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简述酶分子定向进化的一般步骤。

题目
问答题
简述酶分子定向进化的一般步骤。
参考答案和解析
正确答案： 酶定向进化通常分3步进行：首先通过随机突变或基因体外重组创造基因多样性；然后导入适当载体后构建突变文库；最后通过灵敏的筛选方法，选择阳性突变子。这个过程可重复循环，直至得到预期性状的酶。
解析： 暂无解析
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第1题：

简述酶反应器设计的一般步骤


正确答案:（1）确定酶反应器的类型
（2）确定酶反应器的制造材料
（3）进行热量衡算
（4）进行物料衡算

第2题：

酶分子定向进化


正确答案:是从一个或多个已经存在的亲本酶出发经过基因的突变和重组，构建一个人工突变酶库，通过筛选最终获得预先期望的具体某些特征的进化酶。

第3题：

下列哪一项不属于酶改性的内容?

A、酶失活

B、酶分子修饰

C、酶固定化

D、酶定向进化


参考答案：A

第4题：

酶定向进化（enzymedirectedevolution）


正确答案:是模拟自然进化过程，在体外进行酶基因的人工随机突变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。

第5题：

简述酶分子定向进化的一般步骤。


正确答案:酶定向进化通常分3步进行：首先通过随机突变或基因体外重组创造基因多样性；然后导入适当载体后构建突变文库；最后通过灵敏的筛选方法，选择阳性突变子。这个过程可重复循环，直至得到预期性状的酶。

第6题：

酶分子定向进化的主要方法有哪些？


正确答案:（1）易错PCR（error-pronePCR）可以用Mn2＋来替代Mg2＋，使PCR时发生突变。
（2）DNA重组（改组）（DNAshuffling）
重组可以在同一基因的不同突变体之间进行，也可以在不同物种的同源基因间进行。因此，DNA重组就是把不同来源的同源基因断裂成不同大小的片段，然后对这些片段进行重新组合。
（3）随机引物体外重组
（4）交错延伸法（Staggeredextensionprocess）

第7题：

酶分子的定向进化


正确答案:是指在分子水平上，人为地创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制（随机突变、基因重组和自然选择），对酶基因进行改造，并进行定向选择，筛选出所需性质的酶蛋白.

第8题：

什么是酶的体外定向进化，原理及一般流程。


正确答案:酶的体外定向进化，又称实验分子进化，属于蛋白质的非合理设计，它不需事先了解酶的空间结构和催化机制，通过人为的创造特殊的条件，模拟自然进化机制（随机突变、重组和自然选择），在体外改造酶基因，并定向选择出所需性质的突变酶。
原理：在待进化酶基因的PCR扩增反应中，利用TaqDNA聚合酶不具有3’->5’校对功能的性质，配合适当条件，以很低的比率向目的基因中随机引入突变，构建突变库，凭借定向的选择方法，选出所需性质的优化酶（或蛋白质）。从而排除其他突变体。
流程：
1.因的选择：选择编码所需蛋白质的DNA序列
2.变或重组：通过易错PCR引入随即突变或DNAShuffling等方法增加基因序列的多样性。
3.变基因文库的构建：将获得的突变重组基因插入到表达载体中的构建突变库。
4.变体酶的表达：将载体转入受体细胞表达变异酶。
5.的基因鉴定：利用筛选和选择方法确定有益的特性克隆。
6.离改良基因并重复上述过程，直至获得所需性质的蛋白质。

第9题：

结合酶制剂的应用论述酶分子定向进化的酶工程意义


正确答案:⑴提高酶分子的催化活力；
⑵改善酶蛋白的稳定性；
⑶改善酶蛋白的底物专一性；
⑷通过酶蛋白分子对应用环境的适应能力。

第10题：

何为酶定向进化？有何特点？


正确答案:模拟自然进化的过程，在体外进行酶基因人工随机突变，建立突变基因文库，在人工控制的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
特点：适应面广、目的性强、效果显著

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