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小批量碱变性提取质粒DNA的原理与基本过程如何？

题目

小批量碱变性提取质粒DNA的原理与基本过程如何？

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第1题：

关于DNA变性描述错误的是

A、DNA变性是DNA降解过程

B、DNA变性不涉及共价键的断裂

C、DNA变性是氢键断裂变成单键的过程

D、热和酸碱度的改变可以引起DNA变性

E、变性过程通常伴随260nm紫外吸光度值增高


参考答案：A

第2题：

关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确 ( )

A、溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体

B、溶液Ⅱ的作用是使DNA变性

C、溶液Ⅲ的作用是使DNA复性

D、质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性

E、该方法简单，重复性好，在实验中经常使用


参考答案：A

第3题：

用醇类溶剂提取法提取脂溶性生物碱的原理（ ）。


正确答案：C

第4题：

试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。


正确答案: 质粒DNA提取的方法包括碱裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。
碱裂解法：在NaOH存在的强碱性（pH12.0～14.0）的条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞，并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。它是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。
煮沸裂解法：是将细菌悬浮于含Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，Triton X-100和溶菌酶能破坏细胞壁，再用沸水浴裂解细胞，使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性。对CCC质粒DNA因结构紧密不会解链，当温度下降后，CCC质粒DNA可重新回复其超螺旋结构，通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA，然后回收上清液中的质粒DNA。本法只能用于小质粒DNA（小于15kb）的小量或大量制备，适用于大多数从大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA。
S.DS裂解法：它是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁，再用SDS裂解去壁细菌，从而温和地释放出质粒DNA到等渗溶液中，然后用酚/氯仿抽提。适用于大质粒DNA的提取。

第5题：

质粒提取过程中SDS的作用是（ ）。

A.抑制DNA酶的活性
B.水解RNA
C.裂解细胞膜
D.维持渗透压
E.沉淀DNA

答案：C
解析：
SDS为表面活性剂，其作用是裂解细胞膜。

第6题：

PCR反应的基本过程是

A、退火-DNA合成-变性

B、DNA合成-退火-变性

C、变性-DNA合成-退火

D、变性-退火-DNA合成

E、DNA合成-变性-退火


参考答案：D

第7题：

在碱裂解法提取质粒时，用于沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.75%乙醇

D.异丙醇

E.无水乙醇


参考答案：E

第8题：

在碱裂解法提取质粒时，沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.异丙醇

D.75%乙醇

E.无水乙醇


参考答案：E

第9题：

关于PCR的原理，以下论述错误的是（）

  • A、DNA的合成是以一股DNA单链为模板
  • B、在引物的存在下，DNA多聚酶沿模板以3’→5’方向延伸引物的过程
  • C、PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成
  • D、包括三个步骤：①DNA变性②引物与靶DNA退火③引物延伸

正确答案:B

第10题：

质粒与病毒的主要区别是（）。

  • A、质粒DNA是环状的
  • B、质粒可以在大肠杆菌内繁殖
  • C、质粒DNA与蛋白质结合
  • D、病毒基因组能编码外壳蛋白

正确答案:D

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