试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。

题目
问答题
试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。
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相似问题和答案

第1题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是

A、通用引物-PCR方法(general primermediated PCR,CJP-PCR)

B、多重PCR(multiplex PCR)

C、套式PCR(nestcd primers-polymerasc chain reaction,NP-PCR)

D、AP-PCR方法(arbitrarily primcd PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第2题:

引物设计的基本原则有哪些?


正确答案: A.引物长度一般在20~24bp(≥16,≤30):这样长度的引物保证了不易形成杂合体;
B.(G+C)%含量:两段引物的此数值应相近;在已知模板序列时应与模板的相近。40%-60%;
C.引物本身不能形成明显的次级结构,如发卡结构;
D.两引物间不可发生互补(特别是3’端,若不可避免那3’端互补碱基不可超过2个碱基);
E.引物3’端配对:引物3’端为DNA聚合酶连上寡核苷酸的地方,因此该端5-6个碱基与DNA的配对必须严格、准确。

第3题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是

A、通用引物-PCR方法(general primer-media-ted PCR,GP-PCR)

B、多重PCR(multiplex PCR)

C、套式PCR(nested primers-polymerase chain reaction,NP-PCR)

D、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第4题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是()

  • A、通用引物-PCR方法(general primermediated  PCR,CJP-PCR)
  • B、多重PCR(multiplexPCR)
  • C、套式PCR(nestcdprimers-polymerasc  chain reaction,NP-PCR)
  • D、AP-PCR方法(arbitrarily primcdPCR)
  • E、原位PCR技术(in situPCR,ISPCR)

正确答案:C

第5题:

对于镰状细胞贫血病的突变机理可以采用的基因诊断方法不可以是()。

  • A、设计等位基因特异性引物进行PCR
  • B、测序
  • C、PCR与限制性核酸内切酶技术结合
  • D、核酸分子杂交
  • E、在突变位点两侧设计引物再电泳分析PCR产物长度变化

正确答案:E

第6题:

PCR技术中,扩增引物的设计无需考虑

A、引物长度

B、靶序列长度

C、引物二聚体形成

D、引物自身杂交

E、引物3′端内的已知靶序列或未知靶序列


参考答案:B

第7题:

以下关于PCR的说法错误的是()

  • A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
  • B、应用PCR技术可以进行定点突变
  • C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
  • D、PCR反应中,仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

正确答案:C

第8题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用下列哪种PCR技术?( )

A、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)

B、通用引物-PCR方法(general primer-mediated PCR,GP-PCR)

C、套式PCR(nested primers-polymerase chainreaction,NP-PCR)

D、多重PCR(multiplex PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第9题:

试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。


正确答案: (1)引物的长度一般15~30bp;
(2)引物扩增跨度:以500bp为宜,特定重要条件下可扩增长至10kb的片段;
(3)引物碱基:G+C含量以40%~60%为宜,A、T、G、C最好随机分布,避免5个以上的嘌吟或嘧啶核苷酸的成串排列;
(4)避免引物内部出现二级结构:避免两条引物间互补,特别是3′端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异性的扩增条物;
(5)引物3′端的碱基必须与模板严格配对,而且尽量不要为A,最好选择T,因为3′端末位为T时错配几率大大降低;
(6)产物有或能加上合适的酶切位点;
(7)被扩增的靶序列最好有适宜的酶切点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。

第10题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用下列哪种PCR技术?()

  • A、AP-PCR方法(arbitrarily  primed  PCR)
  • B、通用引物-PCR方法(general  primer-mediated  PCR,GP-PCR)
  • C、套式PCR(nested  primers-polymerase  chainreaction,NP-PCR)
  • D、多重PCR(multiplexPCR)
  • E、原位PCR技术(in  situ PCR,ISPCR)

正确答案:C