于肽聚糖含量少，由肽聚糖组成的网络结构疏松，网孔较大，一次当酒精脱色时，结晶紫和碘复合物也随之被抽提出来，当菌体复染后，就呈红色；而革兰氏阳性菌的细胞壁由于肽聚糖含量高，网络结构紧密，网孔小，酒精脱色时无法把结晶紫和碘复合物抽提出，故菌体保持紫色。程序：先用草酸铵结晶紫进行初染，然后用碘液煤染，接着95%乙醇脱色，最后用番红、沙黄等红色染料复染。

第6题：

简述革兰氏染色方法？


正确答案: （1）在已干燥固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液数滴，染色1-2分钟，水洗
（2）滴加革兰氏碘液媒染1-3分钟，水洗。
（3）滴加95%酒精脱色，约30秒-1分钟，水洗。
（4）滴加石炭酸复红染色液复染1-2分钟，水洗。
（5）吸干或烘干，镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

第7题：

简述细菌革兰氏染色法的染色过程和结果判断。（染色过程说明所用染料名称及染色时间）


正确答案: 革兰氏染色法染色过程
（1）初染：草酸铵结晶紫染1分钟，自来水冲洗。
（2）媒染：碘液覆盖涂面染1分钟，水洗。
（3）脱色：加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。
（4）蕃红梁色液（稀）染2-3min后，自来水冲洗。干燥，镜检红色为阴性，紫色为阳性。

第8题：

关于革兰氏染色下列说法正确的是()。

A、革兰氏染色法原理是根据细菌细胞壁结构的不同可将其分为革兰氏阴性和阳性

B、细菌在中性的环境中带负电荷，用碱性染料(解离时带正电荷)如美蓝、结晶紫等进行染色

C、细菌通过革兰氏染色后，呈紫色的被称为阳性菌

D、革兰氏染色的最关键操作步骤是碘液固定

E、细菌通过革兰氏染色后，呈红色的被称为阴性菌


答案：ABCE

第9题：

简述革兰氏染色的原理以及步骤。


正确答案:原理：革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学祖坟基础上的一种物理原因。通过初染与媒染操作后，在细菌细胞的膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁厚，肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密，故在用乙醇处理不能在壁上溶出裂缝，因此结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁上，使其呈现紫色。反之，革兰氏阴性细菌引起壁薄，肽聚糖含量低和交联松散，遇乙醇后，肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样，结晶紫与碘的复合物就极易溶出细胞壁，经乙醇脱色后，细胞呈无色。这时，在经沙黄复染，使革兰氏阴性菌呈红色。步骤：涂片→干燥固定→结晶紫初染1’→水洗→碘液媒染1’→水洗→95%酒精脱色约30’→水洗→沙黄复染1’→水洗→干燥→油镜镜检

第10题：

简述革兰氏染色方法步骤及原理。


正确答案: 简要方法步骤：涂片→干燥→冷却→结晶初染→碘液媒染→酒精脱色→番红复染→干燥→镜检。
原理：与两类细菌的细胞壁成分笔结构有密切关系。革兰氏阴性菌的细胞壁中含较多的类脂质，而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时，类脂质被溶解，从而增加了细胞壁的通透性，使初染后的结晶紫碘的复合物易于渗出，结果细胞被脱色，经复染后则呈现复染剂的颜色。而革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，因而细胞仍保留初染时的颜色。

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