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怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去？

题目
问答题
怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去？
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第1题：

下面有关限制酶的叙述哪些是正确的 ( )

A、限制酶是外切酶而不是内切酶

B、限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割

C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的

D、一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生粘末端

E、一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端


参考答案：B

第2题：

核糖体的E位点是（）

  • A、真核mRNA加工位点
  • B、tRNA离开原核生物核糖体的位点
  • C、核糖体中受EcoRI限制的位点
  • D、电化学电势驱动转运的位点

正确答案:B

第3题：

核糖体的E位点是()

A、真核mRNA加工位点

B、tRNA离开原核生物核糖体的位点

C、核糖体中受EcoRi限制的位点

D、真核mRNA起始结合位点


参考答案：B

第4题：

下列与DNA重组连接相关的说法正确的是（）

  • A、不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
  • B、同聚尾法连接不仅连接效率高，也易回收插入的片段。
  • C、限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性，将有利于重组连接。
  • D、Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
  • E、平末端连接时，在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。

正确答案:A,D,E

第5题：

两个具有相同黏性末端的DNA片段，在条件适宜时，经酶的作用合成一个重组DNA分子。该酶是（）

  • A、DNA连接酶
  • B、RNA聚合酶
  • C、DNA聚合酶
  • D、限制性内切酶

正确答案:A

第6题：

关于限制性内切酶叙述错误的一项是( )

A.可识别特异的DNA序列
B.DNA双链的切割点常不在同一位点
C.不能产生平头或钝性末端
D.可产生5"-末端突出的黏性末端
E.可产生3′-末端突出的黏性末端

答案：C
解析：

第7题：

用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和载体DNA，产生不同的DNA片段的粘性末端。


正确答案:错误

第8题：

关于限制性内切酶叙述错误的一项是（ ）

A、可产生5′－末端突出的黏性末端

B、可识别特异的DNA序列

C、可产生3′－末端突出的黏性末端

D、不能产生平头或钝性末端

E、DNA双链的切割点常不在同一位点


参考答案：D

第9题：

两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的作用，发生了如下变化，则X酶是（）

  • A、DNA连接酶
  • B、EcoRI酶
  • C、DNA聚合酶
  • D、限制酶

正确答案:A

第10题：

怎样将一个平末端的DNA片段插入到EcoRI的限制位点中去？


正确答案: 可以化学合成一个连接子（linker），即一段长为l0bp含有EcoRI识别位点的短的DNA片段，然后与待克隆片段两端连接起来，如果用EcoRI切割这种连接片段，就会产生EcoRI的单链末端。这种片段就可以插入到任何EcoRI的限制性核酸内切酶位点中。

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