问答题定点突变技术在酶分子修饰中有什么作用？简述其主要技术过程。

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问答题

定点突变技术在酶分子修饰中有什么作用？简述其主要技术过程。

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第1题：

定点突变技术在酶分子修饰中有什么作用？简述其主要技术过程。

正确答案:作用：通过定点突变技术或是化学方法，将酶蛋白分子中的某个氨基酸残基置换为另一个氨基酸残基，观察其对酶催化反应的影响和变化，分析了解该氨基酸残基在酶催化过程中的作用。
技术过程：
A、基因序列分析
B、蛋白质结构分析
C、酶活性中心分析
D、引物设计进行基因定点突变
E、酶基因克隆表达
F、变异特性分析

第2题：

什么是酶分子的化学修饰？有何作用？

正确答案:酶分子的化学修饰：在体外将酶分子通过人工的方法与一些化学基团（物质），特别是具有生物相容性的物质，进行共价连接，从而改变酶的结构和性质。
作用：通过修饰可以使酶分子结构发生某些变化，提高酶的活力，增强酶的稳定性，降低或是消除酶的抗原性等。

第3题：

酶分子修饰技术不断发展，主要的修饰方法有哪些？

正确答案: 酶分子修饰技术不断发展，修饰方法多种多样。主要的有：
①金属离子置换修饰；
②大分子结合修饰；
③肽链有限水解修饰；
④酶蛋白侧链基团修饰；
⑤氨基酸置换修饰；
⑥物理修饰。

第4题：

何谓金属离子置换修饰？简述其主要修饰过程和作用。

正确答案:（1）把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子，使酶的催化特性发生改变的修饰方法成为金属离子置换修饰。
（2）方法：酶的分离纯化、除去原有的金属离子、加入置换离子。
（3）作用：
①阐明金属离子对酶催化作用的影响；
②提高酶的催化效率；
③增强酶的稳定性；
④改变酶的动力学特性。

第5题：

简述点突变技术的主要技术过程及其在酶分子修饰中的作用。

正确答案:新的酶分子结构的设计、突变基因碱基序列的确定、突变基因的获得、新酶的获得。

第6题：

定点突变技术在酶分子修饰中有何应用？

正确答案:定义：指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。是蛋白质工程和酶分子组成单位置换修饰中常用的技术。应用：新的酶分子结构的设计；突变基因碱基序列的确定；突变基因的获得；新酶的获得。

第7题：

简述定点突变技术的主要技术过程及其在酶分子修饰中的应用。

正确答案:定点突变是20世纪80年代发展起来的一种基因操作技术，是指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。定点突变技术是氨基酸置换修饰和核苷酸置换修饰的常用方法，也是蛋白质工程的常用技术。
（1）主要过程：
1.新的酶分子结构的设计；
2.突变基因碱基序列的确定；
3.突变基因的获得；
4.新酶的获得。
（2）应用：
1.酪氨酰-tRNA合成酶的修饰是将第51位的苏氨酸由脯氨酸置换，苏氨酸的密码子是ACU、ACC、ACA、ACG，脯氨酸的密码子是CUU、CCC、CCA、CCG，在mRNA上只需将密码子上的第一个A换成C，在对应的基因上只需将T换成G即可达到置换的目的。
2.T4溶菌酶的修饰是将第3位以异亮氨酸（密码子为AUU、AUC、AUA，对应基因上的碱基次序为TAA、TAG、TAT）置换成半胱氨酸（密码子为UGU、UGC，对应基因上的碱基次序为ACA、ACG），只需在对应基因的位点上置换两个碱基，由AC置换TA即可。

第8题：

目的酶基因的DNA区段一侧含有一酶切位点，可用什么方法对酶分子进行改造（）

A、寡核苷酸引物突变法
B、盒式突变
C、PCR定点突变法
D、大引物突变法

正确答案:A,C,D

第9题：

简述酶分子组成单位修饰的作用。

正确答案:酶分子组成单位修饰的作用：
①提高酶的催化效率；
②增强酶的稳定性；
③改变酶的专一性；
④获得各种核酸类酶。

第10题：

使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术称为酶分子修饰.

正确答案:正确

定点突变技术在酶分子修饰中有什么作用？简述其主要技术过程。

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