叙述凯氏定氮法测定蛋白质的原理和操作步骤。

题目

叙述凯氏定氮法测定蛋白质的原理和操作步骤。

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相似问题和答案

第1题:

凯氏定氮法测定粮油及其制品中粗蛋白含量的主要操作步骤是什么?


正确答案: (1)消化;
(2)蒸馏;
(3)滴定;
(4)计算。

第2题:

凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的基本过程是:消化、蒸馏、吸收和滴定。


正确答案:正确

第3题:

凯氏定氮法测定蛋白质步骤分为(),();();()。


正确答案:湿法消化、碱化蒸馏、硼酸吸收、盐酸标定

第4题:

简述直接滴定法测定食品中还原糖的原理及操作步骤。


正确答案:1.原理:样品经除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝作指示剂,直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液,根据样品液消耗体积计算还原糖量。
2.操作步骤
(1)样品处理:取适量样品,对样品进行提取,提取液移入250mL容量瓶中,慢慢加入5mL乙酸锌溶液和5mL亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,摇匀后静置30分钟。用干燥滤纸过滤,弃初滤液,收集滤液备用。
(2)碱性酒石酸铜溶液的标定:准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液,置于250mL锥形瓶中,加水,加玻璃珠3粒。从滴定管滴加葡萄糖标准溶液,加热使其在2分钟内沸腾,准确沸腾30秒钟,趁热以每2秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次,取其平均值。
(3)样品溶液预测:吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液,置于250mL锥形瓶中,加水加玻璃珠3粒,加热使其在2分钟内至沸,准确沸腾30秒钟,趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液,滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时.以每2秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。
(4)样品溶液测定:吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液,置于锥形瓶中,加玻璃珠3粒,从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积少1mL的样品溶液,加热使其在2分钟内沸腾,准确沸腾30秒钟,趁热以每2秒1滴的速度继续滴加样液,直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积。同法平行操作3份,取平均值。

第5题:

试述用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白含量的基本原理。


正确答案:实验原理:饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物(氨化物有氨基酸、酰胺、硝酸盐及铵盐等),两者总称为粗蛋白质。凯氏定氮法的基本原理是用硫酸分试样中蛋白质与氨化物,使它们含氮物都转变成氨气,氨气被浓硫酸吸收变为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气。通过蒸馏,氨气随汽水顺着冷凝流入硼酸溶液,与之结合成为四硼酸铵,后者用盐酸标准液滴定,即可测定放出的氨氮量。根据氮量,乘以特定系数,一般为6.25,即可得出样本中粗蛋白质含量。
上述过程中的化学反应如下:
2CH3CHNH2COOH+13H2SO4→(NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2O
(NH4)2SO4+2NaOH→2NH3↑+2H2O+Na2SO4
4H3BO3+NH3→NH4HB4O7+5H2O
NH4HB4O7+HCl+5H2O→NH4Cl+4H3BO3
实验步骤:分为消化、蒸馏、滴定三个方面,写出测定步骤。

第6题:

凯氏定氮法测定蛋白质的步骤是()。

  • A、蒸馏→消化→吸收→滴定
  • B、消化→吸收→滴定
  • C、消化→蒸馏→吸收→滴定
  • D、消化→蒸馏→滴定

正确答案:C

第7题:

凯氏定氮法测定蛋白质步骤分为湿法消化,();();盐酸标定。


正确答案:碱化蒸馏;硼酸吸收

第8题:

凯氏定氮法测定样品中蛋白质含量时,其蛋白质换算系数为__________。


正确答案:
6.25

第9题:

简述分光光度法测定总黄酮原理及操作步骤。


正确答案:原理:黄酮类化合物是指2个苯环通过碳链相互联结而成的一系列化合物的总称。黄酮类化合物中的3-羟基、4-羟基、5-羟基、4-碳基或邻二位酚羟基,在碱性条件下可以与铝盐进行络合反应生成红色的络合物。其呈色强度与溶液中黄酮类化合物的含量成正比。
操作步骤:固体样品:滤纸包紧,70%乙醇浸润,80℃回流,至黄酮类化合物提取完全。抽提液冷却后,抽压过滤。去除乙醇。氯仿分次萃取,收集水溶液定溶。称取预处理的聚酰胺树脂粉末,湿法装柱,水饱和。吸取一定量水溶液,层析柱吸附,用70%乙醇洗脱,至无色。析出也用洗脱机定溶后测定。绘制曲线。测定。

第10题:

简述蛋白质免疫印迹法的基本原理和主要操作步骤。


正确答案: 蛋白质印迹法又称蛋白质免疫印迹法,是20世纪70年代末80年代初在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定的基础上发展起来的蛋白质检测技术,为检测样品中是否存在蛋白质抗原提供了一种可靠的方法。该法鉴定蛋白质的原理是根据被测蛋白能与特定抗体的结合特性和该蛋白的相对分子质量。
免疫印迹法程序可分为5个步骤:
(1)蛋白样品的制备;
(2)经过SDS-PAGE分离样品;
(3)分离的蛋白转移到膜载体上,转移后首先将膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附;
(4)用固定在膜上的蛋白质作为抗原,与对应的非标记抗体(一抗)结合;
(5)洗去未结合的一抗,加入酶耦联或放射性同位素标记的二抗,通过显色或放射性自显影法检测凝胶中的蛋白成分。