简述交错延伸PCR技术的原理和特点。

题目
问答题
简述交错延伸PCR技术的原理和特点。
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相似问题和答案

第1题:

简述RT-PCR技术的概念及其原理。


参考答案:RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。

第2题:

简述聚合酶链反应(PCR)方法的原理和应用。


正确答案:PCR是体外DNA扩增技术,是利用耐热DNA聚合酶及天然复制螺旋结构的原理,使极微量DNA片断在短时间内通过变性、退火、延伸等循环周期扩增到106-107倍,达到极易检测DNA的敏感方法。具有高度敏感、操作简便、快速等特点。目前,此法已在医学中广泛应用,如病原体DNA检测,细胞因子、T细胞受体、免疫球蛋白及补体研究,肿瘤基因、遗传基因检测,遗传性疾病的产前诊断及DNA克隆、重组,基因工程等;但要选择适当的阳性和阴性对照,以排除假阴性和假阳性。

第3题:

简述PCR技术的特点。


参考答案:

灵敏度高
特异性强
适用于降解的DNA检材
种属特异性好
可用于多个个体混合检材的分型检测
扩增产物分型方法的多样性
PCR方法操作简单、节约时间


第4题:

什么是PCR,请试述PCR技术的原理,以及PCR的反应过程?


正确答案:P.CR就是聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction)。
原理:双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
反应过程:首先。双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子;然后,加入到反映混合物中的引物和模板DNA的特定末端相结合;戒指,DNA聚合酶以单链DNA为模板,利用反应混合物中的三种核苷三磷酸,在引物的3’-OH端合成新生的DNA互补链。

第5题:

什么是PCR技术?PCR的基本原理是什么?


正确答案:PCR即聚合酶链式反应,是一种在体外快速扩增特定目的基因或DNA序列的技术,故又称基因的体外扩增技术。它可以在试管中建立反应,经过数小时之后,就能将极微量的目的基因或DNA片断扩增数十万乃至千百万倍,无需经过繁琐费时的基因克隆程序,便可获得足够数到两精确的DNA拷贝。
PCR的基本工作原理:以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5’末端和3’末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,重复这一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。

第6题:

简述波分多路复用技术的工作原理和特点。


正确答案:利用波分复用设备将不同信道的信号调制成不同波长的光,并复用到光纤信道上,使每个信道有各自的频率范围且互不重叠,信号就能以波分多路复用的方式通过共享光纤进行远距离传输。波分多路复用在光学系统中利用衍射光栅来实现多路不同频率的光波信号的分解和合成,并且光栅是无源的,因而其可靠性非常高。

第7题:

简述PCR原理及其基本反应步骤。


正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板互补的DNA链。

第8题:

简述PCR基本原理。


本题答案:PCR技术是模拟生物体内DNA的半保留复制,在体外合成DNA链的方法,在模板、DNA、引物、dNTP、Taq酶存在的条件下经过:
“高温变性→低温退火→中温延伸”三步循环,获得大量扩增片段。

第9题:

简述PCR技术的基本原理?


正确答案: PCR反应以待扩增DNA或RNA片段为模板,根据5’和3’端核苷酸顺序合成一对与之互补的寡核苷酸引物,将模板DNA经高温变性,低温退火,中温延伸,并在DNA聚合酶作用下,以四种单核苷酸为原料,单链DNA为模板逐步延伸,合成新链。这样每经过一个循环,DNA拷贝增加一倍,而进行25~35个循环,DNA得以快速扩增,可用于获取目的基因以及检测分析特定的基因缺失、重复、点突变等

第10题:

简述PCR扩增的原理。


正确答案: 用随即排列的10聚体寡核苷酸单链为引物,以研究对象的基因组DNA为模板进行DNA扩增。
反应程序为:将模板DNA在94℃变性解链,然后在36℃的温度下使引物和模板退火,如果某两个引物与模板的结合位点之间距离在可扩增的范围之内,而且分别位于互补的两条单链上,同时引物的3′端相对,当温度提高到72℃时,耐高温的DNA聚合酶进行扩增。
以上步骤经30-45循环后,产物经琼脂糖凝胶电泳,EB染色后可用紫外光进行检测。