问答题简述蛋白质和酶提取、分离的一般原则。

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简述蛋白质和酶提取、分离的一般原则。

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第1题：

提取蛋白质酶用

正确答案：D

第2题：

酶工程辅助提取一般使用的酶是（）

A、蛋白质分解酶
B、蛋白质合成酶
C、纤维素合成酶
D、纤维素分解酶

正确答案:A

第3题：

蛋白质类药物按分子大小分离提取方法有:()、()、()和()。

参考答案：超滤;透析;层析;离心

第4题：

生物样品分析中与药物提取分离有关的操作步骤包括（）

A、蛋白质处理
B、液—液萃取法
C、缀合物水解
D、冷冻干燥
E、酶水解

正确答案:A,B,C,D,E

第5题：

简述酶的提取和结晶方法。

正确答案: 提取方法：
（1）水溶液法：常用稀盐溶液或缓冲液提取。
（2）有机溶剂法：某些结合酶如微粒体和线粒体膜的酶，由于和脂质牢固结合，为此必须除去结合的脂质，且不能使酶变性，最常用的有机溶剂是丁醇。
（3）表面活性剂法：表面活性剂能与蛋白质结含而分散在溶液中，可用于提取结合酶，此法用得较少。
结晶方法：盐析法；有机溶剂法；复合结晶法；透析平衡法；等电点法。

第6题：

提取蛋白质和酶宜用

A、水煮提盐析

B、水煮提醇沉

C、乙酸乙酯提取

D、乙醚提取

E、水冷浸提取再盐析

参考答案：E

第7题：

蛋白质和酶的种类繁多，在提取时应根据其（）、（）及（）的不同选择不同的提取方法。

正确答案:存在的部位；分子结构；溶解性质

第8题：

蛋白质类药物分离提取方法有哪些?

参考答案：(1)沉淀法(盐析、有机溶剂、等电点);
(2)按分子大小分离(超滤、透析、层析、离心);
(3)电荷(离子交换、层析、电泳、等电聚焦);
(4)亲和层析法(酶与底物、抗原与抗体、激素与受体)。

第9题：

简述蛋白质分离纯化的一般程序。

正确答案:首先根据所需蛋白质的性质选取生物体组织细胞作为材料，对所选材料进行细胞破碎、离心等前期处理，获得粗提蛋白质溶液。其次利用蛋白质溶解度的差异对蛋白质进行盐析，使其与杂蛋白分离开来，称为蛋白质的粗分离，再次根据蛋白质的分子大小及形状、电离性质、生物学功能的差异选用凝胶过滤层析、离子交换层析、电泳法、亲和层析等方法进行细分离，可得到较纯的蛋白质，此为蛋白质分离纯化的一般程序。

第10题：

简述蛋白质和酶提取、分离的一般原则。

正确答案: ①提取、分离方法条件要温和使目的蛋白质和酶的活性和功能不受损害
②尽量尽早除去各种杂质、脂类、核酸及毒素。
③设法除去变性的和不需要的蛋白质。
④设法提高目的蛋白质的含量或生物活性。
⑤分离纯化要在缓冲溶液中进行。
⑥建立灵敏、特异、精确的检测方法。
⑦根据其存在的部位、分子结构及溶解性质的不同选择不同的提取方法。

简述蛋白质和酶提取、分离的一般原则。

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