说明Sanger DNA测序法的原理。

题目

说明Sanger DNA测序法的原理。

参考答案和解析
正确答案: SangerDNA测序法是建立在两个基本原理之上:
(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5’端向3’端聚合;
(2)可延伸的引物必须能提供游离的3’羟基末端,双脱氧核苷酸由于缺少游离的3’羟基末端,因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应,则会获得4组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。
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相似问题和答案

第1题:

目前自动化测序的基本原理是基于

A、链末端终止法

B、化学降解法

C、生物质谱法

D、杂交测序法

E、全新的测序原理


参考答案:A

第2题:

Sanger双脱氧终止法对DNA测序时,下列哪种核苷酸的加入会使DNA链延长终止()

A、dGTP

B、dTTP

C、dCTP

D、Datp


参考答案:C

第3题:

Sanger法测序的待测模板包括

A、单链DNA

B、双链DNA

C、单链RNA

D、双链RNA

E、任意核酸


参考答案:AB

第4题:

简述利用双脱氧末端终止法(Sanger法)测定DNA一级结构的原理与方法?


正确答案: 原理是采用核苷酸链终止剂—2,,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH,一旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有两种可能性,一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长,直至参入下一个ddNTP。根据这一方法,就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后,聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。

第5题:

目前DNA测序仪的工作原理,主要是利用()。


正确答案:双脱氧链末端终止法和化学降解法

第6题:

DNA测序技术中的链末端终止法又称为

A、经典法

B、传统法

C、酶法

D、Sanger法

E、自显影法


参考答案:CD

第7题:

Sanger建立的DNA测序技术是()。

  • A、合成终止法
  • B、化学断裂法
  • C、杂交法
  • D、PCR法
  • E、基因芯片法

正确答案:A

第8题:

Sanger法的测序体系包括

A、待测模板

B、测序引物

C、RNA聚合酶

D、标记的dNTP

E、凝胶电泳


参考答案:ABDE

第9题:

DNA杂交测序法


正确答案:是利用杂交技术来测定DNA序列的方法。其基本原理是用一套已知序列、长度特异、具有所有可能的碱基序列的寡核苷酸探针,与未知序列的待测DNA片段进行分子杂交,然后根据寡核苷酸探针完全杂交互补的情况推知待测DNA的碱基序列。

第10题:

SANGER双脱氧链终止法的原理是什么?


正确答案: DNA链中核苷酸以3’,5’-磷酸二酯键连接,合成DNA所用的底物是2’-脱氧核苷三磷酸。2’,3’ddNTP与普通dNTP不同,它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中,但由于没有3’羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争,产物是一系列的核苷酸链,其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP,结果将产生4组寡核苷酸,它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。