问答题简述软琼脂法细胞克隆形成实验的步骤及应用。

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问答题

简述软琼脂法细胞克隆形成实验的步骤及应用。

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第1题：

目前实验室常用的克隆化方法

A、显微镜操作法

B、有限稀释法

C、琼脂平板法

D、细胞分选仪法

E、分子筛法

参考答案：B

第2题：

实验室最常用的细胞克隆化方法是

A．有限稀释法

B．显微操作法

C．荧光激活细胞分选仪

D．软琼脂平板法

E．动物体内诱生法

正确答案：A
有限稀释法不需特殊设备，克隆出现率高，为实验室最常用的方法。显微操作法直观可靠，但操作时间长，容易增加污染机会。荧光激活细胞分选仪法是当前分离细胞最先进的方法。本法筛选效率高，纯度高达90％。但仪器价格昂贵。软琼脂平板法的缺点是琼脂融化温度较难掌握，过高会导致细胞死亡，过低使细胞分布不均匀，操作较复杂，克隆出现率不稳定。

第3题：

目前实验室常用的克隆化方法

A．显微镜操作法

B．有限稀释法

C．软琼脂平板法

D．流式细胞仪筛选法

E．以上都不对

正确答案：B
目前常用的克隆化方法是有限稀释法，其原理是通过一定的稀释，使每个细胞培养孔平均只含0～1个细胞，经增殖培养后成为单克隆细胞系。

第4题：

实验室最常用的阳性杂交瘤细胞的克隆化方法是

A.无限稀释法
B.有限稀释法
C.荧光激活细胞分选仪
D.软琼脂平板法
E.显微操作法

答案：B

解析：

阳性杂交瘤细胞的克隆化（单个细胞培养）方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。其中实验室最常用的是有限稀释法。

第5题：

阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括

A、有限稀释法

B、无限稀释法

C、显微操作法

D、荧光激活细胞分选仪

E、软琼脂平板法

参考答案：B

第6题：

细胞克隆化的龠用技术为

A.加饲养细胞

B.HAT培基培养

C.有限稀释法

D.软琼脂培养法

E.显微操作技术

正确答案：C

第7题：

目前实验室常用的克隆化方法是

A．显微镜操作法

B．有限稀释法

C．琼脂平板法

D．细胞分选仪法

E．分子筛法

正确答案：B
[答案] B
[解析] 有限稀释法是将融合细胞充分稀释，使分配到培养板每个孔中的细胞数理论上为一，实际可能是0～数个，培养后取上清以ELISA筛选出特异性抗体高分泌的细胞，这一过程称为克隆化。

第8题：

目前实验室常用的克隆化方法是

A、显微镜操作法

B、有限稀释法

C、软琼脂平板法

D、流式细胞仪筛选法

E、免疫法

参考答案：B

第9题：

实验室最常用的阳性杂交瘤细胞的克隆化方法是

A、无限稀释法

B、有限稀释法

C、荧光激活细胞分选仪

D、软琼脂平板法

E、显微操作法

参考答案：B

第10题：

阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括

A.有限稀释法
B.无限稀释法
C.显微操作法
D.荧光激活细胞分选仪
E.软琼脂平板法

答案：B

解析：

阳性杂交瘤细胞的克隆化（单个细胞培养）方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。

简述软琼脂法细胞克隆形成实验的步骤及应用。

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