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Sanger法的测序体系包括（　）

题目
多选题
Sanger法的测序体系包括（　）
A

待测模板

B

测序引物

C

RNA聚合酶

D

标记的dNTP

E

凝胶电泳

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第1题：

DNA测序技术中的链末端终止法又称为

A、经典法

B、传统法

C、酶法

D、Sanger法

E、自显影法


参考答案：CD

第2题：

Sanger双脱氧终止法对DNA测序时,下列哪种核苷酸的加入会使DNA链延长终止()

A、dGTP

B、dTTP

C、dCTP

D、Datp


参考答案：C

第3题：

Sanger法测序的待测模板包括

A、单链DNA

B、双链DNA

C、单链RNA

D、双链RNA

E、任意核酸


参考答案：AB

第4题：

简述利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？


正确答案: 原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP，结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP，使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。

第5题：

有关Sanger测序描述正确的是（）。

  • A、ddNTP底物带来了延伸终止
  • B、利用高温终止延伸反应
  • C、以RNA链合成反应为基础
  • D、反应底物为dNTP或NTP
  • E、四个延伸终止反应可合并进行

正确答案:A

第6题：

链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术，应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成，并熟悉其特点。链末端终止法包括4组独立的酶反应体系，这4组不同的酶反应体系在于分别加入了不同的A、dNTP

B、标记的dNTP

C、ddNTP

D、标记的ddNTP

E、dNTP与ddNTP

链末端终止法中链的持续延伸与随机但特异发生的链终止反应展开竞争，结果产生一系列酶促产物，终止于互补链上的碱基是A、A，T，C，G

B、A，U，C，G

C、A，C，G

D、A，T，C

E、A，U，C

对于未知序列测序，链末端终止法的测序引物为A、其亚克隆载体序列的随机引物

B、其亚克隆载体序列的定向引物

C、其亚克隆载体序列的待测引物

D、其亚克隆载体序列的通用引物

E、其亚克隆载体序列的双链引物

链末端终止法的测序准确性可能受到多种因素影响，其主要原因在于A、该法的测序载体不确定

B、该法的测序引物不确定

C、该法的DNA聚合酶不确定

D、该法的待测模板不确定

E、该法测定的序列是酶促反应生成的产物


参考答案：问题 1 答案：C


问题 2 答案：A


问题 3 答案：D


问题 4 答案：E

第7题：

Sanger建立的DNA测序技术是（）。

  • A、合成终止法
  • B、化学断裂法
  • C、杂交法
  • D、PCR法
  • E、基因芯片法

正确答案:A

第8题：

Sanger法的测序体系包括

A、待测模板

B、测序引物

C、RNA聚合酶

D、标记的dNTP

E、凝胶电泳


参考答案：ABDE

第9题：

采用荧光标记终止底物法的测序反应体系中，包含（）。

  • A、DNA模板
  • B、引物
  • C、dNTP
  • D、ddNTP
  • E、水解酶

正确答案:A,B,C,D

第10题：

SANGER双脱氧链终止法的原理是什么？


正确答案: DNA链中核苷酸以3’，5’-磷酸二酯键连接，合成DNA所用的底物是2’-脱氧核苷三磷酸。2’，3’ddNTP与普通dNTP不同，它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中，但由于没有3’羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，因此，正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP，链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争，产物是一系列的核苷酸链，其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP，结果将产生4组寡核苷酸，它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。

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