问答题碱裂解法制备质粒DNA的方法有哪些？

题目

问答题

碱裂解法制备质粒DNA的方法有哪些？

参考答案和解析

正确答案：（1）接种菌落于含抗生素的LB中，37℃剧烈振荡反应；
（2）培养液4℃12000rpm30min离心；
（3）重悬细菌于100μl冰预冷的溶液I（50mM葡萄糖25mMTris-HCL（pH8.0），10mMEDTAPh8.0）中剧烈振荡；（4）加200μl亲配制液溶液II（0.2MNaOH1%SDS），混合内容物，不要振荡，置冰上；
（5）加150μl冰预冷溶液III（5MKac60ml，冰乙酸11.5ml，水28.5ml），温和振荡10s置于阔步3-5min；
（6）40℃。12000rpm离心5min，转移上清；
（7）上清加等量酚；氯仿抽提，4℃，12000rpm离心2min，收集上清；
（8）加入2倍体积乙醇，振荡混合，室温放置2min；
（9）4℃，12000rpm，离心5min，弃上清；
（10）倒置离心管，倾干液体；
（11）1ml70%乙醇4℃洗涤沉淀，弃上清，空气中干燥10min；
（12）用500μl含无DNA酶的胰RNA酶（20μg/ml）的TE重新溶解核酸，振荡，贮于-20℃。

解析：暂无解析

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第1题：

在碱裂解法提取质粒时，沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.异丙醇

D.75%乙醇

E.无水乙醇

参考答案：E

第2题：

在碱裂解法提取质粒时，用于沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.75%乙醇

D.异丙醇

E.无水乙醇

参考答案：E

第3题：

中国药典采用红外光谱法鉴别药物时,试样制备方法有哪些?应注意哪些问题?

参考答案：压片法、糊法、膜法、溶液法注意问题：固体药品的测定受晶型的影响采用压片法时，盐酸盐样品需使用KCl基质。傅立叶变化红外光谱仪系单光束型仪器，测定时需采用干燥的氮气吹扫来消除二氧化碳和水汽的干扰。本法对多组分药物或存在多晶现象的药物不适用。制剂的鉴别一般需采取提取分离后压片测试。仪器间的分辨率的差异及操作条件的不同可能影响药品光谱图，应将测定药品用的仪器上获得的聚苯乙烯薄膜光谱图与药典收录的聚苯乙烯薄膜光谱图加以比较。《中国药典》红外光谱图的波数范围：4000～400cm-1

第4题：

工业上淀粉水解糖的制备方法有哪些（）

A、酸解法
B、酸酶法
C、酶酸法
D、双酶法

正确答案:A,B,C,D

第5题：

简述微囊制备方法中物理机械法有哪些？

正确答案:1.喷雾干燥法：将囊心物分散在囊材溶液中，在惰性的热气流中喷雾，在干燥过程中，使溶解囊材溶剂迅速蒸发，囊材收缩成壳，将囊心物包裹。
2.喷雾冻结法：将囊心物分散于熔融的囊材中，将此混合物喷雾于冷气流中，凝固而成微囊。
3.流化床包衣法：利用垂直强气流使囊心物悬浮在包衣室中，囊材溶液通过喷雾附着于微粒表面，使囊心物悬浮的热气流很快将囊材的溶剂挥干，这样在囊心物上沉积一层膜壳而成微囊。
4.锅包法：将囊材配成溶液，加入或喷入包衣锅内的固体囊心物上，形成微囊。

第6题：

常采用质粒DNA小量提取的方法是 ( )

A、碱裂解法

B、SDS裂解法

C、煮沸裂解法

D、酚抽提法

E、牙签少量制备法

参考答案：A

第7题：

下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是

A:质粒DNA复制为自主复制
B:质粒DNA复制为非自主复制
C:质粒是细菌生命活动不可缺少的物质
D:细菌内结构相似的质粒都能稳定共存
E:质粒DNA不能复制

答案：A

解析：

第8题：

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中，正确的是 ( )

A、该法是一种条件比较剧烈的方法

B、煮沸不能完全灭活核酸内酶A

C、适用于大多数E.coli菌株

D、不适用于表达endA的菌株

E、只能用于小质粒DNA(＜15kb)的小量制备

参考答案：ABCDE

第9题：

羟基磷灰石的制备方法有哪些？本实验室采用了哪些制备方法？

正确答案: 人工合成法：湿式法（水溶液反应）、干式法（固相反应）、水热法、溶胶—凝胶法。天然提取法：海珊瑚水热转化、牛骨、猪骨、人牙。
本实验室采用了水热法。

第10题：

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的正确叙述是（）

A、该法是一种条件比较温和的物理方法
B、煮沸能完全灭活核酸内酶A
C、不适用于大多数Ecoli菌株
D、适用于HB101菌株
E、适用于<15kb的质粒DNA制备

正确答案:E

碱裂解法制备质粒DNA的方法有哪些？

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