简述化学法测定DNA序列的基本原理。

题目

简述化学法测定DNA序列的基本原理。

参考答案和解析
正确答案:化学法是对待测DNA进行化学降解。在化学法的测序系统中,先对待测DNA末端进行放射性标记,然后分成4组或5组互为独立的化学反应体系,每一组用不同的化学试剂特异地针对某一种或某一类碱基进行化学切割,通过化学降解后产生长短不一的DNA片段,其长度取决于改组反应所针对的碱基在待测DNA片断中的位置,将各组反应产物通过高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,放射自显影检测后直接识读待测DNA的序列。
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相似问题和答案

第1题:

简述DNA序列多态性。


本题答案:是指一个基因座上,因不同个体DNA序列有一个或多个碱基的差异而构成的多态性。可以理解为该基因座上所有等位基因DNA长度相同,但是它们之间的序列存在差异。在基因组DNA中,无论是编码区或者非编码区,单碱基替换是最基础的突变形式。
在人类基因组范围内,如果任何单碱基突变使特定核苷酸位置上出现两种碱基,其中最少的一种在群体中的频率不少于1%,就形成单核苷酸多态性。

第2题:

简述热量法测定煤发热量的基本原理。


正确答案: 煤的发热量测定,是在一个高压密闭的容器中(通常称氧弹),在有过剩氧气存在的条件下,点燃适量的煤样,使其完全燃眉之急烧,放出的热量被水吸收,由水温的升高来测量计算煤发热量。

第3题:

链末端终止法测定的序列是

A、DNA原分子

B、DNA的酶促反应产物

C、DNA的末端序列

D、DNA的中间序列

E、DNA的两端序列


参考答案:B

第4题:

请简述铁矿石中三氯化钛还原法测定全铁的基本原理。


正确答案: 试样用硫-磷混酸溶解。以钨酸钠为指示剂,用三氯化钛将高价铁还原成低价至生成“钨蓝”,再用重铬酸钾氧化至蓝色消失,以二苯胺磺酸钠为指示剂,用重铬酸钾标准溶液滴定,借此测定全铁量。

第5题:

简述DNA芯片技术的基本原理。


正确答案:DNA芯片技术的基本原理是许多已知序列的寡核苷酸DNA和突变DNA分别与两块DNA芯片杂交,由于至少存在有一个碱基的差异,正常和突变的DNA将会得到不同的杂交图谱,经过共聚焦显微镜分别检测二种DNA分子产生的荧光信号。

第6题:

简述三节炉法测定煤中碳、氢元素含量的基本原理。
称取一定量的试样置于氧气流中,在800℃的温度下使之完全燃烧,煤中的碳转化为二氧化碳,氢则转化为水,燃烧产物中的硫化物和氯分别被铬酸铅和银吸收,氮氧化物被二氧化锰吸收。净化后的二氧化碳和水分由相应的吸收剂吸收,中性的水采用干燥剂或吸水剂吸收,酸陛的二氧化碳则采用碱性吸收剂吸收。根据吸收剂的增重,可计算出燃料中碳和氢的含量。

第7题:

简述链末端终止法测定DNA序列的原理。


正确答案:利用DNA聚合酶,以待测单链DNA为模板,以dNTP为底物,设立四种相互独立的测序反应体系,在每个反应体系中加入不同的双脱氧核苷三磷酸(dideoxyribonucleoside triphosphate,ddNTP)作为链延伸终止剂,在测序引物引导下,按照碱基配对原则,每个反应体系中合成一系列长短不一的引物延伸链,通过高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,放射自显影检测后,从凝胶底部到顶部按5′→3′方向读出新合成链序列,由此推知待测模板链的序列。

第8题:

化学降解法测定的序列是

A、DNA原分子

B、DNA的酶促反应产物

C、DNA的末端序列

D、DNA的中间序列

E、DNA的降解序列


参考答案:A

第9题:

简述DNA-蛋白质亲和层析法的基本原理。


正确答案:该法的基本原理是根据序列特异性DNA结合蛋白与其特异的DNA结合序列的可逆性结合作用,以特异DNA序列作为配体,用层析方法将蛋白质分离纯化。

第10题:

简述库仑滴定法测定微量肼的实验基本原理及方法。


正确答案: ①原理:库仑滴定法是在试液中加入大量的辅助电解质,以恒定的电流使辅助电解质电解,其产物作为滴定剂与被测组分发生定量反应;滴定剂的量是根据所耗的电量求得,根据反应的计量关系可求出被测物质的含量。
②本实验辅助电解质是HCl-KBr混合液,
③阳极电解产物是Br2
④滴定剂是Br2,
⑤滴定剂是Br2与微量肼反应:NH2NH2.H2SO4+2Br24HBr+H2SO4+N2
⑥方法:在具有阴极隔离室、阳极的电解池中放有HCl-KBr混合液,以恒电流并保证电解电效率100%的前题下首先进行预电解,然后准确加入被测物质硫酸肼进行电解,记录电解时所耗的电量来求出硫酸肼的含量。
要求:1、辅助电解质电解的电解效率100%;2、要进预电解;否则若有电解产物是Br2预先存在,影响实验的准确性,使结果偏低。