填空题质粒DNA常用的提取方法有：__________、________________、________________。

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填空题

质粒DNA常用的提取方法有：__________、________________、________________。

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第1题：

在碱裂解法提取质粒时，沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.异丙醇

D.75%乙醇

E.无水乙醇

参考答案：E

第2题：

常采用质粒DNA小量提取的方法是 ( )

A、碱裂解法

B、SDS裂解法

C、煮沸裂解法

D、酚抽提法

E、牙签少量制备法

参考答案：A

第3题：

重组DNA技术中常用的载体有( )。

A、cRNA

B、mRNA

C、细菌质粒

D、tRNA

E、RNA

正确答案：C

第4题：

试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。

正确答案: 质粒DNA提取的方法包括碱裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。
碱裂解法：在NaOH存在的强碱性（pH12.0～14.0）的条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞，并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。它是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。
煮沸裂解法：是将细菌悬浮于含Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，Triton X-100和溶菌酶能破坏细胞壁，再用沸水浴裂解细胞，使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性。对CCC质粒DNA因结构紧密不会解链，当温度下降后，CCC质粒DNA可重新回复其超螺旋结构，通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA，然后回收上清液中的质粒DNA。本法只能用于小质粒DNA（小于15kb）的小量或大量制备，适用于大多数从大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA。
S.DS裂解法：它是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁，再用SDS裂解去壁细菌，从而温和地释放出质粒DNA到等渗溶液中，然后用酚/氯仿抽提。适用于大质粒DNA的提取。

第5题：

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的正确叙述是（）

A、该法是一种条件比较温和的物理方法
B、煮沸能完全灭活核酸内酶A
C、不适用于大多数Ecoli菌株
D、适用于HB101菌株
E、适用于<15kb的质粒DNA制备

正确答案:E

第6题：

常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括

A、α互补筛选

B、插入失活筛选

C、杂交筛选

D、质粒的小量快速提取

E、DNA序列测定筛选

参考答案：D

第7题：

在碱裂解法提取质粒时，用于沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.75%乙醇

D.异丙醇

E.无水乙醇

参考答案：E

第8题：

提取DNA的方法有多种，在用酚，氯仿法中最后可用于沉淀DNA的常用试剂是

A、无水酒精

B、蛋白酶K

C、SDS裂解液

D、醋酸钠

E、水

正确答案：A

第9题：

目前使用较为广泛的质粒DNA小量提取的方法是（）

A、牙签少量制备法
B、小量一步提取法
C、SDS裂解法
D、碱裂解法
E、煮沸裂解法

正确答案:D

第10题：

对人类糖尿病的基因治疗研究大致步骤如下，由此可知（） ①提取目的基因 ②将目的基因与质粒结合为重组质粒 ③将重组质粒导入大肠杆菌 ④重组质粒在菌体内增殖 ⑤分离重组质粒，提取目的基因 ⑥将目的基因与某种病毒结合为重组DNA ⑦将重组DNA导入人体有基因缺陷的细胞 ⑧目的基因的检测和表达

A、过程①目的基因应来自患者本人
B、过程④是为了修饰基因
C、过程②、⑥在细胞内进行
D、目的基因导入不同受体细胞目的不同

正确答案:D

质粒DNA常用的提取方法有：、、______。

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