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构建基因组文库时连接方法主要是（）；而构建 cDNA 文库，可用（）；或（）。

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填空题
构建基因组文库时连接方法主要是（）；而构建 cDNA 文库，可用（）；或（）。
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第1题：

构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的

A．染色体DNA

B．线粒体DNA

C．mRNA

D．cDNA


正确答案：A

第2题：

关于cDNA文库的叙述，哪些是正确的


A.仅代表构建文库取材细胞当时表达的成套基因
B.同一种细胞在发育的不同阶段构建的文库，它们包含的基因不尽相同
C.正常肝细胞与肝癌细胞构建的cDNA文库,两者包含的基因不尽相同
D. cDNA文库中不包含内含子序列及基因的调控序列

答案：A,B,C,D
解析：

第3题：

以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()

A、cDNA文库比基因组文库大

B、cDNA文库比基因组文库小

C、cDNA文库和基因组文库一样大

D、二者大小随机，不能比较


参考答案：B

第4题：

下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（）

  • A、cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因
  • B、如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同
  • C、cDNA文厍中的基因都市没有启动子
  • D、一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库往往只有一种

正确答案:B

第5题：

简述基因组文库构建的基本操作？


正确答案:①载体DNA的制备；
②基因组DNA的提取；
③基因组DNA的部分酶切、分离与回收；
④载体与外源片段的连接与转化或侵染宿主细胞；
⑤重组克隆的挑选和保存。

第6题：

构建cDNA文库时，首先需分离细胞的

A．染色体DNA

B．线粒体DNA

C．mRNA

D．cDNA


正确答案：C
解析：基因文库可分为基因组DNA文库和cDNA文库。①基因组DNA文库是指包含某一生物细胞全部基因组DNA序列的克隆群体，它以DNA片段的形式贮存着某一生物的全部基因组DNA信息。基因组DNA文库的构建是将纯化的细胞基因组DNA(染色体DNA)用适当的限制性内切酶消化，获得一定大小的DNA片段，将这些片段克隆到噬菌体载体中，从而获得一群含有不同DNA片段的噬菌体。②cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经反转录而合成的cDNA序列的克隆群体，它以cDNA片段形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。cDNA文库的构建是将组织细胞的mRNA经过反转录合成cDNA，后者被克隆进入质粒或噬菌体载体，转化宿主细胞后获得的克隆群体。

第7题：

构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些？


正确答案: A.cDNA文库的质量
（1）文库的代表性：是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息（即mRNA种类），是体现文库质量的最重要指标。
（2）重组cDNA片段的序列完整性：5’端非翻译区，中间的编码序列和3’端非翻译区，文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构，cDNA是否完整，对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑，使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
B.文库筛选可选择的具体方法，决定文库筛选方法的主要因素是
1.构建文库的克隆载体系统；
2.相应的宿主细胞系统。
最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库，应能够使用多种筛选方法，有效地分离鉴定出目的基因，从而使研究者能够在已有研究条件上，在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。

第8题：

构建cDNA文库时，首先需分离细胞的

A．

B．

C．

D．


正确答案：C
解析：基因文库可分为基因组DNA文库和cDNA文库。①基因组DNA文库是指包含某一生物细胞全部基因组DNA序列的克隆群体，它以DNA片段的形式贮存着某一生物的全部基因组DNA信息。基因组DNA文库的构建是将纯化的细胞基因组DNA(染色体DNA)用适当的限制性内切酶消化，获得一定大小的DNA片段，将这些片段克隆到噬菌体载体中，从而获得一群含有不同DNA片段的噬菌体。②cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经反转录而合成的cDNA序列的克隆群体，它以cDNA片段形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。cDNA文库的构建是将组织细胞的mRNA经过反转录合成cDNA，后者被克隆进入质粒或噬菌体载体，转化宿主细胞后获得的克隆群体。

第9题：

重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）

  • A、通过PCR合成
  • B、化学直接合成
  • C、构建cDNA文库
  • D、构建基因组文库
  • E、从基因组DNA中直接提取

正确答案:E

第10题：

简述cDNA的扣除文库的构建。


正确答案: 将两种不同组织来源的mRNA进行比较，用扣除杂交排除相同部分，即共同表达的那部分mRNA，选出有差异的、特异表达的mRNA，构建成的cDNA文库。
构建过程：从两种不同类型的细胞T、D分别提取mRNA，T细胞mRNA逆转录合成单链的cDNA，向T细胞cDNA中过量加入D细胞总mRNA。
两者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA杂合分子，余下单链cDNA代表了仅仅存在于T细胞表达的基因信息。

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