问答题论述革兰氏染色步骤及机制。

题目

问答题

论述革兰氏染色步骤及机制。

参考答案和解析

正确答案：步骤：
1、涂片、固定；
2、初染；
3、媒染；
4、脱色；
5、复染；
6、镜检。
机制：
对G-菌来说，由于壁的主要成分是脂类和蛋白质，肽聚糖很少，而脂类很易被乙醇溶解，这样在乙醇脱色过程中，G-菌细胞壁的渗透性增加，使得原生质体内的被乙醇溶解的结晶紫被抽提出来。所以表现为脱色而成为红色。
而对G+菌来说，细胞壁主要是由肽聚糖组成的网状、紧密的结构，在乙醇环境下，细胞壁脱水，壁的结构更加紧密，孔隙缩小，壁的渗透性减少，以至原生质体内的结晶紫不被抽提出来。所以表现不脱色而仍为紫色。

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相似问题和答案

第1题：

叙述革兰氏染色操作步骤。

正确答案: 涂片→干燥→固定→结晶紫染色→水洗→碘液酶染→水洗→吸干→95％乙醇脱色→水洗→吸干→蕃红或沙黄复染→水洗→干燥→镜检

第2题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）、（）、（）和（）。

正确答案:结晶紫初染；碘液媒染；95%乙醇脱色；稀释复红或沙黄复染

第3题：

试述细菌革兰氏染色的步骤、原理和结果?

参考答案：(1)步骤：①先用结晶紫染色，菌体呈紫色;②再加碘液媒染，菌体呈紫色;③然后用乙醇脱色;革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌无色;④最后用沙黄或番红复染，革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。(2)原理：革兰氏染色结果与细胞壁组成有关，因为革兰氏阳性细菌细胞壁较厚，肽聚糖含量较高，网络结构紧密，含脂量又低，当它被酒精脱色时，引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小，从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出，故菌体呈紫色;可是革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量低，而脂类含量高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增大，结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来，故革兰氏阴性细菌呈复合液的红色。(3)结果：革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。

第4题：

简述革兰氏染色的机制？

正确答案: G+细菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使得网孔缩小再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内，使得其保持紫色。
反之，革兰氏阴性细菌因其细胞壁较薄，外膜层内酯含量高，肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，再经沙黄等红色燃料复染，就使革兰氏阴性细菌呈现红色。而革兰氏阳性细菌则保留最初的紫色。

第5题：

革兰氏染色法染色步骤包括（）

正确答案:结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色、稀释复红或沙黄复染

第6题：

石炭酸复红加温染色是革兰氏染色法的初染步骤。

正确答案:错误

第7题：

试述细菌革兰氏染色的机制。

正确答案: 革兰氏染色的机制是由于不同细菌细胞壁化学成分的不同而引起的物理性状的差别是导致革兰氏染色反应不同的原因。通过结晶紫初染和碘液媒染，在任何细菌的细胞膜内都可形成不溶于水的结晶紫—碘复合物。
G+细菌因壁厚，肽聚糖网的层次多和结构致密，以及不含类脂等原因，故用脱色剂（乙醇）处理后，可把结晶紫—碘复合物仍阻拦在细胞内，故呈现紫色；反之，G-细菌因细胞壁薄，外膜层类脂含量高（脂多糖、脂蛋白），以及肽聚糖层薄且交联松散，故用脱色剂乙醇处理后，就可把类脂和结晶紫—碘复合物溶出细胞，这种五色的细胞再经沙黄（番红）复染，就呈现红色。

第8题：

革兰氏染色步骤及原理

正确答案：步骤：革兰氏染色：挑取可疑菌落灭菌盐水→取菌→火焰上固定→结晶紫染色1min→水洗→革兰氏碘液染色1min→水洗→95%乙醇染色30S→水洗→沙黄复染液染色1min→水洗→待干→镜检原理：（1）细胞壁学说：革兰氏阳性菌细胞壁薄，碱性染料容易进入细菌体内，媒染时，加固染色，脱色时不易脱掉；革兰氏阴性菌细胞壁厚，不易染上，脱色时易脱掉，复染时便为粉红色（2）等电点学说：革兰氏阳性菌等电点低并带负电荷比革兰氏阴性菌多，遇带正电荷碱性染料结合牢固；革兰氏阴性菌带正电，遇酸性染料结合牢固；（3）酶学说：革兰氏阳性菌中含有一种核糖核酸镁盐及多糖复合物能牢固与结晶紫和碘液结合着色，相反革兰氏阴性菌中含有核糖核酸镁盐及多糖复合物少易被酒精脱色而成阴性

第9题：

试以大肠杆菌为例，简述采用革兰氏染色法染色的结果、原理及主要操作步骤。

正确答案: 结果：G-，菌体呈复染液颜色（红色）原理：G-菌细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高。当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增加，致使结晶紫-碘的复合物被抽出，最后被染上了复染液（沙黄或番红）的颜色（红色）。主要操作步骤：涂片：培养一定时间的菌种均匀涂布于载玻片上，干燥、固定；染色：结晶紫初染碘液媒染95％乙醇脱色沙黄或番红复染；油镜观察。

第10题：

简述革兰氏染色的原理以及步骤。

正确答案:原理：革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学祖坟基础上的一种物理原因。通过初染与媒染操作后，在细菌细胞的膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁厚，肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密，故在用乙醇处理不能在壁上溶出裂缝，因此结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁上，使其呈现紫色。反之，革兰氏阴性细菌引起壁薄，肽聚糖含量低和交联松散，遇乙醇后，肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样，结晶紫与碘的复合物就极易溶出细胞壁，经乙醇脱色后，细胞呈无色。这时，在经沙黄复染，使革兰氏阴性菌呈红色。步骤：涂片→干燥固定→结晶紫初染1’→水洗→碘液媒染1’→水洗→95%酒精脱色约30’→水洗→沙黄复染1’→水洗→干燥→油镜镜检

论述革兰氏染色步骤及机制。

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