简述链末端终止法测定DNA序列的原理。

题目

简述链末端终止法测定DNA序列的原理。

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第1题:

链末端终止法中的PCR循环测序法采用的DNA聚合酶是

A、大肠埃希菌DNA聚合酶

B、Klenow片段

C、测序酶

D、序列酶

E、Taq DNA聚合酶


参考答案:E

第2题:

链末端终止法识读待测序列需

A、根据酶促反应的结果直接判读

B、根据链末端终止反应直接判读

C、根据电泳结果直接判读

D、根据模板链序列推知互补链序列

E、根据互补链序列推知模板链序列


参考答案:E

第3题:

链末端终止法测定的序列是

A、DNA原分子

B、DNA的酶促反应产物

C、DNA的末端序列

D、DNA的中间序列

E、DNA的两端序列


参考答案:B

第4题:

链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。链末端终止法的测序准确性可能受到多种因素影响,其主要原因在于()

  • A、该法的测序载体不确定
  • B、该法的测序引物不确定
  • C、该法的DNA聚合酶不确定
  • D、该法的待测模板不确定
  • E、该法测定的序列是酶促反应生成的产物

正确答案:E

第5题:

Klenow片段的主要用途有()。

  • A、补齐双链DNA的3ˊ末端。
  • B、通过补齐3ˊ端,标记3ˊ末端。
  • C、在cDNA克隆中,第二股链的合成。
  • D、DNA序列分析
  • E、平端连接

正确答案:A,B,C,D

第6题:

化学降解法测定的序列是

A、DNA原分子

B、DNA的酶促反应产物

C、DNA的末端序列

D、DNA的中间序列

E、DNA的降解序列


参考答案:A

第7题:

简述化学法测定DNA序列的基本原理。


正确答案:化学法是对待测DNA进行化学降解。在化学法的测序系统中,先对待测DNA末端进行放射性标记,然后分成4组或5组互为独立的化学反应体系,每一组用不同的化学试剂特异地针对某一种或某一类碱基进行化学切割,通过化学降解后产生长短不一的DNA片段,其长度取决于改组反应所针对的碱基在待测DNA片断中的位置,将各组反应产物通过高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,放射自显影检测后直接识读待测DNA的序列。

第8题:

链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。链末端终止法包括4组独立的酶反应体系,这4组不同的酶反应体系在于分别加入了不同的A、dNTP

B、标记的dNTP

C、ddNTP

D、标记的ddNTP

E、dNTP与ddNTP

链末端终止法中链的持续延伸与随机但特异发生的链终止反应展开竞争,结果产生一系列酶促产物,终止于互补链上的碱基是A、A,T,C,G

B、A,U,C,G

C、A,C,G

D、A,T,C

E、A,U,C

对于未知序列测序,链末端终止法的测序引物为A、其亚克隆载体序列的随机引物

B、其亚克隆载体序列的定向引物

C、其亚克隆载体序列的待测引物

D、其亚克隆载体序列的通用引物

E、其亚克隆载体序列的双链引物

链末端终止法的测序准确性可能受到多种因素影响,其主要原因在于A、该法的测序载体不确定

B、该法的测序引物不确定

C、该法的DNA聚合酶不确定

D、该法的待测模板不确定

E、该法测定的序列是酶促反应生成的产物


参考答案:问题 1 答案:C


问题 2 答案:A


问题 3 答案:D


问题 4 答案:E

第9题:

链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。链末端终止法中链的持续延伸与随机但特异发生的链终止反应展开竞争,结果产生一系列酶促产物,终止于互补链上的碱基是()

  • A、A,T,C,G
  • B、A,U,C,G
  • C、A,C,G
  • D、A,T,C
  • E、A,U,C

正确答案:A

第10题:

限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶切割DNA后不会产生()

  • A、黏性末端
  • B、5′黏性末端
  • C、3′黏性末端
  • D、平末端
  • E、单链缺口

正确答案:E

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