问答题双脱氧法（dideoxynucleotide method）测序的基本原理是什么？

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双脱氧法（dideoxynucleotide method）测序的基本原理是什么？

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第1题：

下列测序技术中，属于传统的技术的是（）。

A、焦磷酸测序
B、双脱氧核苷酸测序
C、边合成边测序
D、边连接边测序

正确答案:B

第2题：

蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）。

A、Edman降解法
B、双脱氧链末端终止法
C、化学降解法
D、氧化－还原法
E、水解法

正确答案:A

第3题：

目前自动化测序的基本原理是基于

A、链末端终止法

B、化学降解法

C、生物质谱法

D、杂交测序法

E、全新的测序原理

参考答案：A

第4题：

全基因组鸟枪法测序的基本原理是什么？

正确答案:鸟枪测序法基本原理：大分子DNA被随机地“敲碎”成许多小片段，收集这些随机小片段并将它们全部连接到合适的测序载体；小片段测序完成后，根据重叠区计算机将小片段整合出大分子DNA序列。这就是所谓的鸟枪测序法。

第5题：

用于测序的DNA末端终止法中不需要（）。

A、四种脱氧核苷酸（dNTP）
B、四种双脱氧核苷酸（ddNTP）
C、DNA聚合酶
D、³²P标记的一种dNTP
E、DNA连接酶

正确答案:E

第6题：

蛋白质自动测序仪的工作原理为（）。

A、Edman降解法
B、MaxamGilbert化学降解法
C、双脱氧链末端终止法
D、光电比色法
E、分光光度法

正确答案:A

第7题：

双脱氧法测序时，为了获得鸟苷酸残基为末端的一组大小不同的DNA片段，应该选择哪种物质（）

A、ddTTP
B、ddCTP
C、ddGTP
D、ddATP
E、ddUTP

正确答案:C

第8题：

Sanger双脱氧终止法对DNA测序时,下列哪种核苷酸的加入会使DNA链延长终止()

A、dGTP

B、dTTP

C、dCTP

D、Datp

参考答案：C

第9题：

SANGER双脱氧链终止法的原理是什么？

正确答案: DNA链中核苷酸以3’，5’-磷酸二酯键连接，合成DNA所用的底物是2’-脱氧核苷三磷酸。2’，3’ddNTP与普通dNTP不同，它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中，但由于没有3’羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，因此，正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP，链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争，产物是一系列的核苷酸链，其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP，结果将产生4组寡核苷酸，它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。

第10题：

简述Sanger双脱氧链终止法的基本原理。（聚丙烯酰胺凝胶电泳模式图）

正确答案: （1）核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5’端到3’端聚合（DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程。）；
（2）可延伸的引物必须能提供游离的3’-OH末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3’羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得4组长度不同的DNA片段，通过比较所以的DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。

双脱氧法（dideoxynucleotide method）测序的基本原理是什么？

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