一般PCR反应中包括几种基本成份?它们的功能分别是什么?

题目
问答题
一般PCR反应中包括几种基本成份?它们的功能分别是什么?
参考答案和解析
正确答案: 7种基本成分:模板,特异性引物,热稳定DNA聚合酶,脱氧核苷三磷酸(dNTP),二价阳离子,缓冲液及一价阳离子,石蜡油(可忽略)
模板:待扩增的DNA或RNA,甚至细胞;
引物:与靶DNA的3’端和5’端特异性结合的寡核苷酸片段,是决定PCR特异性的关键。只有每条引物都与靶DNA特异性结合,才能保证其特异性,引物越长,特异性越高。两段引物间的距离决定了扩增片断的长度;两引物的5’端决定了扩增产物的5’端位置。说明引物决定了扩增片断的长度、位置和结果。
DNA聚合酶:a.聚合作用,将dNTP中脱氧单核苷酸逐个加到3’-OH末端,b.3’-5’外切酶活性,校正功能,c.5’-3’外切酶活性,切除错配核苷酸;
石蜡油:维持恒热和整个体系中盐浓度,减少PCR过程中尤其是变性时液体蒸发所造成的产物的丢失。
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相似问题和答案

第1题:

大气降水可分为哪几种基本类型?它们的成因分别是什么?


正确答案:大气降水可分为地形雨.对流雨.锋面雨三种基本类型。地形雨是暖湿气流在运行中,遇山地阻挡被迫抬升达到凝结高度时,水汽凝结形成的降水。
对流雨是近地面气层强烈受热,气团强烈上升.冷却.迅速达到水汽饱和时形成的。锋面雨是冷暖两气团相遇时产生的降水。多形成于温带。

第2题:

提高PCR反应的特异性一般可以使用哪几种方法?


正确答案: A.引物设计:引物长度、碱基配对是否严格、GC%含量、退火温度、引物浓度与纯度、稳定性、是否为简并性引物等;
B.使用热启动:在变性完成之后再加入DNA聚合酶(或聚合酶才有活性),这样可以提高特异性,因为DNA聚合酶在低温时也有活性,可能引起非特异的扩增;
C.镁离子浓度:不同的模板和引物有不同的镁离子浓度,应进行预实验进行探索;较高的镁离子浓度会提高产量,同时降低特异性;dNTP浓度较高时应适当提高镁离子浓度;
D.促进PCR的添加剂:降低DNA熔解温度,从而有助于引物退火并辅助DNA聚合酶延伸通过二级结构区,可提高特异性和产率;
E.使用巢式PCR:降低扩增多个靶位点的可能性,提高特异性。

第3题:

索引分为哪几种类型?分别是什么?它们的主要区别是什么?


正确答案:分为聚集索引和非聚集索引两种。聚集索引会对数据进行物理排序,非聚集索引不对数据进行物理排序。

第4题:

PCR的基本反应过程包括:()、()、()三个阶段。


正确答案:变性;退火;延伸

第5题:

交易委托单有哪几种状态,它们分别代表的含义是什么?


正确答案:网上交易委托单有下列状态:
待撤:撤单指令还未报到场内。
正撤:撤单指令已送达公司,正在等待处理,此时不能确定是否已进场;
部撤:委托指令已成交一部分,未成交部分被撤销;
已撤:委托指令全部被撤消;
未报:委托指令还未送入数据处理;
待报:委托指令还未被数据处理报到场内;
正报:委托指令已送达公司,正在等待处理,此时不能确定是否已进场;
已报:已收到下单反馈;
部成:委托指令部份成交;
已成:委托指令全部成交;
撤废:撤单废单,表示撤单指令失败,原因可能是被撤的下单指令已经成交了或场内无法找到这条下单记录;
废单:交易所反馈的信息,表示该定单无效。

第6题:

在SQL语句中可以使用哪几种聚集函数?它们的基本功能是什么?


正确答案: 系统允许在命令中使用的聚合函数有:
SUM(<字段>)求该字段或列值的和
AVG(<字段>)求该字段或列值的平均值
COUNT(*)求记录行总数
COUNT(条件)求满足条件的总行数
MIN(<字段>)求该字段、列或表达式中最小值
MAX(<字段>)求该字段、列或表达式中最大值

第7题:

一般PCR反应中包括几种基本成份?它们的功能分别是什么?


正确答案: 7种基本成分:模板,特异性引物,热稳定DNA聚合酶,脱氧核苷三磷酸(dNTP),二价阳离子,缓冲液及一价阳离子,石蜡油(可忽略)
模板:待扩增的DNA或RNA,甚至细胞;
引物:与靶DNA的3’端和5’端特异性结合的寡核苷酸片段,是决定PCR特异性的关键。只有每条引物都与靶DNA特异性结合,才能保证其特异性,引物越长,特异性越高。两段引物间的距离决定了扩增片断的长度;两引物的5’端决定了扩增产物的5’端位置。说明引物决定了扩增片断的长度、位置和结果。
DNA聚合酶:a.聚合作用,将dNTP中脱氧单核苷酸逐个加到3’-OH末端,b.3’-5’外切酶活性,校正功能,c.5’-3’外切酶活性,切除错配核苷酸;
石蜡油:维持恒热和整个体系中盐浓度,减少PCR过程中尤其是变性时液体蒸发所造成的产物的丢失。

第8题:

PCR反应的产物中一般会生成几种长度不同的产物?


正确答案: PCR反应中一般会产生2种不同长度的产物:一种是预期长度的产物,一种是比预期长度长得多的产物;前者以指数级数增加(2的n次方),后者以几何级数增加(2n)。因此后者在总产物中所占比重很小,可忽略不计。

第9题:

手机切换的类型有哪几种?它们分别是什么?


正确答案:有四种方式,分别是同一基站内不同信道间的切换、同一BSC下不同基站之间的切换、同一MSC下不同BSC之间的切换、不同MSC之间的切换。

第10题:

灭火的方法有几种?它们分别是什么?


正确答案:四种:隔离法,窒息法,冷却法,抑制法。