问答题影响原生质体制备的主要因素有哪些？

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影响原生质体制备的主要因素有哪些？

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第1题：

原生质体培养有哪些常用方法？用哪些方法可以实现原生质体融合？

正确答案:培养方法可以分为固体培养法和液体培养法两大类，后来又由此派生出一些不同形式的原生质体培养方法。常用的有液体浅层培养法、固体平板法、悬滴培养法等。
原生质体融合有自发融合、诱导融合。其中诱导融合的方法有：硝酸钠法、多聚化合物法、高pH高Ca++法、聚乙二醇法、还有电融合等方法。

第2题：

影响原生质体制备的因素有哪些？

正确答案:菌体的预处理、菌体的培养时间、酶浓度、酶解温度与时间、渗透压稳定剂。

第3题：

影响原生质体分离效果的因素有哪些？试做分析。

正确答案: 供试材料的基因型和外植体。
酶解条件：酶质量、组合、浓度、pH、光照和温度、渗透压稳定剂质膜稳定剂。
分离条件：离心次数、离心速度、纯化方法、分离纯化持续时间、分离用具。

第4题：

影响原生质制备的因素有哪些？

正确答案: 影响原生质制备的因素：
（1）菌体的预处理；
（2）菌体的培养时间；
（3）酶浓度；
（4）酶解温度；
（5）酶解时间；
（6）渗透压稳定剂。

第5题：

原生质体融合技术的特点有哪些？

正确答案: （1）打破物种界限，可实现远缘杂交；
（2）可实现两上以上同种或不同种微生物细胞融合；
（3）原生质体易于受到诱变剂的作用而成为较好的诱变对象；
（4）可使重组频率大大提高。

第6题：

常用脂质体包封材料有哪些？常见的脂质体制备方法有哪些？

正确答案:脂质体常用的包封材料主要有：
①磷脂类，卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂、合成磷脂。
②胆固醇，调节（增加、减少）膜流动性。
常用的脂质体制备方法有：薄膜分散法；注入法；超声波分散法；冷冻干燥法。

第7题：

试分析影响原生质体培养的主要因素。

正确答案: （1）供试材料的基因型和外植体
（2）酶解条件：酶质量、组合、浓度、pH、光照和温度
（3）渗透压稳定剂
（4）质膜稳定剂
（5）分离条件：离心次数、离心速度、纯化方法、分离纯化持续时间。
（6）分离用具

第8题：

原生质体制备方法

正确答案: ①G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶。
②G-菌原生质体获得：EDTA鳌合剂处理，溶菌酶。
③放线菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶。霉菌原生质体获得：纤维素酶。酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶。

第9题：

影响微生物原生质体制备的因素有哪些？

正确答案: （1）菌体的预处理；
（2）菌体的培养时间；
（3）酶浓度；
（4）酶解温度；
（5）酶解时间；
（6）渗透压稳定剂。

第10题：

影响原生质体制备的主要因素有哪些？

正确答案: （1）菌体的前处理：如在细菌中加入EDTA等；
（2）菌体生理状态：一般在对数生长期胞壁对酶最为敏感；
（3）酶的浓度：一般来说，在一定浓度范围内，原生质体形成率随酶浓度增加而提高，酶浓度过低不利于原生质体形成，但酶浓度过高则导致原生质体再胜率下降；以原生质体形成率和再生率之积达到最大时的酶浓度作为最适酶浓度；
（4）酶解温度：温度对酶解作用和原生质体的再生均发生重要影响，处理时的最适温度应考虑这两方面的结果，常用的酶解温度为20~40℃；
（5）酶解时间：酶解时间过短，原生质体形成不完全，影响融合；酶解时间过长，原生质膜受到损伤，会出现原生质球坡烈失活，再生率下降，影响融合；
（6）渗透压：等渗透压可免除原生质体的膨胀破裂，还有助于酶和底物的结合。

影响原生质体制备的主要因素有哪些？

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